Analisis PCR untuk Hepatitis C

Share Tweet Pin it

Diagnosis hepatitis termasuk pelbagai ujian untuk menentukan kehadiran virus dalam darah. Salah satu cara untuk mengesan penyakit adalah seperti kaedah penyelidikan sebagai PCR untuk hepatitis C. Apakah itu, mengapa analisis PCR untuk hepatitis sama pentingnya dilakukan dan diuraikan?

Apa itu

Reaksi rantai polimerase, atau PCR, digunakan untuk mendiagnosis ulser gastrik, kolitis, enteritis. Tetapi kelebihan utamanya terletak pada fakta bahawa ia membantu untuk mengesan dalam badan baik virus hepatitis C dan antibodi kepadanya, yang mempunyai keupayaan untuk tidak menyebabkan reaksi sistem imun kerana kemampuan mereka untuk bermutasi.

Kajian dan terasnya terletak pada penciptaan keadaan-keadaan tertentu di mana tindak balas rantai Hepatitis RNA berlaku. Jika, jika dibandingkan dengan urutan nukleotida virus hepatitis C, kebetulan dijumpai, ini menunjukkan bahawa terdapat zarah virus dalam darah, dan proses pemisahan berlaku di hati. Jika jumlah virus berada di bawah tahap tertentu, diagnosis negatif dibuat, dan jika lebih tinggi, yang positif.

Terdapat dua jenis ujian darah menggunakan kaedah PCR untuk hepatitis: analisis kuantitatif dan analisis kualitatif.

PCR kuantitatif, seperti yang dinyatakan di atas, menentukan kepekatan RNA virus hepatitis. Di samping itu, beliau dapat memberi maklumat tentang keamatan yang patologi berkembang, dan keberkesanan rawatan yang ditetapkan. Analisis kuantitatif hepatitis C sangat penting kerana ia membetulkan ketahanan terhadap tindakan ubat antivirus dan membolehkan anda menyesuaikan terapi.

Selepas pesakit menjalani rawatan, PCR membantu menentukan urutan pelantikan selanjutnya. Dalam beberapa kes, keperluan untuk tinjauan tambahan. Sebagai contoh, jika tahap ALP meningkat (tetapi tidak lebih daripada 2 kali dalam tempoh enam bulan), dan transkrip analisis menunjukkan beban virus di atas 105 IU / ml, pesakit ditetapkan sebagai biopsi. Jika analisis kuantitatif PCR menunjukkan keradangan yang kuat dan fibrosis, pesakit dirawat sebagai rawatan dengan ubat-ubatan antiviral.

Dalam keadaan di mana sejumlah besar zarah virus digabungkan dengan ALT yang tinggi, pesakit harus segera dirawat tanpa langkah diagnostik tambahan.

Ambil ujian ini dan ketahui jika anda mempunyai masalah hati.

Hanya pakar yang berpengalaman dan berpengalaman yang dapat menguraikan secara kualitatif dalam analisis kuantitatif darah untuk hepatitis, dan teknologi moden membantu melakukan ini dengan kepekatan rendah darah dalam darah.

Analisis kualitatif PCR bertujuan untuk menentukan dan mengesahkan kehadiran sebenar virus dalam tubuh. Ia dilakukan apabila antibodi untuk hepatitis dikesan dalam darah. Ia adalah analisis kualitatif mengenai hepatitis yang menjamin ketepatan hasilnya sebanyak 100% dan membolehkan anda membuat diagnosis pada peringkat awal penyakit, yang memungkinkan untuk memulakan perjuangan terhadap hepatitis sudah pada minggu pertama selepas jangkitan dan meningkatkan kemungkinan pemulihan lengkap (dalam kes penyakit B).

Faedah PCR

Dalam kajian oleh PCR dan menguraikan ujian darah untuk hepatitis, anda juga boleh menentukan genotip patogen tersebut. Secara keseluruhan, terdapat 6 genotip virus dan sebilangan besar subtipe, bagaimanapun, di rantau kita, 1, 2 dan 3 genotip telah menjadi biasa.

Kelebihan lain dari diagnosis jenis ini adalah:

  • ketepatan tinggi penunjuk yang diperoleh dan kebarangkalian kesalahan yang rendah di dalamnya;
  • tahap kepekaan yang tinggi terhadap zarah virus dalam darah;
  • kemungkinan mengenal pasti beberapa patogen sekaligus;
  • diagnosis mikroorganisma intraselular patogen dengan variabiliti antigenik yang tinggi;
  • bekerja dengan penyahkodan analisis untuk hepatitis membolehkan anda mengesan jangkitan semasa tersembunyi.

Siapa yang dilantik?

Kategori orang berikut harus lulus analisis PCR untuk hepatitis:

  • wanita hamil;
  • kakitangan penjagaan kesihatan;
  • penderma darah dan organ yang berpotensi;
  • mereka yang mempunyai ciri-ciri tanda penyakit;
  • Individu yang dijangkiti HIV;
  • penagih dadah;
  • rambang.

Bagaimanakah analisa dijalankan dan adakah perlu untuk mempersiapkannya

Sampel darah untuk PCR dilakukan dari urat. Sebagai peraturan, ini berlaku pada waktu pagi sebelum orang makan, kerana selepas makan, sekurang-kurangnya 8 jam harus lewat. Dalam kes-kes yang teruk, darah boleh diambil untuk pemeriksaan siang atau petang, tetapi jurang masa antara analisis dan pengambilan makanan hendaklah sekurang-kurangnya 5 jam.

Faktor manusia secara kuantitatif boleh menjejaskan keputusan: ketepatan mereka dalam sesetengah kes berkurangan dari 100% hingga 95%, oleh itu, perlu untuk menyediakan derma darah terlebih dahulu. Kualiti biomaterial untuk analisis akan sesuai apabila pesakit mengikuti peraturan berikut:

  • sebelum memberi darah, anda hanya boleh minum air bersih;
  • dua hari sebelum kajian, adalah perlu untuk menolak untuk menerima makanan goreng dan lemak, serta minuman beralkohol;
  • sehari sebelum lawatan ke makmal harus berhenti mengambil ubat. Jika ini tidak mungkin, adalah penting untuk memberitahu juruteknik makmal dan doktor yang hadir;
  • sehari sebelum anda perlu mengelakkan situasi yang tertekan dan penuaan fizikal;
  • ultrasound, pemeriksaan sinar-X dan ujian instrumental tidak boleh dilakukan sejurus sebelum derma darah;
  • dalam satu jam sebelum analisis, anda mesti menahan diri dari merokok;
  • 20 minit sebelum menderma darah, anda perlu terganggu, tenang dan bernafas.

Sekiranya seorang kanak-kanak berusia di bawah 5 tahun lulus kajian, ibu bapa mesti memastikan bahawa dia minum air rebus setiap 10 minit selama setengah jam sebelum mengambil biomaterial.

Dekri data yang diterima

Penyahkodan analisis boleh diwakili oleh kata-kata (dalam hal kajian kualitatif), contohnya, "tidak dikesan" atau "di bawah julat perubahan". Dalam kes pertama, ini menunjukkan bahawa jangkitan tidak dikesan. Pada yang kedua - bahawa virus hadir, tetapi dalam kuantiti yang kecil. Keadaan ini memerlukan penyelidikan semula.

Beban virus ditentukan oleh jumlah RNA berjangkit dan dirujuk sebagai IU / ml atau salinan / ml.

Penunjuk normal (norma) analisis kuantitatif untuk hepatitis C adalah julat dari 1.8x102 hingga 2.4x107 IU / ml.

Kepekatan virus dalam darah boleh:

  • rendah: dari 600 IU / ml hingga 3x10 4 / ml;
  • sederhana: dari 3x10 4 IU / ml hingga 8x10 5 IU / ml;
  • tinggi: lebih daripada 8x10 5 IU / ml.

