Varieti dan keperluan untuk menggunakan penyelidikan oleh PCR

Share Tweet Pin it

Virus Hepatitis C adalah virus yang mengandungi molekul RNA. Dia mampu mengelakkan tindak balas imun tubuh kerana kemampuannya bermutasi tinggi. Terdapat enam genotip utama virus dan banyak subtipe. Di rantau kita, genotip 1, 2 dan 3 kebanyakannya diedarkan.

Dalam 75-80%, penyakit menjadi kronik, yang menyebabkan fibrosis hati, suatu keadaan di mana tisu hati digantikan oleh tisu penghubung. Fibrosis, seterusnya, membawa kepada kanser atau sirosis. Cara utama penyebaran penyakit adalah melalui darah. Sekiranya seseorang mempunyai petunjuk untuk menjalankan ujian untuk hepatitis C, dia diberikan dua ujian utama. Antibodi kepada virus ditentukan, dan jika tidak ada, ia percaya bahawa dia tidak mempunyai hepatitis. Jika kehadiran antibodi kepada virus hepatitis dikesan dalam darah, analisis PCR dilakukan.

RNA dengan kaedah ini ditentukan dalam darah dalam tempoh 10-12 hari selepas jangkitan dan menunjukkan bahawa virus itu secara aktif mereplikasi dalam badan. Dalam tempoh ini, adalah mustahil untuk mengesan virus dengan cara yang lain, kerana ia masih tidak menghasilkan antibodi tertentu, dan kerosakan hati tidak dapat dilihat dengan ujian biokimia dan biopsi.

Pelbagai kajian menggunakan PCR

Analisis reaksi rantai polimerase mempunyai kelebihan tertentu:

  1. Dalam kajian ini, virus itu sendiri ditentukan, dan bukan produk metaboliknya. Dalam kes ini, mungkin untuk menentukan jenis patogen.
  2. Teknik ini mempunyai kekhususan yang tinggi kerana fakta bahawa hanya seksyen DNA tertentu yang sedang dikaji, kebarangkalian keputusan yang salah akan berkurang.
  3. Ia mempunyai sensitiviti yang sangat tinggi, ia ditentukan walaupun jumlah minimum virus dalam darah.

Terdapat dua kaedah utama untuk menguji darah untuk hepatitis C menggunakan PCR: analisis kualitatif dan kuantitatif PCR. Kaedah kualitatif digunakan untuk menentukan jika ada virus. Sesiapa yang mempunyai antibodi untuk hepatitis telah dikesan dalam darah, analisis seperti itu dijalankan. Hasilnya hanya boleh terdiri dari dua jenis: "dikesan" dan "tidak dikesan", nilai terakhir dianggap sebagai norma.

Hasil ujian positif bermakna bahawa serpihan RNA virus dijumpai dalam sampel, yang, pada gilirannya, menunjukkan bahawa orang itu dijangkiti hepatitis. Dalam kes keputusan negatif, dua pilihan adalah mungkin: tiada jangkitan atau kepekatannya sangat rendah sehingga tidak dapat dikesan oleh teknik ini.

Kaedah kuantitatif berbeza dari segi penyelidikan, dalam tugas dan petunjuknya. Tidak semua pesakit dengan hepatitis menjalani analisis sedemikian. Dia, seperti yang lain, mempunyai matlamat tertentu. Penentuan beban virus atau analisis kuantitatif PCR untuk RNA virus digunakan:

  • untuk menentukan RNA virus dalam darah dan diagnosis "hepatitis virus";
  • untuk meramalkan kronik hepatitis dan perjalanan penyakit;
  • untuk memantau rawatan antiviral dan memutuskan sambungan, pengurangan atau perubahan dalam taktik rawatan.

Kajian ini dijalankan dengan adanya tanda-tanda tersebut:

  • Hepatitis C dikesan oleh kajian kualitatif dan antibodi dikesan dalam darah;
  • dengan hepatitis bercampur;
  • jika terapi antiviral dirancang;
  • semasa dan selepas rawatan untuk hepatitis C;
  • dengan kehadiran hepatitis C. kronik dan akut

Ujian ini dijalankan untuk menganggarkan bilangan unit virus dalam jumlah darah contoh 1 cm³ atau 1 ml. Keputusan diberikan dalam nombor. Petunjuk yang digunakan adalah: IU / ml, yang bermaksud unit antarabangsa setiap mililiter dan salinan per ml, bilangan salinan RNA dalam 1 ml sampel. Semakin tinggi indikator kuantitatif analisis, semakin besar kemungkinan penghantaran virus kepada orang lain.

R-DNA adalah kaedah DNA bercabang. Kaedah yang lebih mudah dan murah. Digunakan untuk bilangan sampel yang lebih besar, mempunyai kepekaan yang rendah, dari 500 IU / ml. Dengan kepekaan sedemikian, ada peluang untuk tidak mengenal pasti virus itu, walaupun ia ada dalam darah.

TMA adalah kaedah penguatan transkrip. Teknik ini mengesan asid nukleik dalam darah. Ia mempunyai kos rendah dan kepekaan yang tinggi, dari 5-10 IU / ml. Teknik yang agak baru yang membolehkan anda mempercepat dan mengurangkan kos proses ujian.

Hasil analisis kuantitatif definisi virus RNA, yang disampaikan oleh makmal, ditafsirkan sebagai berikut:

Apakah RNA Hepatitis C?

Kajian RNA virus hepatitis C adalah prosedur yang paling penting, yang membolehkan anda menetapkan tempoh dan kaedah rawatan pesakit dengan ketepatan yang tinggi. Diagnosis penyakit ini terdiri daripada beberapa ujian darah yang berbeza, seperti:

  • penanda hepatitis C (anti-HCV);
  • penentuan RNA virus hepatitis C (RNA HCV).

Kajian pertama dilakukan pada kecurigaan pertama mengenai hepatitis. Pilihan kedua adalah yang paling penting dalam rawatan RNA HCV, jadi pertimbangkannya dengan lebih terperinci.

Apakah hepatitis C virus?

Hepatitis C virus, atau HCV, adalah penyakit berjangkit yang menjejaskan hati. Jangkitan dengan virus berlaku melalui darah. Anda boleh dijangkiti dengan melakukan pemindahan darah, apabila peraturan untuk mensterilkan instrumen perubatan tidak diikuti. Kurang kerap terdapat kes-kes apabila penyakit itu diperolehi secara seksual atau dari seorang ibu hamil kepada janin. Hepatitis C boleh terdiri daripada 2 jenis.

Hepatitis C kronik adalah yang paling berbahaya. Ia adalah satu bentuk penyakit yang boleh bertahan seumur hidup. Ia membawa kepada masalah yang serius dalam fungsi hati, seperti sirosis atau kanser. Dalam 70-90% orang yang dijangkiti, penyakit itu menjadi kronik.

Bahaya hepatitis C yang paling penting ialah ia berjalan secara rahsia, tanpa tanda-tanda icterik. Pada masa yang sama, mereka sering mengadu demam, mual dan muntah, kelemahan fizikal, peningkatan keletihan, hilang selera dan berat badan. Pada masa yang sama, pada latar belakang pengerasan tisu hati yang kecil, kemerosotan ganasnya sering berlaku. Atas sebab ini, hepatitis C virus sering dipanggil "bom masa" atau "pembunuh penyayang."

Satu lagi ciri penyakit ini adalah perkembangan yang sangat perlahan, dianggarkan dalam berpuluh-puluh tahun.

Sebagai peraturan, mereka yang dijangkiti tidak merasakan apa-apa gejala dan tidak menyedari keadaan sebenar mereka. Sering kali, penyakit hanya dapat dikesan dengan menghubungi doktor mengenai subjek lain.

