ELISA untuk hepatitis virus

Share Tweet Pin it

Tinggalkan komen 2,929

Untuk mengesan hepatitis virus dalam badan, ubat meluas menggunakan immunoassay enzim berdasarkan pengesanan kepekatan dan jenis antigen menggunakan antibodi dan enzim. Dijalankan secara berperingkat, melalui kajian makmal, dengan ketepatan petunjuk yang tinggi. Bergantung pada bilangan dan kelas antibodi, warna dan konsentrasi enzim, yang menggunakan ELISA dan, menurut ini, doktor mengesahkan penyakit itu, perubahan.

Apa itu ELISA?

Kehadiran hepatitis virus dalam tubuh pesakit ditentukan menggunakan kaedah serologi analisis darah untuk kehadiran virus HCV dan penanda (badan dan antibodi), menunjuk kepadanya. Enzim imunosorben berkaitan enzim (ELISA) mengkaji pelbagai virus, sebatian berat molekul yang rendah, makromolekul, penunjuk kualitatif dan kuantitatif mereka, menggunakan manifestasi reaksi terhadap antigen mereka. Untuk melakukan ini, gunakan enzim sebagai label untuk pendaftaran isyarat. Ia semakin digunakan dalam bidang perubatan, kerana ELISA jelas mendapati antigen yang jelas, tanpa membingungkannya dengan orang lain, mempunyai kepekaan tinggi terhadap kehadiran pencerobohan dalam hepatitis virus.

Analisis mesti diambil pada perut kosong.

Kelemahan diagnosis seperti itu adalah ketidakupayaan untuk mengenal pasti punca penyakit, kerana kaedahnya hanya menunjukkan tindak balas sistem kekebalan tubuh. Hasil analisa dipengaruhi oleh vaksinasi yang dilakukan sebelumnya. Selama 8 jam sebelum analisis disyorkan untuk menahan diri dari makan, nikotin, alkohol. Asas ujian ELISA adalah tindak balas enzim dan imun tubuh terhadap virus. Molekul biologi mengikat sel dan unsur-unsurnya, mikroorganisma, mengesan virus, kemudian berfungsi enzim yang membolehkan anda untuk menyatakan tindak balas imun dalam parameter yang boleh dilihat dan boleh diukur.

Petunjuk untuk analisis

Hepatitis virus dalam badan boleh menyebabkan kanser dan sirosis hati. Pentingnya diagnosis tepat pada masanya tidak dapat dipertikaikan. Kaedah diagnosis utama adalah ujian ELISA, yang dengan ketepatan yang tinggi menentukan kehadiran virus HCV (IgM dan IgG) dan aktiviti unsur jejaknya. Ujian mandatori untuk lulus hepatitis virus:

  1. Orang yang mempunyai kumpulan risiko (penagih dadah, orang yang mempunyai AIDS, pekerja institusi penguatkuasaan perubatan dan undang-undang).
  2. Orang yang mempunyai hepatitis akut atau kronik.
  3. Mengandung dan merancang wanita kehamilan.

ELISA mengiktiraf penyakit ini di mana-mana peringkat. Keputusan analisis, secara purata, sudah siap dalam 2 hari.

Kriteria yang menentukan kepentingan analisis

Ujian ELISA menentukan kehadiran antibodi kelas IgG, IgM, IgA. Dalam diagnosis hepatitis virus, doktor tidak memberi perhatian kepada jenis mereka, kerana kehadiran mana-mana manifestasi seperti virus HCV telah menunjukkan peringkat akut atau kronik penyakit. Pada peringkat awal penyakit, tahap peningkatan IgM (5 hari selepas jangkitan); pada hari ke 15 - 20, antibodi IgG muncul dan boleh kekal dalam darah manusia untuk masa yang lama walaupun selepas menyembuhkan; IgA - muncul dalam 10-14 hari, menurun selepas rawatan.