Analisis kuantitatif dan kualitatif PCR untuk hepatitis membolehkan untuk menentukan kehadiran virus dalam badan dan tahap kepekatannya. Reaksi rantai multi-dimensi dapat mendiagnosis penyakit ini pada peringkat awal, tetapi untuk ini, pesakit akan segera menghubungi institusi perubatan untuk membantu dan dengan ketat mengikuti cadangan doktor yang menghadiri.

Apakah analisis PCR dan viral load?

Reaksi rantai polimerase (PCR) adalah kaedah makmal untuk menentukan DNA dan RNA. Ia pertama kali diuji hampir setengah abad yang lalu oleh American Carey Mullis. Analisis supersensitif ini dapat mengenal pasti pembawa genom oleh satu molekul sumber tunggal yang terkandung dalam darah, air liur atau kulit.

Kaedah PCR mempunyai prospek yang hebat, digunakan bukan sahaja dalam bidang perubatan, tetapi juga dalam kejuruteraan genetik dan sains forensik. Dengan itu, klonkan dan buat jenis baru DNA, tentukan tahap kekeluargaan. Seorang penjenayah dikenal pasti oleh sekeping epitel yang ditemui di tempat kejadian.

Analisis PCR untuk hepatitis - apa yang mereka lakukan dan mengapa?

Mengapa analisis PCR diperlukan untuk disyaki hepatitis C, apa itu?

Virus Hepatitis C adalah virus RNA yang mengandungi 6 genotip dan sehingga 500 subtipe. Dari semua hepatitis, virus ini mempunyai kapasiti mutasi tertinggi dan mengatasi penghalang perlindungan sistem kekebalan tubuh. Daripada jumlah kes hepatitis, virus C menyebabkan 70% daripada kes-kes bentuk kronik dan 30% daripada sirosis dan kanser hati.

Inti dari kaedah ini: sebahagian daripada gen yang sedang diteliti dengan bantuan enzim dan syarat-syarat khas terpaksa melipatgandakan in vitro. Analisis PCR membolehkan menentukan ketegangan virus, tanpa mana mustahil untuk melakukan rawatan yang berkesan: setiap genotip berbeza dengan ubat-ubatan antiviral. Dua jenis PCR digunakan:

Terapi antiviral memerlukan pemantauan berterusan untuk segera menyesuaikan rawatan, dan untuk tujuan ini tindak balas rantai polimer juga digunakan.

PCR kualitatif dan kuantitatif

PCR kualitatif mengenai hepatitis C memberikan jawapan: adakah terdapat virus C dalam darah pesakit dan yang mana satu. Genotyping diperlukan untuk menjelaskan diagnosis, prognosis penyakit dan menentukan masa rawatan.

Menurut klasifikasi yang diterima, gen ditunjukkan dengan nombor, dan subtipe adalah huruf Latin kecil.

Penyediaan khas berdasarkan bahan semulajadi.

Harga dadah

Ulasan rawatan

Hasil pertama dirasakan selepas seminggu pentadbiran.

Baca lebih lanjut mengenai ubat ini

Hanya 1 kali sehari, 3 titik

Arahan untuk digunakan

Memecahkan jadual virus genotip C:

  • Genotype 1a, 1b, 1c
  • Genotip 2a, 2b, 2c, 2 d
  • Genotype 3a, 3b, 3c, 3d, 3e, 3f
  • Genotype 4a, 4b, 4c, 4d, 4e, 4f, 4g, 4h, 4i, 4j
  • Genotip 5 a
  • Genotip 6 a

Genotip yang paling biasa 1,2,3. Di Rusia, yang paling biasa adalah 1a, 1b, 2, dan 3 jenis virus C.

Genotip virus 1b lebih sukar daripada yang lain untuk dirawat, dalam 90% ia menjadi kronik, di mana 30% dilahirkan semula sebagai kanser hati atau sirosis.

Genotip 2a dan 3a mempunyai tahap kejernihan 33-50%, lebih responsif terhadap terapi antiviral.

Apabila mengesahkan kehadiran virus, ujian PCR kuantitatif dijalankan untuk hepatitis C, yang digunakan untuk mengira bilangan molekul RNA yang terdapat dalam sampel makmal pesakit.

Analisis penyahkodan

Analisis PCR berkualiti tinggi mempunyai dua jawapan:

PCR negatif bermakna bahawa patogen tidak dikesan dalam sampel darah.
Jawapan positif menunjukkan sebaliknya: RNA satu atau genotip lain dari virus C ditemui.

Kebarangkalian kebolehpercayaan hasilnya ialah 95%. Baki 5% adalah kesilapan yang disebabkan oleh seseorang. Kemungkinan ini dibenarkan kerana keperluan yang tinggi untuk kajian ini:

  • peraturan untuk penyimpanan reagen;
  • kelayakan yang sesuai bagi kakitangan perubatan;
  • kesucian biomaterial.

Kit PCR itu sendiri mempunyai ketepatan diagnostik 100%.

PCR kuantitatif RNA Hepatitis C membolehkan penentuan viral load pada tubuh pesakit. Dengan bantuannya:

  • peringkat penyakit dinyatakan (akut, kronik);
  • menentukan keberkesanan rawatan antiviral;
  • Keperluan untuk biopsi hati sedang disiasat.

Dalam sesetengah kes, pesakit tidak merasakan apa-apa tanda penyakit, sementara jangkitan HCV dikesan oleh kaedah PCR. Ini bermakna bahawa penyakit itu adalah pada peringkat awal pembangunan atau dalam bentuk kronik. Kajian tambahan diperlukan untuk menjelaskan diagnosis, untuk permulaan rawatan antiviral awal.

Hepatitis C viral load

Beban virus menunjukkan aktiviti virus hepatik, bagaimana secara aktif pembiakannya berlaku.

Apa ini?

PCR hepatitis C kuantitatif diukur dalam Unit Antarabangsa setiap 1 ml atau IU / ml, yang bermaksud berapa banyak salinan asid ribonukleat sesetengah virus C yang terdapat dalam 1 ml darah yang diuji.

Apa yang tinggi, apa yang rendah?

Analisis beban virus membolehkan untuk menentukan kehadiran RNA virus pada kepekatan 50 IU / ml. Beban virus normal adalah apabila tiada molekul RNA HCV dikesan oleh PCR.

Jadual beban virus:

  • kepekatan rendah 600 IU / ml 3 * 104 IU / ml;
  • kepekatan sederhana dari 3 * 104 IU / ml hingga 8 * 105 MM;
  • tahap tinggi lebih daripada 8 * 105 IU / ml.

Beban viral yang rendah adalah isyarat bahawa rawatan terapeutik dipilih dengan betul, dan prognosis untuk mengubati hepatitis C adalah baik.

Kepekatan tinggi sel-sel virus menunjukkan bahawa penyakit itu berada dalam fasa akut. Darah pesakit adalah sumber jangkitan yang berbahaya.

Beban virus, petunjuk yang berada pada paras purata, mencirikan sama ada peringkat kronik HWS, atau mungkin mempunyai dua trend pembangunan: untuk meningkatkan atau menurun.

Setelah selesai, selepas 6 bulan, kawalan PCR dilakukan.

Kos diagnostik PCR

Gejala berikut harus menjadi perhatian:

  • kelemahan umum;
  • perubahan warna kulit, sklera mata, pelepasan;
  • mual;
  • menurun selera makan;
  • sakit pada otot dan sendi;
  • berat di hipokondrium yang betul;
  • paras darah tinggi AST dan ALT.

Dalam hubungan dengan pesakit yang dijangkiti, dalam tempoh pra operasi, hemodialisis juga disemak pemeriksaan.

Klinik kerajaan melakukan ujian darah untuk PCR secara percuma jika terdapat rujukan dari pakar penyakit berjangkit atau pakar hepatologi.

Perkhidmatan yang dibayar untuk diagnosis PCR disediakan di semua bandar utama di Rusia. Kos bergantung pada jenis ujian, peralatan yang tersedia, masa dan faktor lain.