Pada risiko termasuk:

  • kanak-kanak yang menerima virus hepatitis C daripada ibu mereka;
  • penagih;
  • orang yang menusuk bahagian badan atau tatu dengan instrumen yang tidak steril;
  • menerima darah atau organ penderma (sehingga 1992, apabila hemodialisis tidak dilakukan);
  • orang yang dijangkiti HIV;
  • kakitangan perubatan bersentuhan dengan pesakit yang dijangkiti.

Penentuan RNA Hepatitis C

RNA virus Hepatitis C, yang juga dipanggil Hepatitis C PCR, merupakan kajian bahan biologi (darah), yang boleh digunakan untuk menentukan kehadiran secara langsung genomaterial virus hepatitis itu sendiri dalam badan (sebarang virus tunggal adalah RNA tunggal).

Kaedah ujian utama adalah PCR, atau kaedah tindak balas rantai polimerase.

Terdapat dua jenis ujian darah untuk RNA HCV:

Ujian kualiti

Mengendalikan analisis kualitatif membolehkan menentukan sama ada virus itu ada di dalam darah. Semua pesakit yang telah dijumpai antibodi C-hepatitis mesti lulus ujian ini. Menurut hasilnya, anda boleh mendapat 2 jawapan: virus "hadir" atau "tidak hadir". Dengan hasil ujian yang positif (dikesan), seseorang boleh menilai pembiakan aktif virus yang menjangkiti sel-sel yang sihat di hati.

Ujian yang dijalankan pada PCR berkualiti tinggi disesuaikan dengan sensitiviti tertentu, dari 10 hingga 500 IU / ml. Sekiranya virus hepatitis dikesan dalam darah dengan kandungan tertentu kurang daripada 10 IU / ml, pengesanan virus mungkin menjadi mustahil. Kandungan virus tertentu yang sangat rendah diperhatikan di kalangan pesakit yang mana terapi antivirus telah ditetapkan. Oleh itu, adalah penting bahawa kepekaan sistem perubatan adalah tinggi untuk mendiagnosis dan menetapkan keputusan kualitatif dalam reaksi rantai polimerase.

Seringkali, tindak balas rantai polimerase C-hepatitis dilakukan dengan serta-merta selepas mencari antibodi yang sepadan. Ujian berikutnya, semasa laluan terapi antiviral, dijalankan pada minggu ke-4, ke-12 dan ke-24. Dan analisis lain selepas penamatan HTP dilakukan selepas 24 minggu. Kemudian - sekali setahun.

Ujian kuantitatif

Analisis kuantitatif PCR RNA, yang kadang-kadang dipanggil viral load, menentukan kepekatan (kandungan spesifik) virus dalam darah. Dalam erti kata lain, beban virus ditakrifkan sebagai jumlah tertentu RNA virus, yang boleh dalam jumlah tertentu darah (biasa digunakan 1 ml, sama dengan 1 cm dalam kiub). Unit untuk hasil ujian adalah unit antarabangsa (standard) dibahagikan dengan satu mililiter (IU / ml). Kandungan virus kadangkala muncul secara berbeza, ia bergantung kepada makmal di mana penyelidikan sedang dijalankan. Untuk hepatitis C, penentuan kuantitatif kadangkala menggunakan nilai seperti salinan / ml.

Anda harus memahami bahawa tidak ada ketergantungan khusus dalam keparahan C-hepatitis pada kepekatan ketegangan ini dalam darah.

Semak "pemuatan virus" membolehkan anda menentukan tahap penyakit menular. Oleh itu, risiko menjangkiti orang lain dengan virus meningkat dengan peningkatan kepekatan hepatitis dalam darah. Di samping itu, kandungan virus yang tinggi akan mengurangkan kesan rawatan. Oleh itu, beban virus yang rendah adalah faktor yang sangat baik untuk rawatan yang berjaya.

Di samping itu, ujian hepatitis C dan penentuannya oleh PCR memainkan peranan yang besar dalam penerapan terapi untuk penyakit ini dan menentukan kejayaan rawatan. Berdasarkan keputusan ujian, kursus pemulihan dirancang. Sebagai contoh, jika kepekatan spesifik virus hepatitis terlalu perlahan, terapi antiviral berpanjangan, dan sebaliknya.

Dalam perubatan moden, dipercayai bahawa beban lebih daripada 800000 ME / ml adalah tinggi. Beban melebihi 10,000,000 ME / ml dianggap kritikal. Tetapi pakar dari negara-negara yang berbeza masih tidak mempunyai pendapat yang sama mengenai had virus.

Kekerapan ujian kuantitatif

Secara umum, analisis kuantitatif hepatitis dilakukan sebelum terapi antiviral dan 3 bulan selepas berakhirnya prosedur perubatan untuk menentukan kualiti terapi yang dilakukan.

Akibatnya, ujian kuantitatif akan dianggap sebagai penilaian kuantitatif bagi hasil bagi sampel yang dinyatakan di atas. Akibatnya, keputusan "di bawah julat yang diukur" atau "tidak dikesan dalam darah" akan dikeluarkan.

Parameter kepekaan ujian kualitatif biasanya lebih rendah daripada kepekaan analisis kuantitatif. Transkrip "Hilang" menunjukkan bahawa kedua-dua jenis pemeriksaan tidak menemui RNA virus. Apabila indeks ujian adalah "di bawah jangkauan yang diukur," analisis jenis kuantitatif kemungkinan besar tidak mendapati RNA hepatitis, walaupun ini mengesahkan kehadiran virus dengan kandungan khusus yang sangat kecil.

Hepatitis C dan genotipnya

Genotip RNA virus Hepatitis C mendiagnosis kehadiran jenis genetik yang berbeza dari hepatitis C. Lebih daripada 10 jenis genom virus diketahui sains, tetapi untuk amalan perubatan, ia mencukupi untuk membezakan beberapa genotip yang mempunyai bahagian terbesar di rantau ini. Menentukan jenis genetik memainkan peranan penting dalam memilih masa rawatan, yang sangat perlu jika anda mengambil kira pelbagai kesan sampingan ubat untuk hepatitis.

Kaedah rawatan hepatitis C virus

Satu-satunya cara yang berkesan untuk menyembuhkan virus hepatitis, sebagai peraturan, adalah gabungan 2 ubat: interferon-alpha bersama-sama dengan ribavirin. Secara individu, ubat ini tidak berkesan. Dos ubat yang disyorkan dan masa penggunaan perlu ditetapkan hanya oleh doktor dan secara individu untuk setiap pesakit. Rawatan dengan ubat-ubatan ini boleh mengambil masa 6 hingga 12 bulan.

Hari ini tidak mencipta ubat yang menjamin seratus peratus pemulihan daripada virus itu. Walau bagaimanapun, dengan rawatan yang betul, penyembuhan pesakit boleh mencapai sehingga 90% daripada jumlah kes.

Rna hepatitis dengan mengira norma

Virus hepatitis C dapat melipatgandakan sel darah dan menyebabkan penyakit limfoproliferatif. Terima kasih kepada pelbagai mutasi, pertahanan imun badan semakin lemah, dan genotipe dan subtipe virus muncul. Dengan penentuan jenis yang tepat dan tepat pada masanya, keberkesanan terapi antiviral bergantung. Bahaya jangkitan adalah bahawa penyakit ini adalah asimtomatik. Hanya 15 peratus daripada 100 boleh mengalami loya dan muntah, penurunan berat badan dan demam.

Definisi virus hepatitis C

Kadar standard hepatitis C dalam saiz 40 hingga 60 nm, dengan kebanyakan lipid, kerosakan hati yang disebabkan oleh penyakit akut atau kronik penyakit ini. Hepatitis C, iaitu, virus RNA dari keluarga Togaviridae, sangat berterusan, dihantar melalui pemindahan darah atau penggunaan objek yang tidak steril, bekalan kebersihan yang tidak betul, dan lain-lain. Analisis kuantitatif membolehkan anda memeriksa darah dan mengenal pasti struktur genetik virus yang dijangkiti.