Jika IgG dan IgA dikesan selepas penggunaan dadah dan tahap mereka tetap pada kadar yang sama - pembawa mempunyai bentuk hepatitis kronik. Kriteria penting ujian akan menjadi definisi yang jelas mengenai kelas antibodi yang tersedia dan kuantiti mereka. Berdasarkan ini, anda boleh mengetahui bukan sahaja tentang kehadiran penyakit ini, tetapi juga tahap perkembangannya. Pengesanan unsur-unsur sedemikian dalam darah pesakit menjadikannya mungkin untuk menetapkan rawatan yang betul dan tepat pada masanya untuk mengelakkan akibat yang lebih serius.

Bagaimana ia dilakukan?

Alokasikan ujian ELISA langsung dan tidak langsung. Tahap langsung:

  1. Mengumpul bahan biologi dan letakkan di lubang khas.
  2. Dalam masa 15-30 minit antigen dilampirkan ke permukaan telaga.
  3. Menambah antibodi ke telaga kepada antigen yang dijumpai. Semua ditinggalkan selama 1-5 jam.
  4. Keluarkan antigen yang tidak terlabel (menuangkan kandungan telaga).
  5. Bilas telaga dengan penyelesaian khusus.
  6. Tambah penyelesaian enzim ke telaga. Biarkan selama 30 minit - 1 jam.
  7. Penggunaan kolimimetri (pengesanan warna dan kepekatan warna kandungan telaga, perbandingan dengan petunjuk yang berkadar terus dengan kepekatan virus).
Penggunaan untuk diagnosis ELISA tidak langsung akan memberikan hasil yang lebih tepat.

Kaedah ELISA tidak langsung berlaku apabila menggunakan antibodi yang tidak dilabelkan kepada antigen yang dijumpai dan kemudiannya menambahkan label kepada mereka. Pertama, darah diambil dari pesakit dan merebak melalui telaga selama 15-30 minit. (antibodi tetap dengan lubang). Kemudian antibodi tidak dilabel dimasukkan ke dalamnya selama 1-5 jam (sambungan antibodi dengan antigen terbentuk - kompleks imun). Seterusnya microelements tidak dilampirkan dituangkan dari telaga dan dibasuh dengan penyelesaian khusus. Pada peringkat seterusnya, juruteknik makmal menambah unsur jejak berlabel ke dalam telaga selama 15-30 minit. (ini mengikat tidak dilabel dengan label dengan pembentukan kompleks "antibodi-antibodi-antigen"). Ekstra (longgar) dikeluarkan lagi semasa mengalir dan membasuh dengan penyelesaian. Seterusnya ialah enzim yang mengubah warna dalam masa 5-30 minit. tinggal di dalam telaga dan data warna berbanding data penunjuk jadual. ELISA tidak langsung lebih tepat.

Apakah yang ditunjukkan oleh ELISA untuk hepatitis virus?

ELISA membolehkan mengesan kehadiran jangkitan (virus hepatitis semua jenis, HIV, herpes, sifilis, sitomegalovirus, campak, rubella, virus gumps, virus Epstein-Barr), adalah penanda penyakit autoimun, sel-sel kanser. Menunjukkan pencabulan fungsi pembiakan (perubahan testosteron, prolaktin, estradiol dan progesteron), kegagalan kelenjar tiroid, pencerobohan dengan helminth, klamidia. Berkesan untuk mengesan ureaplasmosis, batuk kokol, virus Dange, virus West Nile, Borrelia. Senarai definisi tinggi, termasuk banyak tajuk.

Pengesahan keputusan

Penentuan antigen virus HCV oleh ELISA memberikan ketepatan 98%. Ia juga digunakan untuk menguji semula bahan biologi dengan petunjuk sebelumnya yang kabur. Kehadiran antibodi IgM bukanlah penunjuk untuk hepatitis akut dan memerlukan penyelidikan tambahan. Apabila ujian ELISA diulangi, keputusannya bertepatan dengan 90-100%. Dalam kes percanggahan minimum, nilai purata diambil sebagai penunjuk. Untuk ketepatan maksimum dari segi pakar menasihati secara selari untuk menjalankan analisis biokimia darah. Untuk menguji keputusan selepas immunoassay enzim, anda boleh menggunakan kaedah diagnostik yang lain.