Analisis PCR berkualiti tinggi di Moscow dan St. Petersburg akan berkurangan dari 600 hingga 900 Rubles. Di kawasan - dari 300 hingga 800 rubel.

Penentuan hepatitis C viral load akan menelan 17.000-22.000 rubel. Untuk jenis lain jangkitan harga penyelidikan kuantitatif: 1200-10000 rubel.

Kelebihan dan kekurangan kaedah PCR

Apakah kelebihan kaedah tindak balas rantaian polimerase terhadap kaedah diagnostik lain?

  1. Pelbagai aplikasi. Menggunakan PCR, menggunakan peralatan standard, anda boleh mengenal pasti virus.
  2. Ketepatan penentuan patogen. Menggunakan pelbagai kombinasi enzim dan teknik analisis, spesifikasi 100% kajian untuk jangkitan yang ditunjukkan dicapai.
  3. Kepekaan yang tinggi. Kaedah ini membolehkan untuk mengesan kehadiran satu molekul virus dalam darah.
  4. Kecekapan. Analisis kualitatif sudah siap dalam beberapa jam, kuantitatif - dalam dua hari.
  5. Diagnosis virus dalam tempoh inkubasi. Semasa PCR, patogen tersebut tidak ditentukan oleh kehadiran antibodi, apabila badan mempunyai tindak balas imun, tetapi sebelum permulaan proses patologi, yang memudahkan rawatan.

Kelemahan PCR adalah hasil kelebihannya:

  • kesucian analisis memerlukan tahap kesucian tertinggi, termasuk udara di dalam makmal, supaya DNA "asing" tidak masuk ke dalam sampel yang sedang diteliti;
  • keperluan yang tinggi untuk kakitangan yang terlibat dalam pengumpulan dan analisis biomaterial.

Analisis kualitatif untuk hepatitis C

Tinggalkan komen 7,180

Analisis kualitatif tindak balas rantai polimerase - PCR untuk hepatitis C menentukan kehadiran atau ketiadaan HCV dalam badan. Dalam keadaan makmal, struktur RNA dipelajari, yang akan merangkumi virus. Dalam kes pengesanan virus C, perlu menjalani rawatan, kerana keadaan hati yang diabaikan akan menyebabkan akibat yang serius. PCR berkualiti tinggi juga dilakukan selepas pemulihan untuk mengesahkan ketiadaan antibodi. Ditugaskan untuk pemeriksaan rutin. Dengan kepekatan rendah agen penyebab dalam darah, PCR (kualitatif) tidak dapat mengesan apa-apa, kerana sistem diagnostik mempunyai ambang kepekaannya sendiri. Dalam kes peringkat awal penyakit atau bentuk ringan, PCR ultra diagnostik dilakukan pada peralatan ultra-sensitif.

Apakah virus RNA?

Istilah RNA virus hepatitis C (atau RNA virus hepatitis C) adalah penyakit hati itu sendiri. Virus C mengikat sel sihat tubuh dengan menembusi ke dalam. Lama kelamaan, tersebar di seluruh badan, hanya perlu masuk ke dalam darah. Akibatnya, patogen itu menembusi hati, bersatu dengan sel-selnya dan bekerja keras. Sel-sel hepatik (hepatosit) berfungsi di bawah pengaruhnya, menjalani perubahan, dan dari ini mereka mati. Semakin lama virus C berada di hati, semakin banyak jumlah sel mati. Dari masa ke masa, mengembangkan penyakit berbahaya yang membawa kepada kemerosotan ganas dan kematian.

Jangkitan hati dengan jenis virus ini mungkin tidak nyata secara luaran. Selama bertahun-tahun atau beberapa dekad, orang yang terinfeksi terasa sihat, dan hanya pemeriksaan rawak yang paling sering mendedahkan patologi. Apabila menderma darah untuk hepatitis, sebahagian daripada rantaian RNA (ribonucleic acid), yang merupakan sebahagian daripada gen manusia (DNA), diperiksa. Hasil ujian makmal tidak boleh digunakan untuk perawatan diri, karena ini hanya merupakan indikator. Gambaran yang tepat dan diagnosis lanjut adalah lebih baik ditentukan oleh doktor.

Apabila selesai: petunjuk untuk penyelidikan

Dalam pengesahan HCV, analisis PCR dilakukan (tindak balas rantai polimerase). Kajian PCR membantu untuk mencari bahan patogen dalam struktur RNA dan menetapkan terapi yang berkesan. Dilantik dalam kes berikut:

  • pengesanan tanda-tanda keradangan hati;
  • kajian skrining untuk pencegahan;
  • pemeriksaan orang yang dihubungi;
  • diagnosis hepatitis asal campuran (penentuan patogen utama);
  • menentukan tahap aktiviti pembiakan virus dalam bentuk kronik;
  • sirosis hati;
  • untuk menentukan keberkesanan rawatan yang ditetapkan.
Kajian PCR ditetapkan oleh doktor untuk menentukan keberkesanan rawatan untuk hepatitis.

Terdapat analisis kualitatif serta kuantitatif PCR. PCR kuantitatif menunjukkan nisbah peratusan RNA kepada pembawa virus dalam darah, dan kualitatif menunjukkan kehadiran atau ketiadaan virus. Penunjuk positif kualiti (kehadiran Hepatitis C RNA) juga memerlukan penyelidikan kuantitatif. Tahap kepekatan yang tinggi dari agen penyebab hepatitis C dikaitkan dengan risiko penghantarannya, iaitu, jangkitan orang lain. Tuduhan yang lebih rendah boleh dirawat dengan lebih baik. Jumlah virus RNA dalam darah tidak berkaitan dengan intensiti penyakit ini. Analisis PCR juga dilakukan dalam kes terapi interferon untuk menetapkan tempoh dan kerumitan kursus rawatan.

Ciri-ciri analisis PCR berkualiti tinggi untuk hepatitis C

Analisis kualitatif dengan indeks reaksi rantai polimer diberikan kepada semua pesakit yang mempunyai antibodi untuk hepatitis C dalam darah mereka. Mereka yang telah sakit dan sembuh harus mengambil ujian semula. Ia disyorkan untuk lulus ujian untuk hepatitis B, maka, jika kesimpulan positif, dan untuk hepatitis D. Juga, tindak balas kualitatif yang dianalisis harus dilakukan bersamaan dengan ujian darah yang lain. Analisis akan menunjukkan gambaran lengkap penyebaran virus.

Dari hasil ujian, hanya ujian positif untuk hepatitis C akan kelihatan atau negatif, iaitu kehadiran atau ketiadaan virus. Jika output "dikesan", maka virus itu dan terus aktif. Penetapan "tidak dikesan" menunjukkan ketiadaan virus atau jumlahnya yang kecil. Dengan penunjuk ini, perlu diingat bahawa sensitiviti analisis sistem diagnostik adalah berbeza dan bahawa hepatitis C RNA mungkin masih dalam darah, tetapi tidak ditunjukkan dalam analisis.

Kaedah PCR yang sangat sensitif ultra hepatitis C mendedahkan walaupun dalam jumlah yang sedikit. Kajian hibridensi fluoresen digunakan, yang banyak kali lebih tinggi daripada sistem PCR standard. Kaedah ini digunakan dalam beberapa kes:

  • disyaki bentuk tersembunyi hepatitis C;
  • Diagnostik PCR tidak mengesahkan patogen, tetapi terdapat antibodi;
  • dalam kes pemulihan;
  • untuk mengesan jangkitan awal.
Kembali ke jadual kandungan

Analisis penyahkodan

Penyahkodan PCR HCV mempengaruhi keputusan muktamad ketika membuat diagnosis, khususnya dengan metode ultrametod. Kelemahan utama kajian ini adalah pematuhan ketat kepada keadaan steril untuk sampel dan bahan. Penyimpangan sedikit kadang-kadang menunjukkan kesimpulan analitis yang tidak tepat, merumitkan diagnosis dan rawatan berikutnya. Analisis PCR untuk menentukan RNA hepatitis tidak senantiasa menunjukkan gambaran penyakit, kadang kala ketidakakurasian dibenarkan, dan di kedua-dua arah.