Untuk menentukan hepatitis C dan genotipnya, analisis kuantitatif dilakukan. Bergantung kepada penganalisis, tiga tahap kejadian virus RNA boleh ditentukan.

Subtipe boleh menghasilkan pelbagai modifikasi, jadi kekhususan dan kepekaan penganalisis mesti seratus peratus. Di samping mengesan penyakit ini di dalam pesakit, perlu menentukan tahap keparahannya. Sesetengah makmal tidak mempunyai semua data mengenai penyahkodan virus RNA, terdapat kemungkinan tindak balas positif palsu.

Penyelidikan mengenai hepatitis C akan lebih tepat apabila mengkaji petunjuk ini:

ALAT, Asat; Perisai alkali; LDH.

Menarik perhatian kepada hasil penunjuk ini dan keadaan umum badan, hasilnya dipaparkan menunjukkan tahap jangkitan, bentuk, dan jumlah sel-sel hepatitis C dalam darah. Ini menyumbang kepada proses penyembuhan dan keberkesanan terapi antiviral.

Jenis analisis untuk hepatitis C

Reaksi rantai multi-dimensi (PCR) memberi idea tentang bilangan zarah DNA dalam analisis pesakit yang diambil, dan akan mengenal pasti agen yang berjangkit.

Agen penyebab penyakit berjangkit boleh berlaku. Jangkitan hati, seperti hepatitis C, boleh dirawat dalam masa kita apabila ia dikesan pada masa yang tepat. Jika virus disyaki, analisis PCR dilakukan.

Memandangkan sekian lama gejala virus dapat bertopeng, seseorang mungkin tidak merasakan permulaan penyakit ini. Tetapi dengan pemeriksaan menyeluruh dalam 60-70% kes, hepatitis C dikesan, analisis pertama, di mana ELISA, maka diagnosis PCR berikut. Analisis ini dilakukan dalam tempoh tertentu untuk menentukan tahap penyakit dan menetapkan rawatan yang sesuai. Untuk melakukan tanpa itu, tanpa memohon semua prosedur ini, adalah mungkin, diberi vaksin terhadap hepatitis.

Analisis itu, termasuk diagnostik PCR, memberikan gambaran tentang penyakit, bagaimana virus itu aktif pada tempoh pembangunan yang berbeza.

Pertama, terdapat analisis kualitatif yang hanya mengesahkan hipotesis tentang jangkitan, dan kemudian kuantitatif, menentukan beban pada hati. Pilihan yang ideal akan menjadi hasil negatif untuk hepatitis C dalam bahan genetik pesakit.

Analisis kualitatif dan kuantitatif

Terdapat analisis kualitatif dan kuantitatif. Intipati pertama ialah ia menentukan kehadiran jangkitan dalam darah. Dan itu bermakna virus menjangkiti sel-sel hati yang sihat. Apabila antibodi kepada hepatitis C ditemui dalam pesakit, ujian kualitatif dilakukan dengan segera. Kadar yang perlu diberikan adalah "tidak dikesan dalam darah". Apabila menentukan kepekatan virus, ada keperluan untuk mengetahui sensitiviti sistem diagnostik, kerana orang yang menjalani terapi antiviral dapat melakukan analisis. Tahap kepekaan penganalisis tidak boleh kurang daripada 50 IU / ml.

Apabila virus dikesan, analisis kuantitatif dilakukan, dengan kata lain, beban virus, yang menentukan kepekatan virus dalam darah dan keparahan penyakit.

RNA virus, yang dalam jumlah tertentu darah, ditakrifkan sebagai norma pada kadar 1 ml setiap 1 sentimeter padu. Selepas mengukur beban virus, adalah mungkin untuk menilai tahap jangkitan persekitaran yang masih tidak dijangkiti. Sebaik sahaja kepekatan hepatitis C meningkat di dalam darah, ia perlu diasingkan dari alam sekitar.

Adalah penting dalam peringkat pertama untuk mengesan tahap kepekatan hepatitis, untuk menentukan kadar pemulihan. Sekiranya kadar hepatitis C melebihi melebihi 800 ribu IU / ml, ia dianggap terlalu tinggi, dengan peningkatan sehingga satu juta kritikal. Jika julat kuantitatif kurang daripada 400 ribu IU / ml, dianggap bahawa jangkitan mereka di sekeliling akan berkurangan. Angka ini jelaskan bahawa hepatitis C hadir dalam tubuh dalam dos yang sangat kecil. Analisis tidak dapat menentukan nilai kuantitatif zarah RNA virus, jadi ia telah dilantik beberapa kali untuk ketepatan diagnosis.

Keputusan analisis kuantitatif

Tugas menentukan jumlah viral load dalam darah pesakit adalah mengenal pasti tahap jangkitan kepada orang lain.

Ujian hepatitis C

membolehkan anda menilai keberkesanan terapi antiviral, tahap infeksi dan bilangan tisu yang dijangkiti.

Adalah penting untuk mencegah perkembangan penyakit itu, mengambil langkah pencegahan pada waktunya, menetapkan rawatan yang betul berdasarkan diagnostik PCR. Jika menurut keputusan, tahap beban virus kurang daripada 400 ribu IU / ml, maka kepekatannya mungkin sedikit, yang menunjukkan pemulihan penuh mungkin. Norma untuk mendapatkan keputusan positif adalah ketiadaan jangkitan.

Keputusan analisis PCR:

Jawapan positif bermakna terdapat jangkitan dalam bahan biologi. Analisis ini membolehkan menentukan bilangan sel yang dijangkiti. Jawapan negatif menunjukkan ketiadaan jangkitan, yang dicari dengan teliti dalam tubuh.

Kaedah penentuan kuantitatif hepatitis C adalah tepat dan bermaklumat, dilakukan pada peralatan yang mempunyai kepekaan tinggi. Memutuskan hasil analisa membolehkan anda mengetahui sama ada jangkitan dan spesifiknya, untuk melihat jumlah terkecil sel yang dijangkiti pada penganalisis yang sangat sensitif.

Keputusan palsu atau bertentangan jarang diberikan oleh analisis, lebih kerap ini berlaku dalam kajian immunoassay.

Baru-baru ini, pencarian "analisis kuantitatif hepatitis dengan penyahkodan" semakin muncul dalam enjin carian sumber Internet.

Sesungguhnya, virus hepatitis merebak dan berbahaya, penyakit ini memberi kesan kepada hati. Namanya berasal dari lat. hepatitis adalah keradangan hati. Jangkitan berlaku melalui darah atau secara seksual, lebih kerap, orang dewasa berumur antara 25 dan 50 tahun.

Terdapat beberapa jenis penyakit ini. Hepatitis C tidak mempunyai keterukan yang terang, tetapi dalam 40-70% kes menjadi kronik, boleh menyebabkan sirosis dan kanser. Penyakit ini memerlukan diagnosis dan tafsiran data yang tepat, yang tekniknya telah dibangunkan. Salah satunya adalah analisis RNA RNA HCV oleh PCR.

RNA analisis RNA HCV oleh PCR

RNA (asid ribonukleat) adalah sejenis makromolekul, salah satu komponen sel hidup. RNA bertanggungjawab untuk mengesan maklumat genetik. Virus hepatitis C mengandungi molekul RNA dan cenderung bermutasi. 6 dari subtipenya diketahui, serta banyak subtipe.

Penyakit dalam peringkat kroniknya membawa kepada fibrosis hati - tisu penghubung berkembang, struktur organ secara beransur-ansur terganggu. Fibrosis dapat menerima rawatan tepat pada masanya, kerana hati belum menjalani proses yang merosakkan. Tidak seperti sirosis, penyakit hati yang tidak dapat dipulihkan kembali ke mana fibrosis boleh berkembang tanpa mengambil langkah-langkah yang diperlukan dalam masa.