ELISA untuk hepatitis C

EIA hepatitis C menentukan dengan berkesan, ia adalah satu kaedah untuk mendiagnosis penyakit, berdasarkan interaksi antara antigen dan antibodi. Tindak balas imunokimia oleh ELISA (ujian imunosorbent enzim yang berkaitan) membolehkan untuk mengesan antibodi anti-HCV dalam badan. Kaedah ini memungkinkan untuk mendiagnosis hepatitis C secara berbeza pada manusia, menentukan peringkat perkembangan penyakit, meramalkan perjalanannya. Pengenalpastian penanda serologi tertentu juga membolehkan anda memilih rawatan antibodi patologi yang berkesan.

Ciri-ciri kaedah

Analisis untuk pengesanan dalam darah manusia antibodi kepada virus jenis hepatitis C dilakukan dengan melampirkan mikroorganisme asing (antigen) ke molekul immunoglobulin. Enzim enzim dilampirkan memainkan peranan sejenis label. Ia membolehkan anda mengesan tindak balas imunokimia, serta salah satu komponennya.

Sebagai komponen enzyme immunoassay boleh bertindak:

  • antibodi;
  • antibodi dilabel dengan enzim khas;
  • antigen;
  • substrat enzim;
  • pewarna penunjuk.

Apabila mikroorganisma alien berbahaya memasuki tubuh manusia, pasukan perlindungan mula menghasilkan imunoglobulin (antibodi). Seterusnya, mereka bertindak pada antigen dan meneutralkannya. Interaksi ini membawa kepada pembentukan antibodi antigen, yang mempunyai indikator kuantiti dan mutu tersendiri. Mereka menunjukkan kehadiran atau ketiadaan dalam tubuh jangkitan HCV. Sekiranya hasil imunoassay enzim positif, terdapat virus jenis hepatitis C.

Teknologi moden dalam bidang perubatan boleh mengurangkan masa untuk mengesan virus hepatitis, yang berlaku dalam bentuk yang akut. Terima kasih kepada sistem diagnostik generasi ketiga, juga mungkin untuk meningkatkan kekhususan dan kepekaan reaksi imunokimia.

Bahan utama yang dipelajari semasa ELISA adalah darah vena (termasuk darah penderma). Mengikut kesaksian itu dapat menghasilkan sampel cairan cerebrospinal atau cairan amniotik.

Hasil positif dari kaedah ELISA untuk jenis hepatitis C tidak selalu menunjukkan kehadiran jangkitan virus di dalam badan. Dalam lebih daripada 35% kes, antigen virus tidak dikesan dalam darah, yang membawa kepada hasil positif palsu.

Kaedah ini membolehkan anda memantau perubahan kuantitatif dan kualitatif, perbezaan antara bentuk akut hepatitis C. akut dan kronik. Walau bagaimanapun, ia tidak berkesan untuk menentukan aktiviti proses patologi. Untuk lebih tepat mengesahkan kehadiran jangkitan HCV, kaedah diagnosis patologi lain juga harus digunakan.

Petunjuk untuk ELISA

Kaedah mengesan kepekatan khusus dan kuantitatif mikroorganisma asing (antigen) dengan bantuan immunoglobulin dan enzim dijalankan dalam beberapa peringkat. Berdasarkan perubahan warna dan ukuran kuantitatif enzim, doktor dapat mendiagnosis jenis hepatitis C. pada manusia.