Mendiagnosis virus hepatitis, disyorkan untuk menggunakan peperiksaan yang komprehensif.

Norma petunjuk

Ketiadaan antibodi JgM terhadap hepatitis C virus dalam hasil kajian dianggap sebagai norma dalam analisis reaksi rantai polimerase. Pada masa yang sama, penemuan analisis serologi menunjukkan kehadiran antibodi kepada virus C dan ini juga berada dalam jarak normal. Takrif kualitatif tidak menunjukkan keamatan penyakit, ia hanya mendedahkan agen penyebab hepatitis C dalam RNA. Analisis ini diulangi selepas rawatan untuk mengesahkan pemulihan sebenar.

Penyimpangan

Sekiranya antibodi JgM ke RNA HCV hadir, ini menunjukkan jangkitan yang membina. Penyakit ini pada masa yang sama meneruskan akut atau kronik, yang ditunjukkan dalam pelbagai peringkat. Sekiranya penurunan jumlah antibodi dicatatkan, analisis akan menunjukkan bahawa hasil rawatan dicapai semasa pemulihan. Hanya kes-kes palsu yang positif yang jarang ditemui dalam diagnosis. Mereka ditemui pada wanita semasa kehamilan dan pada orang dengan penyakit berjangkit lain.

Penggunaan diagnostik PCR

Reaksi rantai polimerase (PCR) dalam biologi molekular adalah kaedah eksperimen untuk mengesan virus. Ia membolehkan anda meningkatkan ketumpatan kepekatan sesetengah asid nukleik tertentu (DNA) dalam sampel bahan biologi, yang membolehkannya menentukan (mengenali) dan menghitung.

Analisis dilakukan seperti berikut. Bahan genetik (sampel darah), yang boleh merangkumi gen yang dikehendaki, dimasukkan ke dalam tiub. Terdapat juga primer yang ditempatkan - segmen-segmen kimia yang disintesis daripada panjang kecil gen yang dikehendaki.

Polimerase DNA atau RNA juga ditambah ke dalam vesel, ia dapat menyusun rantai asid nukleik yang sama sekali sama dengan yang asal. Komposisi yang dihasilkan disuntik dan satu set empat nukleotida bebas - bahan bangunan khusus untuk RNA atau DNA, salah satunya mengandungi zarah fosforus radioaktif.

Campuran yang dihasilkan dipanaskan hingga 95-96 ° C, itulah sebabnya dua heliks DNA, yang biasanya saling berkaitan, ditenun. Kemudian ubat disejukkan, pada masa yang mana primers itu sendiri melekat pada kawasan genom virus yang dikehendaki, menghalang RNA (atau DNA) daripada membentuk helix ganda lagi.

Dalam proses penyejukan, polimerase mencari rantaian nukleotida bebas. Untuk fungsi enzim ini diperlukan satu rangkaian nukleotida. Kerana polimerase tergelincir di sepanjang rantaian DNA (seperti cincin pada tali), ia tidak dapat berfungsi pada heliks ganda.

Selepas ini, kitaran pemanasan berulang dilakukan, kerana rangkaian nukleotida dipisahkan. Di setiap kitaran PCR ini, amaun dalam sampel gen yang dikehendaki dari hepatitis meningkat secara eksponen, dan selebihnya bahan genetik dihasilkan (tumbuh) secara linear.

Selepas pembersihan penyelesaian daripada residu nukleotida dan pemisahan oleh elektroforesis rantai DNA dengan parameter berat molekul, seseorang dapat menentukan sama ada terdapat gen yang dikehendaki dalam sampel yang di bawah kajian atau tidak.

Faedah PCR

Ujian makmal menggunakan PCR membolehkan lebih banyak maklumat diperoleh daripada kehadiran virus RNA. Dengan menentukan parameter tahap radiasi radioaktif, adalah mungkin untuk mengenal pasti berapa banyak bahan genetik yang asalnya terkandung dalam sampel yang di bawah kajian. Dalam kes hepatitis, tentukan penunjuk paras viral load.

Satu lagi kelebihan kaedah ini adalah tahap kepekaan sensitiviti CR yang sangat tinggi. Ia lebih tinggi daripada kaedah klasik untuk mengesan virus. Idealnya, untuk mengenal pasti gen yang dikehendaki, untuk PCR, hanya satu virus dalam sampel yang mencukupi.

Di samping itu, PCR adalah benar-benar khusus. Primernya direka sedemikian rupa sehingga mereka sepenuhnya sesuai dengan kawasan unik gen-gen yang dikehendaki yang tidak ada urutan lain. Seperti cap jari yang unik, terdapat urutan nukleotida unik dalam setiap gen.

Analisis kualitatif PCR

Analisis kualitatif membolehkan anda mengenalpasti hanya kehadiran virus dalam darah. Ujian ini harus dijalankan untuk semua pesakit di mana antibodi untuk hepatitis C ditemui di dalam darah. Ia boleh mengakibatkan hanya satu daripada dua nilai: "dikesan" atau "tidak dikesan." Dalam orang yang sihat, norma (nilai rujukan) harus "tidak dikesan".

Terdapat penafsiran khas mengenai hasil penyelidikan kualitatif tersebut:

  • Hasilnya "dikesan." Ini bermakna bahawa serpihan RNA yang spesifik untuk virus hepatitis C didapati dalam sampel dianalisis bahan biologi yang diambil. Akibatnya, terdapat fakta bahawa pesakit itu dijangkiti virus hepatitis C. dan pada masa ini ia menjangkiti sel hati baru di dalam badan.
  • Hasilnya "tidak dikesan." Keputusan sedemikian menunjukkan bahawa dalam sampel dianalisis bahan biologi yang diperolehi di makmal ini, tidak ada serpihan RNA yang didapati khusus untuk virus hepatitis C. Selain itu, kepekatan RNA dari jangkitan patogen dalam sampel ini adalah di bawah had kepekaan ujian.

Dalam fasa akut RNA virus hepatitis C, kajian kualitatif oleh kaedah PCR boleh dikesan selepas 1-2 minggu selepas jangkitan badan, iaitu sebelum penampilan antibodi ke hepatitis itu sendiri.

Keputusan ujian yang tidak tepat dalam kajian ini boleh didapati dengan:

  • biomaterial tercemar;
  • kehadiran heparin dalam darah pesakit;
  • kehadiran dalam sampel bahan kimia atau protein (perencat) yang mempengaruhi pelbagai komponen PCR.

Untuk melakukan analisis kualitatif PCR, tidak ada penyediaan khusus pesakit untuk kajian ini diperlukan. Darah Venous digunakan sebagai bahan.

Penilaian keputusan

Ujian PCR berkualiti tinggi mempunyai sensitiviti tertentu, dan bergantung kepada ketepatan penyelidikan dan tahap peralatan di makmal boleh berbeza-beza dari 10 hingga 500 IU / ml.

Ini bermakna jika virus dalam sampel darah hadir dalam kepekatan yang sangat rendah (kurang daripada nilai ambang kepekaan makmal ini) maka hasilnya boleh ditentukan sebagai "tidak dikesan" dalam pesakit pesakit. Oleh kerana itu, apabila melakukan analisis kualitatif PCR dengan tingkat rendah viremia (kepekatan virus rendah), misalnya, untuk pesakit yang menjalani terapi antiviral, sangat penting untuk mengetahui ambang kepekaan sistem diagnostik ini.

Varian sistem diagnostik

Untuk mengawal tindak balas virologi, disyorkan untuk menggunakan sistem diagnostik dengan ambang kepekaan sekurang-kurangnya 50 IU / ml untuk rawatan antiviral. Kriteria ini dipenuhi, contohnya dengan analisa Cobas Ampicolor HCV-Test (tepat kepada 50 IU / ml), serta RealBest HCV RNA (dengan kepekaan 15 IU / ml).