Seseorang yang disyaki mempunyai virus hepatitis B ditentukan oleh antibodi kepadanya. Sekiranya mereka tidak, penyakit ini tidak termasuk, jika mereka ada, mereka menggunakan kaedah PCR (tindak balas rantai polimer). Dalam biologi molekul, ia adalah eksperimen, tetapi menduduki tempat utama di antara kaedah mendiagnosis penyakit berjangkit. Dengan itu, anda boleh meningkatkan kepekatan serpihan molekul dalam sampel dengan ketara. 10 hari selepas jangkitan, RNA sudah mungkin untuk menentukan dalam darah.

Kaedah ini adalah satu-satunya yang dapat mengesan penyakit ini pada peringkat awal. Dalam cara lain (contohnya, melalui ujian darah biokimia) ini tidak dapat dilakukan, kerana hati tidak terjejas.

Ujian hepatitis C dengan penyahkod (PCR) adalah petunjuk yang boleh dipercayai mengenai kehadiran virus dalam darah manusia.

Kaedah ini ditemui pada tahun 1993 oleh ahli biokimia Kerry Mullis, yang mana beliau memenangi Hadiah Nobel. PCR adalah satu kejayaan dalam bidang perubatan dan sains, kerana ia membenarkan untuk mengenal pasti jangkitan dalam darah dan bahan biologi manusia yang lain dengan cepat dan tepat. Dengan kata lain, kaedah ini telah mempercepatkan perkembangan diagnosis penyakit berjangkit.

Analisis RNA RNA HCV oleh PCR adalah berkesan kerana sebab-sebab berikut:

mempunyai kepekaan yang baik - walaupun sejumlah kecil virus dalam darah dikesan; virus itu sendiri ditentukan, bukan produk sampingan yang dibuat olehnya; Jenis patogen ditentukan.

Perbezaan dalam analisis kuantitatif RNA HCV dari kualitatif

Kaedah PCR merangkumi dua cara utama untuk mengkaji bahan biologi untuk mencari virus hepatitis C:

Kajian ini mempunyai tugas yang berbeza.

Analisis kualitatif hepatitis dengan penyahkodan mengesahkan kehadiran virus selepas antibodi terhadap penyakit itu telah dijumpai dalam darah. Sekiranya kajian memberikan hasil yang positif, maka penyakit ini dikesan. Dalam erti kata lain, seseorang dijangkiti. Sekiranya hasil negatif diperoleh, ini bermakna bahawa orang itu tidak dijangkiti, atau kepekatan virus terlalu kecil. Kepekatan ini tidak dikesan dengan cara ini.

Di samping itu, gambaran klinikal penyakit itu berdasarkan penanda hepatitis C dan tafsiran analisis. Penanda utama adalah imunoglobulin (antibodi) M dan G. Kehadiran mereka di dalam darah pesakit menunjukkan proses bukan ciri untuk organisma yang sihat. Berdasarkan kehadiran antibodi ini, pesakit, sebagai peraturan, menetapkan diagnosis primer.

Analisis kuantitatif ditetapkan untuk pengesanan utama antibodi dan, jika perlu, rawatan.

Juga, analisis kuantitatif hepatitis C ditetapkan untuk pengesanan hepatitis bercampur (jangkitan dengan beberapa virus sekaligus).

Analisis kuantitatif dengan pengekodan dilakukan untuk:

penjelasan diagnosis akhir; membina ramalan mengenai perjalanan penyakit dan rawatannya - lanjutan, pengurangan rawatan atau perubahan taktik; terapi pengawasan.

Penunjuk antarabangsa IU / ml bermaksud bahawa jumlah RNA dalam 1 ml darah diperiksa. Penunjuk kuantitatif tinggi menunjukkan kebarangkalian meningkat menjangkiti orang lain.

Agar hasilnya benar, anda mesti mengikut rejim yang ditetapkan sebelum menderma darah:

datang ke makmal pada perut kosong, kali terakhir anda boleh makan 8 jam sebelum prosedur; dua hari sebelum alkohol kajian, makanan berlemak dan goreng dilarang; ultrasound, urut, fisioterapi sebelum kajian tidak dapat dijalankan; ubat dilarang untuk hari ini, jika tidak mungkin untuk membatalkan pengambilan ubat tertentu, ini dilaporkan sebelum sampel darah; sebelum prosedur, disyorkan untuk mengurangkan beban fizikal dan saraf sebanyak mungkin.

Pemenuhan keperluan ini akan menjadi kunci untuk mendapatkan hasil analisis kuantitatif yang tepat mengenai hepatitis C.

Tafsiran analisis kuantitatif

Selepas mendapat penunjuk analisis kuantitatif, ia perlu menguraikan keputusan ujian untuk hepatitis C. Hasilnya dikira dalam unit IU / ml dan dalam salinan per ml. Untuk mendapatkan keputusan, ditukar menjadi salinan, menggunakan beberapa teknik.

Monitor HCV (faktor penukaran kepada ME - 2.7); LCX HCV RNA (faktor penukaran kepada ME - 3.8).

Jadual Tafsiran analisis kuantitatif RNA HCV oleh PCR.

Penanda Hepatitis C dan tafsiran hasil kuantiti HCV RNA

Baru-baru ini, pencarian "analisis kuantitatif hepatitis dengan penyahkodan" semakin muncul dalam enjin carian sumber Internet.

Sesungguhnya, virus hepatitis merebak dan berbahaya, penyakit ini memberi kesan kepada hati. Namanya berasal dari lat. hepatitis adalah keradangan hati. Jangkitan berlaku melalui darah atau secara seksual, lebih kerap, orang dewasa berumur antara 25 dan 50 tahun.

Terdapat beberapa jenis penyakit ini. Hepatitis C tidak mempunyai keterukan yang terang, tetapi dalam 40-70% kes menjadi kronik, boleh menyebabkan sirosis dan kanser. Penyakit ini memerlukan diagnosis dan tafsiran data yang tepat, yang tekniknya telah dibangunkan. Salah satunya adalah analisis RNA RNA HCV oleh PCR.

RNA analisis RNA HCV oleh PCR

RNA (asid ribonukleat) adalah sejenis makromolekul, salah satu komponen sel hidup. RNA bertanggungjawab untuk mengesan maklumat genetik. Virus hepatitis C mengandungi molekul RNA dan cenderung bermutasi. 6 dari subtipenya diketahui, serta banyak subtipe.

Penyakit dalam peringkat kroniknya membawa kepada fibrosis hati - tisu penghubung berkembang, struktur organ secara beransur-ansur terganggu. Fibrosis dapat menerima rawatan tepat pada masanya, kerana hati belum menjalani proses yang merosakkan. Tidak seperti sirosis, penyakit hati yang tidak dapat dipulihkan kembali ke mana fibrosis boleh berkembang tanpa mengambil langkah-langkah yang diperlukan dalam masa.

Seseorang yang disyaki mempunyai virus hepatitis B ditentukan oleh antibodi kepadanya. Sekiranya mereka tidak, penyakit ini tidak termasuk, jika mereka ada, mereka menggunakan kaedah PCR (tindak balas rantai polimer). Dalam biologi molekul, ia adalah eksperimen, tetapi menduduki tempat utama di antara kaedah mendiagnosis penyakit berjangkit. Dengan itu, anda boleh meningkatkan kepekatan serpihan molekul dalam sampel dengan ketara. 10 hari selepas jangkitan, RNA sudah mungkin untuk menentukan dalam darah.

Kaedah ini adalah satu-satunya yang dapat mengesan penyakit ini pada peringkat awal. Dalam cara lain (contohnya, melalui ujian darah biokimia) ini tidak dapat dilakukan, kerana hati tidak terjejas.

Kaedah ini ditemui pada tahun 1993 oleh ahli biokimia Kerry Mullis, yang mana beliau memenangi Hadiah Nobel. PCR adalah satu kejayaan dalam bidang perubatan dan sains, kerana ia membenarkan untuk mengenal pasti jangkitan dalam darah dan bahan biologi manusia yang lain dengan cepat dan tepat. Dengan kata lain, kaedah ini telah mempercepatkan perkembangan diagnosis penyakit berjangkit.