Kategori orang berikut adalah lebih mudah terdedah kepada penyakit ini:

  1. Pesakit yang telah menjalani pembedahan, serta penyakit organ dan sistem dalaman.
  2. Orang yang dijangkiti HIV (dijangkiti dengan virus immunodeficiency manusia). Peratusan besar orang dalam kumpulan ini adalah penagih dadah.
  3. Profesional perubatan.
  4. Pegawai penguatkuasa undang-undang.
  5. Wanita hamil.

Hepatitis asal virus sering membawa kepada perkembangan kanser (contohnya, kanser hati). Itulah sebabnya menderma darah untuk immunoassay enzim sepatutnya untuk orang-orang dalam kumpulan risiko utama, dan juga untuk pesakit yang mempunyai hepatitis akut atau kronik.

Sekiranya ditunjukkan, doktor mungkin menetapkan kaedah ELISA untuk pesakit yang didiagnosis dengan:

  • STI (jangkitan seksual);
  • penyakit virus asal (papillomavirus, jangkitan herpes, hepatitis, dan lain-lain);
  • sifat alahan patologi;
  • immunodeficiency;
  • onkologi

Kelebihan dan kekurangan

ELISA hepatitis C boleh dikesan pada peringkat awal, serta dalam bentuk asimtomatik dan anikterik. Sama seperti kaedah diagnostik, ia mempunyai beberapa kelebihan dan kekurangan.

Antara ciri positif ELISA, pakar menunjukkan:

  1. Ketepatan petunjuk kualitatif dan kuantitatif. Kepekaan kaedah ini melebihi kajian lain mengenai pengenalpastian puluhan kali hepatitis.
  2. Pengurangan ketara dalam masa pengesanan jangkitan virus akibat sistem diagnostik moden.
  3. Harga yang rendah berbanding dengan kajian lain mengenai pengenalan hepatitis pada manusia.
  4. Kemungkinan mendiagnosis penyakit hati pada peringkat awal dengan ketiadaan gejala ketara.
  5. Penyelidikan berperingkat menggunakan proses automatik.

Walaupun ketepatan ELISA yang tinggi, lebih daripada 35% kes dengan keputusan positif, pesakit tidak mengesan virus hepatitis. Selalunya ujian tidak mengesahkan patologi, yang menunjukkan hasil yang diragui atau negatif.

Kebolehpercayaan kajian dalam satu darjah atau yang lain mempengaruhi:

  1. Ubat.
  2. Pelanggaran proses metabolik dalam badan.
  3. Kehadiran patologi tertentu sifat kronik yang menyumbang kepada pengeluaran aktif imunoglobulin.

Memandangkan kelemahan keputusan ELISA in vitro, pesakit diberikan penyelidikan tambahan. Untuk pengesanan antibodi yang boleh dipercayai untuk jangkitan virus hepatitis C, PCR (tindak balas rantai polimer) atau RIBA (imunoblotting rekombinan) digunakan.

Apa yang mengenal pasti dan bagaimana kajian dijalankan

Analisis oleh ELISA dapat mengesan pelbagai penyakit pada manusia.

Sebagai tambahan kepada pengesanan semua jenis antibodi hepatitis B, hasil ujian yang positif mungkin menunjukkan kehadiran patologi berikut di dalam badan:

  • virus immunodeficiency manusia;
  • jangkitan herpes;
  • sifilis;
  • STI (ureaplasmosis, klamidia, dan lain-lain);
  • papillomavirus;
  • cytomegalovirus.

Kajian ini juga merupakan jenis penanda untuk mengesan tumor malignan, patologi genetik, gangguan hormon, serta gangguan dalam fungsi sistem endokrin.

Menyediakan untuk penghantaran bahan biologi untuk mengesan virus hepatitis C membayangkan penolakan makanan dan ubat selama 12 jam sebelum kajian. Juga keadaan yang perlu ialah menjauhkan diri daripada penggunaan alkohol, makanan berlemak dan asin.