Menurut cadangan WHO, untuk menubuhkan diagnosis definitif hepatitis C, hanya perlu berdasarkan asas pengesanan tiga kali RNA virus C pada sampel serum pesakit, dengan ketiadaan penanda hepatitis lain.

Sebagai tambahan kepada kaedah PCR, ujian TMA (kaedah penguatan transkripsi) juga digunakan untuk mengesan RNA HCV pada pesakit. Ia mempunyai ambang kepekaan yang terbaik (5-10 IU / ml), tetapi di negara kita seperti kaedah ujian belum lagi biasa.

Julat pengubahsuaian virus yang dapat dikesan

Seperti penentuan kualitatif dalam serum kehadiran RNA virus hepatitis C memungkinkan untuk menentukan beberapa genotip virus ini. Pada masa ini, sains tahu lebih daripada enam genotip virus ini, serta kira-kira 10 subtipe penyakit ini.

Di negara kita, virus biasa 1, 2, 3 genotip. Makmal dapat mengesan genotip berikut: 1a dan 1b, 2a, 2b dan 2c, serta 3, 4, 5a dan 6, tanpa mengira subtipe. Untuk semua modifikasi virus, spesifikasi pengesanan adalah 100%.

Analisis Kuantitatif PCR

Dengan bantuan ujian PCR kuantitatif, tahap kepekatan virus hepatitis dalam sampel darah (viral load) ditentukan. Ujian ini untuk viremia (kepekatan virus) membolehkan anda menentukan bilangan unit bahan genetik tertentu (RNA yang paling virus), yang dikesan dalam jumlah tertentu. Dalam kes ini, tentukan kepekatannya dalam 1 ml, yang sepadan dengan 1 cu. lihat

Parameter kuantitatif analisis dinyatakan dalam angka, untuk tujuan ini unit antarabangsa (IU) per mililiter (ml), yang disebut sebagai IU / ml, digunakan sebagai unit pengukuran. Sekarang dalam sesetengah makmal, jumlah virus boleh ditentukan dalam unit lain: bilangan salinan per ml ditunjukkan sebagai salinan / ml.

  • Tarikh untuk hepatitis C, analisis kuantitatif PCR yang dilakukan sebelum rawatan bermula. Kemudian pada minggu ke-1, ke-4, ke-12 dan ke-24. Penilaian pada minggu ke-12 adalah petunjuk, ia membolehkan untuk menentukan keberkesanan terapi.
  • Penyediaan untuk analisis. Untuk menjalankan analisis kuantitatif PCR, tiada persediaan khusus pesakit untuk kajian diperlukan. Setengah jam sebelum pensampelan tidak sepatutnya merokok. Darah Venous digunakan sebagai bahan makmal.

Penilaian keputusan

Bagi sistem ujian makmal yang berbeza, terdapat faktor penukaran yang berbeza untuk penunjuk ini dalam IU / ml. Secara purata, mereka mengambil parameter penukaran, di mana 4 salinan / ml = 1 IU / ml. Sebagai contoh, jika makmal memberi hasil analisis PCR 2.4 * 10 6 salinan / ml, maka parameter ini hendaklah dibahagikan kepada 4 dan kita akan mendapat 6 * 10 5 IU / ml.

Beban 800,000 IU / ml dianggap tinggi, kira-kira 3,000,000 salinan / ml. Viremia rendah, menurut beberapa pengarang, sesuai dengan parameter PCR kuantitatif di bawah 400,000 IU / ml.

Hasil daripada ujian kuantitatif, keputusan akhir dapat disampaikan bukan dalam bentuk nilai digital, tetapi: "di bawah julat ukur", atau "tidak dapat dikesan".

  • Penilaian: "di bawah julat ukuran." Ini menunjukkan bahawa ujian kuantitatif tidak dapat mengesan RNA virus hepatitis C, tetapi virus itu sendiri terdapat di dalam badan dalam kepekatan yang sangat rendah. Ini terbukti dengan ujian kualitatif tambahan, mengesahkan fakta kehadiran virus itu.
  • Penilaian: tidak dikesan. Keputusan ini menunjukkan bahawa ujian kuantitatif tidak terdapat dalam sampel RNA virus.

Parameter beban virus, pertama sekali, menentukan tahap jangkitan penyakit, tahap "jangkitan" pesakit. Semakin tinggi kepekatan virus pesakit, semakin besar peluangnya untuk lulus kepada orang lain. Misalnya, semasa hubungan seks dengan orang yang sakit, atau secara menegak. Penunjuk kuantitatif ini juga membantu menentukan keberkesanan rawatan pesakit.

Mengendalikan analisis kuantitatif CCP adalah penting untuk terapi antiviral, menilai kejayaannya dan merancang tempoh kursus. Oleh itu, dengan tindak balas yang cepat terhadap badan untuk rawatan dan tahap viremia yang rendah, tempoh terapi mungkin dipendekkan.

Sekiranya parameter PCR kuantitatif perlahan dikurangkan, terapi antiviral perlu dipanjangkan atau diubah suai. Sekiranya tahap beban virus adalah rendah, maka ini adalah faktor yang menggalakkan untuk terapi, tetapi jika dinaikkan, maka kaedah rawatan yang digunakan tidak berkesan dan ubat-ubatan atau kaedah penggunaannya harus diubah.

Hepatitis C PCR

PCR - diagnostik moden hepatitis C

Hepatitis C virus adalah salah satu penyakit yang paling "berbahaya" hati. Untuk masa yang lama, ia adalah asimtomatik, yang membawa kepada proses kronik (dalam 80%). Dalam kebanyakan kes, berakhir dengan fibrosis hati, mengalir ke dalam sirosis atau bengkak organ.

Khususnya adalah kaedah diagnosis awal penyakit ini. Reaksi rantai polimerase (PCR) membolehkan anda membuat diagnosis dalam masa beberapa hari selepas jangkitan.

Secara ringkas mengenai hepatitis C virus

Patogen - RNA yang mengandungi virus yang mempunyai beberapa subtipe. Menembusi tubuh manusia melalui darah: secara seksual, dengan pemindahan darah, suntikan dan prosedur perubatan yang invasif.

Bentuk akut penyakit ini tidak mempunyai gejala yang ketara. Kadangkala terdapat berat di hipokondrium yang betul, yang mana kebanyakan pesakit tidak perasan.

Bentuk kronik menyebabkan pelanggaran terhadap semua fungsi hati: keracunan, sakit perut, sakit kuning, kesakitan sendi, dan banyak lagi. Pada peringkat ini, proses itu menjadi tidak dapat dipulihkan.

Seringkali, hepatitis C kronik menjadi prekursor degenerasi malignan pada tisu hati.

Intipati kaedah PCR

PCR digunakan untuk menentukan RNA virus 5 hari selepas jangkitan. Dalam tempoh ini, tindak balas imun belum dilancarkan, hasil kajian serologi akan negatif, gejala klinikal tidak hadir sepenuhnya.

Ia adalah diagnosis PCR yang memungkinkan untuk membuat diagnosis pada tahap awal penyakit, apabila rawatan yang mencukupi dapat meningkatkan prognosis untuk pesakit. Terdapat dua jenis PCR - kualitatif dan kuantitatif.

Kaedah kualitatif

Mengesan bahan genetik virus hepatitis C dalam jumlah minimum. Hasilnya adalah dua jenis:

  1. "Dikesan" - tindak balas positif, yang bermaksud kehadiran penyakit pada manusia.
  2. "Tidak dikesan" - analisis negatif, yang menunjukkan ketiadaan jangkitan atau kehadiran virus dalam kuantiti yang kecil yang tidak ditetapkan oleh kaedah ini. Ini tidak memberikan peluang 100% bahawa pesakit tidak mempunyai hepatitis C.