Analisis RNA RNA HCV oleh PCR adalah berkesan kerana sebab-sebab berikut:

  • mempunyai kepekaan yang baik - walaupun sejumlah kecil virus dalam darah dikesan;
  • virus itu sendiri ditentukan, bukan produk sampingan yang dibuat olehnya;
  • Jenis patogen ditentukan.

Perbezaan dalam analisis kuantitatif RNA HCV dari kualitatif

Kaedah PCR merangkumi dua cara utama untuk mengkaji bahan biologi untuk mencari virus hepatitis C:

Kajian ini mempunyai tugas yang berbeza.

Analisis kualitatif hepatitis dengan penyahkodan mengesahkan kehadiran virus selepas antibodi terhadap penyakit itu telah dijumpai dalam darah. Sekiranya kajian memberikan hasil yang positif, maka penyakit ini dikesan. Dalam erti kata lain, seseorang dijangkiti. Sekiranya hasil negatif diperoleh, ini bermakna bahawa orang itu tidak dijangkiti, atau kepekatan virus terlalu kecil. Kepekatan ini tidak dikesan dengan cara ini.

Di samping itu, gambaran klinikal penyakit itu berdasarkan penanda hepatitis C dan tafsiran analisis. Penanda utama adalah imunoglobulin (antibodi) M dan G. Kehadiran mereka di dalam darah pesakit menunjukkan proses bukan ciri untuk organisma yang sihat. Berdasarkan kehadiran antibodi ini, pesakit, sebagai peraturan, menetapkan diagnosis primer.

Analisis kuantitatif ditetapkan untuk pengesanan utama antibodi dan, jika perlu, rawatan.

Juga, analisis kuantitatif hepatitis C ditetapkan untuk pengesanan hepatitis bercampur (jangkitan dengan beberapa virus sekaligus).

Analisis kuantitatif dengan pengekodan dilakukan untuk:

  • penjelasan diagnosis akhir;
  • membina ramalan mengenai perjalanan penyakit dan rawatannya - lanjutan, pengurangan rawatan atau perubahan taktik;
  • terapi pengawasan.

Agar hasilnya benar, anda mesti mengikut rejim yang ditetapkan sebelum menderma darah:

  • datang ke makmal pada perut kosong, kali terakhir anda boleh makan 8 jam sebelum prosedur;
  • dua hari sebelum alkohol kajian, makanan berlemak dan goreng dilarang;
  • ultrasound, urut, fisioterapi sebelum kajian tidak dapat dijalankan;
  • ubat dilarang untuk hari ini, jika tidak mungkin untuk membatalkan pengambilan ubat tertentu, ini dilaporkan sebelum sampel darah;
  • sebelum prosedur, disyorkan untuk mengurangkan beban fizikal dan saraf sebanyak mungkin.

Pemenuhan keperluan ini akan menjadi kunci untuk mendapatkan hasil analisis kuantitatif yang tepat mengenai hepatitis C.

Tafsiran analisis kuantitatif

Selepas mendapat penunjuk analisis kuantitatif, ia perlu menguraikan keputusan ujian untuk hepatitis C. Hasilnya dikira dalam unit IU / ml dan dalam salinan per ml. Untuk mendapatkan keputusan, ditukar menjadi salinan, menggunakan beberapa teknik.

  • Monitor HCV (faktor penukaran kepada ME - 2.7);
  • LCX HCV RNA (faktor penukaran kepada ME - 3.8).

Jadual Tafsiran analisis kuantitatif RNA HCV oleh PCR.

Medinfo.club

Portal mengenai hati

Analisis Kuantitatif dan Pengekodan HCV

Hepatitis C adalah penyakit yang boleh melipatgandakan sel-sel hati yang sihat dan menimbulkan kemunculan penyakit proliferatif. Di dunia moden, apabila virus hepatitis telah melewati mutasi tertentu, sistem imun manusia berada dalam bahaya, berbanding dengan jangkitan, ia boleh diabaikan. Ia juga diperhatikan bahawa tidak semua pesakit akan mengalami tanda-tanda awal penyakit ini, terutamanya pada peringkat awal.

Analisis RNA virus hepatitis C adalah kajian kuantitatif, norma yang terletak pada jumlah yang sederhana dari kehadiran sel-sel virus dalam darah pesakit. Menurut statistik, kira-kira 31% pesakit benar-benar sembuh penyakit ini, jika ia berada di peringkat awal.

Dalam amalan perubatan, doktor mendapati bahawa 4 juta gejala yang dijangkiti dan tanda pertama tidak muncul sama sekali, walaupun bentuk hepatitis yang diabaikan boleh menyebabkan sirosis hati atau kanser.

Pada masa ini, semasa prosedur "pemindahan darah", darah ini diperiksa untuk kehadiran virus hepatitis C, kerana penyakit ini ditularkan melalui darah penderma.

Sehingga kini, ubat hepatitis C telah muncul di dunia dengan kecekapan hampir 100%. Industri farmaseutikal moden telah mencipta ubat-ubatan yang tidak mempunyai sebarang kesan sampingan. Ramai pesakit mendapat keputusan pertama dalam bentuk mengurangkan gejala dan mengurangkan beban virus selepas seminggu pengambilan. Baca lebih lanjut mengenai ubat untuk hepatitis daripada pengeluaran India, baca artikel berasingan kami.

Sofosbuvir Express telah membuktikan dirinya dalam pasaran pengangkutan dadah Hepatitis C India. Syarikat ini berjaya membantu orang untuk pulih dari penyakit ini selama lebih dari 2 tahun. Ulasan dan video pesakit yang berpuas hati yang dapat anda lihat di sini. Pada akaun mereka lebih daripada 4,000 orang yang sembuh terima kasih kepada ubat yang dibeli. Jangan letakkan kesihatan anda, pergi ke www.sofosbuvir-express.com atau hubungi 8-800-200-59-21

Jenis kajian PCR

PCR (tindak balas rantai polimer) adalah kaedah yang paling moden dan berkesan untuk mengkaji gen virus dan keupayaannya. Diagnostik sedemikian dapat menubuhkan sejenis penyakit dan menentukan mutasi seterusnya dalam tubuh pesakit.

Analisis dilakukan dengan mengambil darah, yang kemudiannya diletakkan di dalam reagen khas di mana kloning sel berlaku.

Dari satu sel ternyata dua, dan sebagainya. Akibatnya, terdapat beratus-ratus DNA, di mana anda boleh mendiagnosis patogen dan mengenal pasti virus pada peringkat awal.

Oleh itu, PCR dibahagikan kepada beberapa jenis:

  • analisis kualitatif - mengiktiraf jangkitan gen dalam darah. Jika semasa analisis kualitatif pesakit penyakit itu disahkan, maka analisis kuantitatif perlu dilakukan untuk menentukan sejauh mana jangkitan. Hasil daripada diagnosis ini, pakar menulis "dikesan / tidak dikesan". "Dikesan" - mengatakan bahawa penyakit itu terdapat di dalam badan dan RNAnya telah dikenalpasti. "Tidak dikesan" - menunjukkan ketiadaan gen virus dalam sampel, iaitu, tidak ada RNA hepatitis. Tetapi doktor mengesyorkan ujian semula selepas 10 hari.
  • analisis kuantitatif - menentukan jumlah bahan genetik jangkitan dalam darah. Diagnosis sedemikian membantu untuk menentukan keterukan penyakit dan keseluruhan sejarah klinikal. Hasil daripada analisis sedemikian, hanya "Positif / Negatif / Tidak Sah" boleh ditulis. "Positif" - mewakili beban berjangkit. Doktor menetapkan kaedah ini untuk mendiagnosis penyakit ini untuk menentukan keberkesanan rawatan pada penyakit 4, 12, 16, dan 24 minggu. Sekiranya penunjuk virus berada dalam julat 8x10 IU / ml, rawatan adalah berkesan, jika kadar lebih tinggi, maka tidak. "Negatif" - gen jangkitan tidak dikesan. "Tidak sah" - ini berlaku jika gen virus dikesan secara kualitatif, tetapi ia tidak didedahkan dalam analisis kuantitatif. Ada yang sama, dengan syarat jumlah jangkitan berada di bawah paras.