ELISA langsung

Langkah-langkah utama dalam melakukan ujian langsung adalah seperti berikut:

  1. Pertama, juruteknik makmal mengambil darah dari urat (atau bahan biologi lain), dan kemudian meletakkannya dalam bekas khas.
  2. Mikroorganisma alien (antigen) dalam masa 20 minit mula melekat pada mereka.
  3. Pakar ini menambah imunoglobulin (antibodi) kepada antigen yang ditemui untuk membentuk tindak balas imun. Dalam kes ini, komponen dibiarkan selama beberapa jam.
  4. Antigen yang tidak dilekatkan dikeluarkan dengan menuangkan kandungan dari bekas.
  5. Bahan dibilas dengan larutan, kemudian diproses dengan enzim dan dibiarkan selama satu jam.
  6. Warna dan kepekatan kandungan dianalisis dengan menggunakan colorimetry.

Jika penunjuk kuantitatif kandungan melebihi norma yang dibenarkan, maka ini menunjukkan kehadiran virus hepatitis C dalam tubuh manusia.

ELISA tidak langsung

Mengandungi interaksi immunoglobulin yang tidak dilabel dengan antigen, yang kemudian dilabel antibodi dilampirkan.

Pada mulanya darah pesakit diambil dari vena. Kemudian bahan biologi ditempatkan dalam bekas khas selama kira-kira setengah jam. Dalam kes ini, antibodi dilabel dilekatkan pada dinding bekas. Kemudian tag antibodi ditambah kepada mereka. Hasil daripada interaksi mereka, kompleks imun antibodi antibodi terbentuk.

Selepas 4 jam, kandungan bekas dibuang, dan mikroelemen longgar dikeluarkan. Juruteknik makmal melekatkan antibodi berlabel kepada kompleks yang telah terbentuk, dan tindak balas imun "antibodi-antibodi-antigen" berlaku.

Selepas penyingkiran berulang mikroelemen longgar, enzim khas ditambah ke dalam bekas, mengubah warna dan indikator kuantitatif kandungannya. Berdasarkan hasil yang diperoleh, pakar memeriksa data dan membuat kesimpulan.

Keputusan penyahkodan

Apabila melakukan ELISA, perhatian diberikan kepada kehadiran atau ketiadaan antibodi kelas IgA, IgG dan IgM. Penunjuk kuantitatif antibodi ini dibandingkan dengan data jadual khas.

Menurutnya, penyahkodan keputusan adalah seperti berikut:

  1. Jika ketiga-tiga jenis indikator tidak ditakrifkan, orang itu mempunyai pemulihan lengkap.
  2. Dengan hasil positif yang serentak untuk ketiga-tiga petunjuk ini, terdapat satu bentuk jangkitan virus yang akut.
  3. Sekiranya antibodi kelas IgG ditentukan, manakala kelas-kelas lain tidak dikenal pasti, maka orang itu telah membangunkan imuniti selepas infeksi.
  4. Sifat kronik penyakit ini ditunjukkan oleh petunjuk positif antibodi kelas IgG dan IgA. Walau bagaimanapun, mereka tetap tidak berubah walaupun selepas rawatan perubatan.
  5. Dengan pengesanan positif terhadap ketiga-tiga jenis antibodi, kebarangkalian sifat kronik hepatitis dapat dilihat.

Menurut statistik, tahap IgM mula meningkat beberapa hari selepas jangkitan di dalam tubuh, yang menunjukkan peringkat awal patologi. Antibodi IgG biasanya muncul 2 minggu selepas permulaan penyakit dan kekal dalam darah untuk jangka masa yang lama (walaupun selepas pemulihan). Antibodi IgA dikesan selepas 2 minggu, sementara kepekatan mereka dalam badan berkurangan selepas terapi dadah.

Ingat bahawa hepatitis C ELISA positif tidak selalu menunjukkan adanya jangkitan. Selalunya ujian itu dianggap positif palsu, yang memerlukan pendermaan semula darah. Dalam sesetengah kes, pesakit diberikan kajian tambahan untuk menentukan parameter darah yang lebih tepat.