Darah biasanya digunakan untuk analisis, tetapi air liur, bendalir mani, dan cecair biologi lain juga sesuai.

Hepatitis C PCR

Kaedah kuantitatif

Ini adalah kaedah yang lebih kompleks dan mahal, yang dijalankan mengikut petunjuk tertentu:

  1. Pengesahan diagnosis dengan PCR kualiti positif dan pengesanan antibodi spesifik.
  2. Apabila gabungan patologi virus (virus hepatitis C sering "bersebelahan" dengan hepatitis B, dipancarkan oleh kaedah yang sama).
  3. Memantau keberkesanan terapi. Untuk melakukan ini, mengetahui tahap viremia sebelum rawatan, kemudian pada terapi 4, 12, 24 minggu. Sekiranya pada minggu ke-12 tahap kandungan virus tidak dikurangkan oleh dua unit logaritma, maka penyediaan dipilih secara salah.
  4. Diagnosis peralihan dari akut ke kronik.

Jumlah per unit cecair ujian (biasanya 1 ml), bilangan unit virus dikira. Hasilnya dinyatakan dalam IU / ml atau jumlah salinan virus RNA dalam 1 ml.

Ia menunjukkan keamatan beban viral pada badan. Semakin besar nilai ini, semakin besar kemungkinan penyebaran virus kepada orang lain. Keparahan kerosakan pada hati tidak bergantung pada tahap viremia. Untuk melakukan ini, terdapat banyak ujian fungsi hati yang dipanggil.

Persediaan untuk kajian ini

Kebanyakan analisis palsu palsu adalah disebabkan oleh ketidakpatuhan teknologi analisis. Untuk mengelakkan ini, anda perlu mematuhi peraturan berikut:

  1. Benarkan sepenuhnya bahan pencemar daripada memasuki biomaterial (keadaan kemandulan mutlak).
  2. Kepekatan minimum heparin dalam darah, yang digunakan untuk mencegah pembekuan atau diberikan kepada pesakit untuk tujuan terapeutik, memberi kesan kepada PCR. Adalah penting untuk menjelaskan isu ini dengan pesakit terlebih dahulu.
  3. Jangan biarkan apa-apa bahan dari alam sekitar meneutralkan enzim dalam sistem ujian PCR.

Semua keperluan ini berkaitan dengan aktiviti juruteknik makmal dan doktor. Pesakit tidak memerlukan persediaan khas. Biasanya darah diberikan pada perut kosong, tidak termasuk alkohol.

Faedah PCR

Dalam tinjauan komprehensif mengenai hepatitis C, tindak balas rantai polimer berada di tempat pertama kerana beberapa kelebihan:

  1. Pengasingan langsung patogen dengan keupayaan untuk mengenal pasti subtipnya. Dalam kes lain (tindak balas serologi), tindak balas sistem imun kepada virus disiasat.
  2. Kekhususan tinggi teknik ini. Kebarangkalian untuk mendapatkan hasil palsu-palsu atau palsu-negatif diminimumkan (terutamanya dalam hal pelanggaran teknologi kajian).
  3. Kepekaan yang tinggi. Kebanyakan makmal dan sistem ujian memberikan kepekaan sekurang-kurangnya 50 IU / ml. Terdapat ultra PCR di mana penunjuk ini adalah 10 IU / ml. Ini bermakna virus hepatitis C dapat dikesan pada hari-hari pertama jangkitan.
  4. Keterlaluan. Kaedah PCR mendedahkan beberapa patogen hepatitis, jika ada.

PENTING! Virus yang mempunyai variasi genotip yang tinggi (hepatitis C, influenza) "mengelirukan" sistem imun, yang membawa kepada penunjuk kabur serologi (mengesan antibodi spesifik). Hanya PCR memberikan jawapan yang tepat mengenai kehadiran genotip patogen dalam badan.

Tafsiran hasil

PCR untuk hepatitis C biasanya dilakukan selepas ujian serologi untuk antibodi. Kesukaran yang paling besar untuk pesakit adalah tafsiran varian kuantitatif kaedah. Mari kita cuba memahami isu ini.

Jika keputusan dibentangkan dalam IU / ml, maka hasilnya digambarkan seperti berikut (data diberikan untuk peralatan dan sistem ujian Rusia):

Jadual menunjukkan varian tafsiran untuk hanya satu varian sistem ujian Rusia. Setiap makmal boleh menggunakan peralatannya, memberikan percanggahan nilai. Biasanya keputusannya diberikan sama ada dengan penyahsulitan siap, atau dengan menunjukkan had nilai normal.

Ciri PCR

Dari tafsiran yang betul hasil analisis bergantung pada permulaan rawatan, yang dalam hal hepatitis C sangat penting bagi pesakit.

Terdapat beberapa faktor yang mempengaruhi pengekodan keputusan analisis:

  • Kualiti peralatan dan kepekaan sistem ujian. Hari ini yang paling biasa adalah Cobas Ampicolor HCV-Test dan RealBest HCV RNA. Kepekaan mereka sekurang-kurangnya 50 IU / ml. Ini bermakna jika virus hadir dalam kepekatan yang lebih rendah (contohnya, pada hari pertama jangkitan), hasil kajian akan menjadi negatif, dan penyakit itu akan berkembang tanpa rawatan. Baru-baru ini, sistem diagnostik ultra sensitif telah muncul (sekurang-kurangnya 10 IU / ml). Mereka secara signifikan meningkatkan kualiti diagnosis. Kos PCR tersebut berbeza-beza - dari 1800 hingga 10 ribu rubel, bergantung kepada makmal.
  • Diagnosis akhir dibuat hanya selepas tiga kajian yang berbeza mengenai cecair biologi. Jika hasilnya negatif tiga kali, maka tidak ada virus hepatitis C dalam tubuh pesakit.
  • Untuk rawatan yang berjaya, adalah perlu bukan sahaja untuk mengesahkan fakta jangkitan virus, tetapi juga untuk menentukan subtipenya: 1a, 1v, 2a, 2v, 2, 3, 4, 5a, 6.
  • Hasilnya dinilai dalam dua unit: IU / ml dan jumlah salinan RNA / ml. Nombor mereka berbeza dengan tepat 4 kali, yang mesti diingat, mendapat hasil analisis di tangan.

Rawatan tindak balas PCR terhadap hepatitis C virus perlu dijalankan oleh pakar. Doktor memahami petunjuk kuantitatif dan akan dapat membandingkan pematuhan keputusan makmal dengan gambar klinikal.

Kadang-kadang terdapat pilihan ujian positif palsu atau palsu, dan hanya pemeriksaan komprehensif pesakit membolehkan anda "tidak ketinggalan" penyakit hati yang teruk ini.

Kos pengujian darah dan PCR untuk hepatitis C

Hepatitis C adalah patologi radang di mana sel-sel hati terjejas. Penyakit ini berkembang akibat penembusan virus hepatitis C (HVC) ke dalam tubuh manusia.

Bentuk penyakit ini boleh menjadi akut atau kronik.

Selalunya, gejala patologi akut di kebanyakan pesakit tidak hadir, kadang-kadang penyakit ini disertai oleh sensasi yang menyakitkan di perut, penurunan prestasi, peningkatan keletihan, hilang selera makan, naungan gelap urin, perubahan warna najis, kesucian kulit dan membran mukus, sakit sendi. Gejala seperti biasanya berlaku 6-8 minggu selepas jangkitan, tetapi mungkin muncul selepas enam bulan.

Dengan perkembangan fenomena tersebut, adalah perlu untuk menghubungi institusi perubatan dan menjalani pemeriksaan menyeluruh terhadap keseluruhan organisma. Sebagai sebahagian daripada peperiksaan perubatan, ujian darah untuk hepatitis C dilakukan.

Hari ini, dengan bantuan teknik diagnostik moden, patologi ini dapat dikenalpasti pada peringkat awal perkembangan, yang dapat meningkatkan peluang penyembuhan penyakit yang lengkap.