Perbezaan dalam analisis kualitatif dan kuantitatif

Virus hepatitis C didiagnosis terutamanya dengan melakukan analisis kuantitatif, yang diperlukan untuk penafsiran yang betul penyakit ini. Tetapi walaupun ini, kaedah diagnostik kualitatif dan kuantitatif mempunyai perbezaannya, sebagai contoh: peranan dan tugas-tugas yang diberikan kepada penyelidikan - kualitatif - mengesahkan kehadiran jangkitan selepas antibodi virus yang dikesan dan kuantitatif - kaedah sekunder yang menyangkal atau mengesahkan penyakit untuk membuat diagnosis yang betul dan hanya.

Tafsiran penyelidikan kuantitatif

Selepas diagnosis, hanya doktor boleh mentafsirkan hasilnya, kerana ia tidak sepatutnya ditunjukkan dalam angka, tetapi dalam kata-kata. Menurut statistik, PCR kuantitatif adalah ujian paling sensitif. Untuk memahami sama ada virus hadir di dalam badan, adalah perlu untuk memahami dan mengetahui bahawa analisis kuantitatif hepatitis C ditafsirkan menggunakan penentuan digital (standard) jangkitan:

HCV, RNA mengkuantifikasi [PCR masa nyata]

Satu kajian untuk mengenal pasti agen penyebab hepatitis C (HCV), di mana kehadiran bahan genetik (RNA) virus dan kuantiti (viral load) dalam sampel darah ditentukan menggunakan kaedah tindak balas rantai polimer masa sebenar (RT-PCR).

RNA HCV boleh dikesan pada kepekatan yang berada di luar batas bawah kepekatan linear. Jangkauan kepekatan linear adalah julat di mana anda boleh mengira dengan tepat bilangan salinan patogen. Untuk analisis ini, julat linear kepekatan DNA HCV ditentukan oleh pengesan pengesan ialah 7.5 × 10 2 - 1.0 × 10 8 salinan / ml sampel.

Sinonim Rusia

Virus Hepatitis C (HCV), penentuan kuantitatif RNA.

Sinonim bahasa Inggeris

Hepatitis C Virus RNA, Kuantitatif, Masa Nyata PCR, Darah, Beban Viral HCV, RNA Virus Hepatitis C.

Kaedah penyelidikan

Tindak balas rantaian transkrip polimerase sebaliknya.

Apa bahan biologi yang boleh digunakan untuk penyelidikan?

Bagaimana untuk mempersiapkan kajian?

Jangan merokok selama 30 minit sebelum menderma darah.

Maklumat am mengenai kajian ini

Hepatitis C virus (HCV) adalah virus RNA dari keluarga Flaviviridae yang menjangkiti hati. Ia dapat melipatgandakan sel darah (neutrofil, monosit dan makrofag, limfosit B) dan menyebabkan cryoglobulinemia, penyakit Sjogren dan penyakit limfoproliferatif sel B. HCV, disebabkan oleh aktiviti mutasi yang tinggi, dapat mengelakkan pendedahan kepada mekanisme perlindungan sistem kekebalan tubuh. Terdapat 6 genotip dan banyak subtipe virus, yang mempunyai makna yang berbeza untuk meramalkan perkembangan penyakit dan keberkesanan terapi antiviral.

Cara utama penularan adalah melalui darah (ubat untuk darah dan transfusi plasma, organ donor, jarum suntikan tidak steril, jarum, alat untuk tatu, menindik). Jangkitan melalui hubungan seksual dan bayi dari ibu semasa bersalin mungkin, tetapi ini jarang terjadi.

Hepatitis virus akut biasanya dicirikan oleh kursus asymptomatic dan masih tidak dapat dikesan dalam kebanyakan kes. Hanya dalam 15% orang yang dijangkiti penyakit ini akut, dengan rasa mual, sakit badan, kurang selera makan dan kehilangan berat badan (jarang disertai dengan penyakit kuning). 60-85% orang yang dijangkiti mengalami jangkitan kronik, iaitu 15 kali lebih tinggi daripada kekerapan jangkitan kronik dalam hepatitis B. Hepatitis C virus kronik berlaku dengan peningkatan enzim hepatik dan tanda-tanda gejala buruk. Dalam 20-30% pesakit, penyakit ini membawa kepada sirosis hati, meningkatkan risiko kegagalan hati dan karsinoma hepatoselular.

Pengesanan RNA HCV menunjukkan pendaraban virus dalam badan dan merupakan kaedah untuk mendiagnosis penyakit. Bahan genetik virus dapat dikesan oleh PCR 10-12 hari selepas jangkitan - dalam tempoh ini, antibodi spesifik, yang terbentuk beberapa bulan selepas jangkitan, tidak hadir dan petunjuk biokimia fungsi hati berada dalam nilai rujukan.

Melalui PCR, RNA virus dikesan sama ada secara kualitatif atau kuantitatif. Oleh kerana kaedah kualitatif, kehadiran virus hepatitis C dan pembiakan aktifnya disahkan. Penentuan kuantitatif beban virus berkenaan dengan genotip HCV membolehkan anda memantau terapi berterusan dan meramalkan perjalanan penyakit.

Keberkesanan rawatan dinilai oleh jumlah RNA sebelum dan semasa terapi. Biasanya, viral load darah berkurangan beberapa kali dalam tiga bulan pertama rawatan yang berjaya. Dengan terapi yang berkesan, viremia dikurangkan dengan dua pesanan magnitud dalam rawatan 4-12 minggu pertama dan selepas tamat kursus terapi, bahan genetik virus tidak dikesan dalam darah. Ketiadaan penurunan dalam viremia selepas 12 minggu dari permulaan rawatan menunjukkan ketidakmampuannya. Adalah disyorkan untuk melakukan analisis sebelum permulaan terapi, pada minggu ke-4, ke-12 dan ke-24 rawatan dan 24 minggu selepas tamat kursus. Tempoh terapi dan kekerapan kuantifikasi RNA virus Hepatitis C bergantung kepada genotip virus dan tahap kerosakan hati.

Apakah penyelidikan yang digunakan?

  • Untuk mengesahkan diagnosis "hepatitis C virus".
  • Untuk meramalkan perjalanan hepatitis C. virus
  • Untuk memantau terapi antiviral dan menentukan taktik rawatan lanjut.

Bilakah kajian itu dijadualkan?

  • Dengan pengesanan kualitatif RNA hepatitis C.
  • Dalam hepatitis C. virus akut dan kronik
  • Apabila hepatitis bercampur.
  • Apabila merancang, semasa dan selepas berakhirnya terapi antiviral.

Apakah hasilnya?

  • Tidak dikesan - tiada RNA virus hepatitis C yang dikesan atau nilai di bawah batas kepekaan kaedah (200 salinan / ml = 400 IU / ml).
  • salinan / ml (IU / ml) - RNA virus Hepatitis C dikesan. Viremia rendah (prognosis penyakit yang paling baik dan keberkesanan terapi).
  • > 2 * 10 ^ 6 salinan / ml (> 4 * 10 ^ 6 IU / ml) - RNA virus Hepatitis C dikesan. Viremia tinggi.
  • > 1.0 * 10 ^ 8 salinan / ml (> 2 * 10 ^ 8 IU / ml) - RNA virus Hepatitis C dikesan pada kepekatan di atas julat kepekatan linear.