Kumpulan berikut ini dikehendaki menguji hepatitis C:

  • wanita dalam tempoh membawa kanak-kanak;
  • orang yang mempunyai tanda-tanda hepatitis;
  • kakitangan perubatan;
  • penderma organ dan penderma yang berpotensi;
  • penagih dadah, orang yang dijangkiti HIV, kehidupan intim perangsang.

Senarai kajian yang diperlukan

Apakah ujian yang perlu saya ambil untuk hepatitis C? Untuk mengenal pasti penyakit dengan tepat, mengenal pasti punca-punca dan menentukan keadaan parenchyma hati, kajian berikut diperlukan:

  • ujian air kencing umum dan darah;
  • analisis biokimia darah;
  • Analisis PCR;
  • ujian darah untuk pengesanan antibodi kepada HVC;
  • ujian darah untuk antibodi sedia ada ke sel-sel hati sendiri;
  • biopsi hati.

Mengekodkan ujian darah untuk hepatitis C dilakukan oleh pakar. Pertimbangkan setiap kaedah penyelidikan dengan lebih terperinci, dan juga kami akan memahami analisis hepatitis C yang paling tepat.

Analisis am

Apabila melakukan ujian darah umum untuk hepatitis C, anda boleh menilai keadaan pesakit. Perubahan dalam parameter darah tidak dianggap sebagai gejala khusus hepatitis, bagaimanapun, dengan penyakit ini, terdapat gangguan seperti:

  • mengurangkan kepekatan hemoglobin, platelet dan leukosit;
  • meningkatkan kandungan limfosit;
  • pembekuan darah dilanggar;
  • kadar pemendapan erythrocyte (ESR) meningkat.

Analisis umum air kencing memungkinkan untuk mengesan dalam komposisi urobelin - pigmen hempedu yang berlaku di dalam air kencing sebagai akibat daripada gangguan fungsi hati.

Analisis biokimia

Analisis biokimia darah dalam hepatitis C memungkinkan untuk mengenal pasti gangguan seperti:

  • tahap enzim hati yang tinggi (alanine transaminase - ALT dan aspartate aminotransferase - AST), yang memasuki darah apabila hepatosit rosak. Dalam keadaan biasa, penunjuk ini untuk lelaki tidak boleh melebihi 37 IU / l, untuk wanita - tidak lebih tinggi daripada 31 IU / l. Peningkatan kepekatan ALT dan AST dalam hepatitis C tanpa gejala sering merupakan satu-satunya gejala penyakit ini. Di samping itu, glutamil transpeptidase alkali fosfatase alkali meningkat dalam darah (biasanya tidak melebihi 150 IU / l).
  • Kandungan bilirubin (kedua-duanya umum dan langsung) dalam darah melebihi. Jika tahap pigmen kuning dalam serum melebihi 27-34 μmol / l, penyakit kuning berlaku (sehingga 80 μmol / l dalam bentuk ringan, 86-169 μmol / l - sederhana, di atas 170 μmol / l - dalam bentuk teruk).
  • Tahap albumin diturunkan, kepekatan globulin gamma, sebaliknya, meningkat. Gamma globulins terdiri daripada imunoglobulin - antibodi yang melindungi tubuh daripada bahan penyebab penyakit.
  • peningkatan kepekatan trigliserida dalam darah.

Ujian PCR

Menggunakan teknik PCR, adalah mungkin untuk mendiagnosis agen penyebab penyakit ini. Melakukan analisis ini memungkinkan untuk mengesan virus dalam darah, walaupun kuantitasnya adalah minima. Analisis PCR untuk hepatitis C memungkinkan untuk menentukan jangkitan sedia ada dalam darah yang sudah selepas 5 hari dari saat jangkitan, iaitu, jauh sebelum muncul antibodi.

Sekiranya hasil ujian darah untuk hepatitis C oleh PCR adalah positif, ini menunjukkan adanya jangkitan aktif di dalam badan. Dengan menggunakan kaedah ini, anda boleh menjalankan kajian kualitatif dan kuantitatif RNA HVC.

Dalam perjalanan analisis kualitatif PCR untuk hepatitis C, adalah mungkin untuk mengesan virus yang ada di dalam tubuh manusia.

Prosedur diagnostik ini dilakukan jika anti-HVC dikesan dalam darah.

Memecahkan analisis untuk hepatitis C mengandungi maklumat bahawa jangkitan telah dikesan atau tidak dikesan di dalam badan. Biasanya, tiada bahan patologi yang terdapat di dalam darah.

Jika ujian hepatitis C adalah positif, itu bermakna patogen terus membahagikan dan menjangkiti sel-sel hati.

Hasil analisis ini mungkin tidak dapat diandalkan, adalah mungkin dalam kes berikut:

  • bahan biologi tercemar yang digunakan;
  • di hadapan heparin dalam darah;
  • dengan kehadiran bahan kimia atau protein (perencat) dalam biomaterial yang dikaji, yang mempengaruhi unsur-unsur PCR.

Analisis kuantitatif hepatitis C memberikan maklumat mengenai jumlah virus yang terkandung di dalam darah, iaitu, menentukan viral load. Dengan konsep ini bermakna jumlah RNA HVC hadir dalam darah (contohnya, dalam 1 ml). Dalam tafsiran analisis kuantitatif untuk hepatitis C, nilai ini dinyatakan dalam kesamaan digital, diukur dalam IU / ml.

Darah untuk PCR untuk hepatitis C diambil sebelum langkah-langkah terapeutik. Selepas analisis dilakukan pada 1, 4, 12 dan 24 minggu. Kajian pada minggu 12 adalah menunjukkan dan dijalankan untuk menilai keberkesanan prosedur perubatan.

Sekiranya ujian untuk hepatitis C semasa mengandung adalah positif dan nilai-nilai beban virus melebihi, risiko penghantaran patogen dari ibu yang sakit kepada kanak-kanak meningkat beberapa kali. Selain itu, dengan peningkatan nilai viral load, pelaksanaan langkah-langkah terapeutik adalah sukar.

Menurut transkrip ujian untuk hepatitis C, jika nilai viral load melebihi 800,000 IU / ml, maka itu tinggi. Sekiranya angka di bawah 400,000 IU / ml, tahap beban virus dianggap rendah.

Analisis hepatitis C oleh PCR dianggap paling tepat dan mempunyai beberapa kelebihan terhadap pilihan penyelidikan lain, iaitu:

  • diagnosis langsung dari agen penyebab penyakit ini. Apabila melakukan kajian tradisional ditentukan oleh kehadiran penanda protein yang merupakan produk sisa patogen. Ini hanya menunjukkan bahawa jangkitan ada dalam darah. Apabila ujian untuk hepatitis C oleh PCR, adalah mungkin untuk menentukan jenis patogen patologi berbahaya.
  • kekhususan teknik. Semasa prosedur ini, rantau DNA unik ditentukan dalam biomaterial yang sepadan dengan hanya satu jenis patogen. Ini meminimumkan kemungkinan hasil palsu.
  • kepekaan yang tinggi. Apabila melakukan analisis PCR, anda dapat mengesan jumlah minimum virus. Ini penting jika bahan-bahan patogen yang kondusif dikenal pasti yang menimbulkan ancaman hanya jika tahap mereka meningkat.
  • Apabila menggunakan teknik ini dalam satu sampel biomaterial, beberapa patogen dapat dikesan sekaligus.
  • boleh mengesan jangkitan tersembunyi. Di samping itu, analisis ini membolehkan anda untuk mendiagnosis mikroorganisma patogen yang hidup di dalam sel dan mempunyai variasi antigen yang tinggi.

Sekiranya keputusan ujian positif, maka jejak virus dijumpai dalam biomaterial, maka rangkaian mempunyai jangkitan di dalam badan.

Analisis PCR negatif untuk hepatitis C bermakna tiada jejak jangkitan dalam biomaterial.