Rangkaian linear kepekatan RNA virus hepatitis C, yang ditentukan oleh pengesan pengesan, adalah 7.5 * 10 ^ 2 - 1.0 * 10 ^ 8 salinan / ml (1.5 * 10 ^ 3 - 2 * 10 ^ 8 IU / ml).

Apa yang boleh mempengaruhi hasilnya?

Hasil yang tidak dapat dipercayai boleh didapati dengan:

  • pencemaran biomaterial;
  • kehadiran dalam sampel perencat - bahan kimia dan protein yang mempengaruhi pelbagai komponen PCR;
  • kehadiran heparin dalam darah.

Nota penting

  • Tahap beban darah virus tidak menunjukkan tahap kerosakan pada hati dan keparahan penyakit. Untuk penilaian mereka, perlu untuk menyiasat parameter biokimia dan bahan biopsi.
  • Apabila merancang rawatan, sangat penting untuk menentukan genotip virus hepatitis C.

Disyorkan juga

Siapa yang membuat kajian itu?

Sastera

  • Zh.I. Vozianova Penyakit berjangkit dan parasit: Dalam 3 tan - K.: Kesihatan, 2000. - Jilid 1: 600-690.
  • Kiskun A.A. Kajian imunologi dan serologi dalam amalan klinikal. - M.: OOO MIA, 2006. - 471-476 ms.
  • Prinsip Perubatan Dalaman Harrison. 16 th ed. NY: McGraw-Hill; 2005: 1822-1855.
  • Lerat H, Rumin S, Habersetzer F, dan lain-lain. Dalam sel vivo virus hepatitis C, terdapat pengaruh viral load, genotype virus, dan fenotip sel. Darah. 1998 Mei 15; 91 (10): 3841-9.PMID: 9573022.
  • Revie D, Salahuddin SZ. Jenis sel manusia untuk replikasi virus hepatitis C dalam vivo dan vivo: pernyataan lama dan bukti semasa. Virol J. 2011 11 Jul; 8: 346. doi: 10.1186 / 1743-422X-8-346. PMID: 21745397.

Hepatitis C virus (Virus Hepatitis C), penentuan kuantitatif RNA (kaedah ultra sensitif)

Sekurang-kurangnya 3 jam selepas makan terakhir. Anda boleh minum air tanpa gas.

Hepatitis C disebabkan oleh virus RNA. Jangkitan berlaku terutamanya apabila virus itu terus memasuki darah (manipulasi perubatan dan bukan perubatan). Salah satu faktor risiko utama untuk jangkitan adalah penggunaan ubat suntikan. Tempoh inkubasi purata ialah 6-8 minggu. Tempoh akut dalam kebanyakan kes adalah asimtomatik. Hasil yang paling teruk dari hepatitis C kronik adalah sirosis hati dan karsinoma hepatoselular.

RNA virus dikesan dalam plasma darah secara purata pada hari ke-10 selepas jangkitan dan merupakan penanda diagnostik pertama hepatitis C. akut

Perkhidmatan baru 030211 adalah kajian unik dengan kepekaan analitik tinggi (10 IU / ml) untuk menentukan RNA virus hepatitis C dalam format kuantitatif. Kajian ini digunakan untuk memantau keberkesanan terapi. Kepekaan tinggi kaedah dicapai melalui penyelidikan yang paling automatik.

  • Menurut Undang-undang Persekutuan 21.11.2011 No. 323-ФЗ "Mengenai Asas Perlindungan Kesihatan Rakyat di Persekutuan Rusia", penyelidikan PCR adalah salah satu kaedah pemeriksaan komprehensif seorang pesakit, yang berdasarkan pada mana doktor yang hadir membuat diagnosis dan menentukan taktik rawatan pesakit.
  • HCV RNA, ujian ultrasensitif kuantitatif, dilakukan pada 1 ml plasma darah menggunakan kit reagen AmpliSens® HCV-Monitor-FL dan AmpliSens® HCV / HBV / HIV-FL. Kepekaan analitik: 10 IU / ml, julat pengukuran linear: 30-1 * 10 ^ 8. Kepekatan virus akibat tindak balas ditunjukkan pada nilai 30 IU / ml dan ke atas.

Kami ingin menarik perhatian anda kepada hakikat bahawa tafsiran hasil penyelidikan, penubuhan diagnosis, dan preskripsi rawatan, mengikut Undang-undang Persekutuan No. 323 Undang-undang Persekutuan "Mengenai Asas Perlindungan Orang-orang Warga Negara di Persekutuan Rusia", mesti dibuat oleh doktor pakar khusus.

Petunjuk untuk tujuan kajian:

  • memantau keberkesanan terapi antiviral.

Diagnosis Virus Hepatitis C

Virus Hepatitis C (HCV) adalah virus yang mengandungi RNA dari keluarga Flaviviridae. Jangkitan ini mampu mengalikan sel darah (monosit, neutrofil, limfosit B dan makrofaj), dan juga menjejaskan sel-sel hati itu sendiri - hepatosit. Oleh kerana tahap aktiviti mutasi yang tinggi, jenis hepatitis ini dapat mengelakkan pendedahan kepada sistem imun manusia.

Terdapat 11 genotip dan jisim subtipe virus sedemikian, yang berbeza dengan tahap kerosakan hati dan mempengaruhi tempoh rawatan hepatitis. Pelbagai hepatitis C memerlukan pelbagai kaedah terapi antiviral. Sebagai contoh, hepatitis 1 dan 4 genotip perlu dirawat selama 48 minggu, dan untuk kursus terapi terhadap virus jenis ke-2 dan ke-3, ia mungkin mengambil masa hanya 24 minggu.

Selepas ujian cepat untuk hepatitis C memberikan hasil yang positif, analisis PCR dilakukan untuk mengesan RNA virus dalam sampel darah.

Diagnostik PCR

Reaksi rantai polimerase (PCR) adalah teknik eksperimen untuk mengesan virus. Analisis seperti hepatitis C boleh meningkatkan ketumpatan beberapa serpihan DNA atau RNA virus dalam sampel yang dipindahkan. Ini membolehkan mereka mengenali dan mengira nombor tersebut.

Ujian hepatitis C ini dilakukan mengikut prosedur berikut:

  1. Contoh darah (bahan genetik) yang mungkin mengandungi gen hepatitis yang diingini dimasukkan ke dalam tiub ujian. Bahan khas, primer, diletakkan di atasnya, mereka adalah segmen panjang pendek dari gen yang dikehendaki, yang disintesis secara kimia. Polimerase DNA atau RNA juga ditambah kepada kapal ini, ia mampu membina rantai asid nukleik yang sama sekali sama dengan yang asal. Pemilihan nukleotida bebas, yang merupakan bahan binaan khusus untuk DNA dan RNA, ditambah kepada komposisi yang diperoleh, dan salah satunya mengandungi zarah kecil fosforus radioaktif.
  2. Campuran yang dihasilkan pada mulanya dipanaskan hingga 95 darjah, akibatnya kedua-dua helai DNA yang saling berkait dalam keadaan normal tidak dimansuhkan.
  3. Untuk meneruskan analisis, ubat disejukkan, di mana titik utama melekat pada seksyen yang dikehendaki dari genom virus hepatitis, menghalang DNA daripada menjadi heliks ganda. Apabila campuran sejuk, polimerase mencari rantaian tunggal nukleotida. Semasa lampiran enzim ini, ia meluncur di sepanjang rantaian DNA (sebagai blok sepanjang tali), dan pada helix dua kali ganda ia tidak dapat "bekerja", untuk tujuan ini campuran dipanaskan.
  4. Untuk memanjangkan analisis, pemanasan semula dilakukan, yang sekali lagi membawa kepada pemisahan rantai nukleotida. Apabila kitaran PCR sedemikian dilakukan dalam sampel, jumlah gen hepatitis yang dikehendaki meningkat dalam bahagian geometri, dan bahan-bahan genetik lain yang dihasilkan dihasilkan hanya dalam corak linear.
  5. Untuk menyelesaikan kajian, penyelesaian itu dibersihkan daripada zarah nukleotida sisa. Mereka dipisahkan oleh elektroforesis, dengan pemisahan oleh parameter berat molekul rangkaian DNA. Ujian seperti ini untuk hepatitis C menggunakan PCR membolehkan anda menentukan sama ada gen virus yang dikehendaki hadir dalam sampel atau tidak.

Kelebihan ujian ini adalah ambang sangat tindak balas PCR. Teknik seperti diagnosis, idealnya diperlukan hanya satu genom virus untuk keseluruhan sampel.

Di samping itu, PCR ini adalah benar-benar khusus. Dalam setiap gen ada urutan unik nukleotida, yang, seperti sidik jari, tidak boleh diulang di mana-mana sahaja. Untuk analisis ini pada hepatitis C, primer disintesis supaya mereka benar-benar sesuai dengan kawasan unik gen yang dicari, yang tidak mempunyai urutan lain.

Teknik ini juga membolehkan anda menganalisis untuk hepatitis C dan menentukannya, membantu menentukan diagnosis akhir.

Analisis makmal sedemikian memberikan maklumat lebih daripada hanya kehadiran atau ketiadaan RNA virus hepatitis C atau jenis lain dalam sampel darah. Menentukan parameter radiasi radioaktif, adalah mungkin untuk mengenalpasti berapa banyak bahan genetik yang diingini pada asalnya dalam sampel yang di bawah kajian. Ini membolehkan anda menentukan parameter apa yang dipanggil viral load - kepekatan zarah RNA hepatitis dalam jumlah tertentu.

Analisis kualitatif PCR

Analisis ini membolehkan untuk menentukan kehadiran virus hepatitis B dalam sampel darah. Ia harus dilakukan untuk semua orang yang telah menemui antibodi untuk hepatitis.

Sebagai hasil penyelidikan sedemikian, hanya terdapat dua nilai:

  • "Dikesan." Hasil pemeriksaan positif sedemikian ditafsirkan sebagai berikut: dalam sampel dianalisis dari serpihan bahan biologi RNA virus hepatitis telah dijumpai. Ini adalah dari ini bahawa terdapat fakta bahawa pesakit telah dijangkiti virus ini. Ini mungkin menunjukkan bahawa hepatitis patogen melipatgandakan dalam badan dan menjangkiti sel baru, memusnahkan hati.
  • "Tidak dikesan." Keputusan ini mengatakan bahawa dalam sampel yang dianalisis di makmal ini, tiada serpihan RNA yang khusus untuk virus hepatitis C yang dikesan.. Dalam kes sedemikian, dikatakan bahawa tahap kepekatan berada di bawah ambang kepekaan ujian.

Ujian semacam itu juga mungkin palsu-positif atau palsu-negatif, kerana pencemaran biomaterial atau kehadiran dalam sampel bahan tertentu yang bertindak balas dengan komponen kimia yang diperlukan untuk analisis.

Perlu ditekankan bahawa dalam fasa akut hepatitis C, kajian kualitatif yang menggunakan kaedah PCR dapat mengesan RNAnya selepas 1-2 minggu dari masa infeksi organisma. Ini bermakna bahawa penyakit ini dapat dikesan jauh sebelum penampilan gejala luarannya atau rupa antibodi kepada hepatitis dalam tubuh.

Pensampelan darah (dari urat) disukai dilakukan pada perut kosong.

Analisis Kuantitatif PCR

Menggunakan analisis ini, tentukan tahap kepekatan virus hepatitis dalam pesakit (viral load). Ujian semacam itu mesti dihantar untuk menganggarkan jumlah virus RNA per unit isipadu tertentu.

Ujian penguraian untuk hepatitis C, dilakukan mengikut kaedah ini, boleh mempunyai hasil berikut:

  • Penunjuk kuantitatif (dalam angka)

Kepekatan virus (jumlah) diberikan dalam segi angka. Untuk ini, unit pengukuran yang berlainan digunakan: sama ada IU / ml (unit antarabangsa per mililiter) atau salinan / ml (bilangan salinan virus RNA per mililiter). Secara purata, 1 IU / ml sepadan dengan 4 salinan / ml, kerana sistem ujian yang berbeza mempunyai faktor penukaran yang berbeza untuk unit tersebut.

Nilai rendah viral load dianggap kurang daripada 400,000 IU / ml, dan 8,000,000 IU / ml adalah tinggi.

Penilaian kuantitatif sedemikian membolehkan untuk menentukan tahap penyakit menular ("infeksi") pesakit. Semakin penunjuk analisis ini, semakin tinggi kebarangkalian risiko penularan patogen kepada orang lain (melalui hubungan seksual atau menegak).

Keputusan ini bermaksud bahawa kaedah kuantitatif tidak dapat mengesan Hepatitis RNA, tetapi virus itu sendiri ada di dalam tubuh, hanya dalam kepekatan yang sangat rendah. Ini telah disahkan oleh analisis kualitatif tambahan PCR, dan oleh hasil positifnya ia memberi kesaksian kepada fakta kehadiran hepatitis.

  • Keputusan tidak dikesan

    Tafsiran positif analisis ini menunjukkan bahawa ujian kuantitatif itu sendiri dalam sampel darah tidak dapat mengesan zarah RNA tertentu virus hepatitis C.

  • Analisis kuantitatif PCR yang dijalankan pada tempoh yang berlainan terapi antiviral (1, 4, 12 dan 24 minggu) membolehkan kita untuk menilai keberkesanan rawatan dan membuat pindaan yang perlu.

    Spesifikasi analisis

    Ujian ini mesti diluluskan untuk menentukan genotip yang berbeza daripada hepatitis C. Pada masa ini, terdapat 11 genotip patogen ini dan banyak subtipe. Di negara kita, genotip hepatitis C spesies 1, 2 dan 3 adalah perkara biasa. Dalam makmal, mereka dapat mengenal pasti pelbagai subtipe spesies ini: genus jenis 1a, 1b, 2a, 2b, atau 3, 4, 5, 6 dengan pelbagai modifikasi subtipe. Untuk kesemua hepatitis ini, kekhususan penentuan adalah 100%.

    Menentukan pengubahsuaian genotip menjadikan kemungkinan untuk memilih rawatan yang sesuai. Kehadiran jenis genotip tertentu dalam pesakit tidak menunjukkan bahawa penyakit itu lebih mudah atau lebih rumit, mereka hanya jenis virus hepatitis, dan tidak lebih.

    Dalam kes-kes tersebut apabila genotip virus tidak dapat diasingkan di makmal, hasilnya boleh diberikan: "Tidak ditetik. Telah menyiasat genotip: seperti-dan-seperti "(sebagai contoh, 1a, 2c, 3av). Penyahkodan ini menunjukkan bahawa dalam makmal ini tidak terdapat reagen yang sesuai yang dapat menentukan genotip virus hepatitis. Kajian ini telah diuji untuk virus, data dalam senarai, tetapi kesesuaian mereka dengan sampel RNA tidak dikenalpasti.

    Untuk membuat diagnosis akhir, hanya satu jenis analisis tidak mencukupi. Setiap ujian boleh memberikan hasil positif palsu. Untuk mengenal pasti jenis hepatitis dan sejauh mana kerosakan pada jangkitan badan ini, lakukan kajian komprehensif. Ini dilakukan biopsi hati dan menguji enzimnya: ALT, ASAT, serta fosfatase alkali dan LDH. Ujian bilirubin dan analisa indeks prothrombin juga boleh dilakukan.

    Hanya satu set ujian dan ujian makmal seperti itu, dengan analisis umum keadaan pesakit, akan membantu menentukan kehadiran hepatitis dalam tubuh, bentuknya, serta keparahannya. Atas dasarnya, doktor dapat menentukan rawatan lanjut dan membuat kemungkinan prognosis untuk pesakit.


    Artikel Yang Berkaitan Hepatitis