Kajian imunologi

Kaedah ini membolehkan anda mengenal pasti antibodi untuk semua jenis virus hepatitis, serta antibodi ke sel hati badan anda sendiri, rupa yang menyumbang kepada pembangunan hepatitis autoimun.

Hasil yang diperolehi semasa kajian adalah berkaitan selama 3 bulan, maka anda harus menderma darah untuk hepatitis C.

Ia juga mungkin untuk melakukan kajian ekspres menggunakan jalur ujian khas. Analisis ini memungkinkan untuk menentukan antibodi kepada virus C dalam komposisi darah dan air liur. Prosedur ini boleh dilakukan secara bebas, di rumah.

Biopsi hati

Untuk melakukan analisis sedemikian, elemen parenchyma hati diambil dan pemeriksaan histologi terhadap biomaterial yang diperoleh dilakukan. Ini membolehkan anda menilai keadaan badan: untuk mengenal pasti keradangan, rahim nekrotik, peringkat fibrosis dan sebagainya.

Hari ini, ujian yang menggantikan analisis histologi parenchyma hepatik digunakan.

Untuk menilai tahap kerosakan hati dan intensiti proses keradangan, biomarker darah vena tertentu digunakan. Menggunakan FibroTest, anda boleh menilai tahap pertumbuhan tisu berserabut.

Apabila melakukan Actitest anda boleh mendapatkan maklumat mengenai intensiti proses patologi dalam parenchyma hati. Menggunakan Steatototesta boleh mendiagnosis tisu lemak hati dan menilai tahap proses ini. Fibromax terdiri daripada semua ujian di atas dan mungkin termasuk beberapa kajian lain.

Persediaan untuk kajian ini

Ujian apa yang diambil untuk hepatitis C dan bagaimana kami mengetahui jenis atau jenis penyelidikan ini. Sama pentingnya untuk mengetahui bagaimana untuk menyediakan analisis.

Untuk mendapatkan hasil yang boleh dipercayai, adalah disyorkan untuk mematuhi keperluan berikut:

  • Ujian hepatitis C mesti diambil pada waktu pagi, dengan perut kosong. Makanan masa lalu harus dimakan sekurang-kurangnya 8 jam sebelum kajian.
  • Bahan biomas boleh dikumpulkan pada waktu siang atau petang. Dalam kes ini, adalah penting bahawa sekurang-kurangnya 5-6 jam lulus antara makanan terakhir dan analisis.
  • sebelum menderma darah untuk hepatitis C, teh, kopi, jus atau minuman lain harus dibuang, hanya air yang dibenarkan.
  • 48 jam sebelum kajian, adalah perlu untuk mengecualikan penggunaan lemak, makanan goreng dan minuman yang mengandungi alkohol.
  • Sekurang-kurangnya sejam sebelum analisis, anda mesti menahan diri dari merokok.
  • analisis tidak boleh dilakukan dengan segera selepas ultrasound, instrumental, pemeriksaan X-ray, urut atau fisioterapi.
  • satu hari sebelum pelaksanaan kajian, diperlukan untuk tidak menggunakan penggunaan ubat dan aktiviti fizikal intensif. Tekanan emosi juga kontraindikasi.
  • Adalah disyorkan untuk menghabiskan 15 minit sebelum melakukan kajian dalam keadaan tenang.

Menjalankan prosedur pengumpulan darah

Di mana untuk mendapatkan ujian untuk hepatitis C? Sampel biomaterial untuk penyelidikan lanjut dijalankan di makmal institusi perubatan atau di rumah pesakit.

Darah dari urat diambil seperti berikut:

  • dengan bantuan tourniquet khas yang dibalut di lengan lengan pesakit, aliran darah vena dihentikan. Terima kasih kepada manipulasi seperti itu, urat darah akan diisi dengan darah dan akan lebih kelihatan, yang akan memudahkan proses memasukkan jarum.
  • kawasan kulit di mana jarum akan dimasukkan dengan berhati-hati dengan alkohol atau alkohol yang mengandungi cecair.
  • Jarum perlahan dimasukkan ke dalam vena, kemudian tiub ujian dilampirkan padanya, yang direka khusus untuk mengumpul darah.
  • Sejurus selepas jarum dimasukkan ke dalam vena, abah yang memerah dikeluarkan dari lengan pesakit.
  • selepas jumlah darah yang diperlukan untuk analisis telah dikumpulkan, jarum perlahan dikeluarkan dari vena.
  • kapas steril atau kain kasa steril yang dibasahkan dengan alkohol mestilah digunakan di tapak suntikan.
  • untuk mencegah terjadinya hematoma, tampon perlu ditekan dengan beberapa usaha menentang kawasan memasukkan jarum, bengkokkan lengan pada sendi siku dan tahan di posisi ini selama beberapa minit. Tindakan sedemikian juga membantu menghentikan darah lebih cepat.

Dengan syarat bahawa teknik pentadbiran dalaman adalah baik, prosedur ini benar-benar selamat dan tidak menyebabkan sensasi yang menyakitkan.

Dalam kes yang jarang berlaku, selepas pengumpulan darah, urat mungkin membengkak. Fenomena ini dipanggil "phlebitis." Memampatkan (tidak panas) akan membantu menyelesaikan masalah ini, ia perlu digunakan pada bahagian bengkak kulit beberapa kali sehari.

Masalah tertentu juga boleh berlaku jika terdapat gangguan pendarahan. Mengambil aspirin, warfarin, dan penipisan darah lain boleh menyebabkan pendarahan. Itulah sebabnya sebelum melakukan analisis itu diperlukan untuk menolak mengambil ubat. Sekiranya rawatan tidak dapat dibatalkan, anda harus memberitahu pakar.

Tarikh dan harga

Berapa banyak yang diuji untuk hepatitis C? Hasil uji darah untuk hepatitis dapat siap dalam beberapa jam, dan dalam beberapa hari (sebagai peraturan, tidak lebih dari 8 hari). Tempoh penyediaan keputusan bergantung kepada jenis virus dan kaedah analisis yang dipilih. Lebih cepat ialah kajian yang dijalankan oleh kaedah PCR. Keputusan dalam kes ini akan siap dalam beberapa jam sahaja.

Berapakah kos ujian hepatitis C? Bergantung kepada klinik dan kerumitan kajian, harga prosedur boleh berubah dari 400 hingga 11,000 rubel.

Anda harus sedar bahawa ia mungkin mengambil masa beberapa minggu untuk membentuk jumlah antibodi yang mencukupi untuk HVC. Oleh itu, pada peringkat awal dalam perkembangan patologi, hasil kajian mungkin palsu-negatif.

Di samping itu, mendapatkan data yang tidak boleh dipercayai adalah mungkin dengan analisis kualiti yang kurang baik dan melanggar syarat-syarat pengangkutan biomaterial yang diperolehi (sampel mesti dihantar ke makmal maksimum 2 jam selepas sampel darah).

Sekiranya hasil kajian adalah positif, anda perlu segera menghubungi doktor penyakit berjangkit. Pakar akan menjalankan pemeriksaan tambahan dan menetapkan rawatan yang sesuai.

Bagaimana untuk pulih dari hepatitis C dengan peluang 97%?

Hari ini, ubat-ubatan moden dari generasi baru Sofosbuvir dan Daclatasvir mungkin menyembuhkan hepatitis C untuk 97-100%. Anda boleh mendapatkan ubat-ubat terbaru di Rusia dari wakil rasmi gergasi farmaseutikal India, Zydus Heptiza. Ubat yang diperintahkan akan dihantar melalui kurier dalam tempoh 4 hari, pembayaran selepas penerimaan. Dapatkan konsultasi percuma mengenai penggunaan ubat-ubatan moden, serta belajar tentang cara memperoleh, anda boleh di laman web rasmi pembekal Zydus di Rusia.


Artikel Sebelumnya

Jaundis dengan hepatitis

Artikel Yang Berkaitan Hepatitis