Kriteria utama untuk ujian adalah pengenal pasti penunjuk kuantitatif dan tipikal. Mereka membenarkan anda menentukan bukan sahaja kehadiran virus, tetapi juga bentuk penyakit. Diagnosis hepatitis C dengan bantuan kaedah moden akan membolehkan anda memulakan terapi dadah tepat pada masanya dan meminimumkan akibat negatif.

Penyelidikan mengenai virus hepatitis C

Antibodi untuk virus hepatitis C (jumlah)

Antibodi virus Hepatitis C biasanya tidak hadir dalam serum
Jumlah antibodi kepada virus hepatitis C adalah antibodi kelas IgM dan IgG, yang diarahkan kepada protein struktur dan bukan struktur kompleks virus hepatitis C.
Kajian ini dilakukan untuk mengesan pesakit dengan VSH. Jumlah antibodi kepada virus hepatitis C dapat dikesan dalam 2 minggu pertama penyakit ini, dan kehadiran mereka menunjukkan kemungkinan jangkitan dengan virus atau jangkitan sebelumnya.

Jawapan yang tegas berdasarkan keputusan ujian ini tidak dapat diperoleh, kerana ujian menentukan total IgM dan IgG antibodi. Jika ini adalah tempoh awal hepatitis C virus akut, maka antibodi IgM menunjukkan ini, dan jika ia adalah tempoh pemulihan atau keadaan selepas HCV, maka antibodi IgG menunjukkan ini.

Antibodi IgG kepada HCV mungkin berterusan dalam darah pemulihan selama 8-10 tahun dengan penurunan secara beransur-ansur dalam kepekatan mereka. Mungkin pengesanan antibodi lewat setahun atau lebih selepas jangkitan. Dalam hepatitis C kronik, jumlah antibodi ditentukan secara berterusan. Oleh itu, untuk menjelaskan masa jangkitan, perlu menentukan antibodi kelas IgM secara berasingan untuk HCV.

Penilaian hasil penyelidikan

Hasil kajian ini dinyatakan secara kualitatif - positif atau negatif. Hasil negatif menunjukkan ketiadaan jumlah antibodi (JgM dan JgG) kepada HCV dalam serum. Hasil positif - pengesanan jumlah antibodi (JgM dan JgG) kepada HCV menunjukkan tahap awal hepatitis C virus akut, tempoh jangkitan akut, peringkat awal penyembuhan, hepatitis C virus atau hepatitis C. Virus kronik

Walau bagaimanapun, pengesanan jumlah antibodi kepada HCV tidak mencukupi untuk membuat diagnosis HCV dan memerlukan pengesahan untuk menolak hasil positif palsu kajian. Oleh itu, apabila ujian pemeriksaan positif untuk jumlah antibodi kepada HCV diperolehi, ujian pengesahan dilakukan di makmal. Hasil akhir penentuan jumlah antibodi kepada HCV dikeluarkan bersama dengan hasil ujian pengesahan.

Antibodi untuk virus hepatitis C JgM

Antibodi untuk virus hepatitis C JgM dalam serum biasanya tidak hadir. Kehadiran antibodi kelas JgM kepada HCV dalam darah pesakit membolehkan mengesahkan jangkitan aktif. Antibodi kelas JgM boleh dikesan bukan sahaja dalam HCV akut, tetapi juga dalam hepatitis C. Kronik

Antibodi kelas JgM untuk HCV muncul dalam darah pesakit 2 minggu selepas perkembangan gambaran klinikal hepatitis C virus akut atau peningkatan hepatitis kronik dan biasanya hilang selepas 4-6 bulan. Pengurangan tahap mereka mungkin menunjukkan keberkesanan terapi dadah.

Penilaian hasil penyelidikan

Hasil kajian ini dinyatakan secara kualitatif - positif atau negatif. Hasil negatif menunjukkan ketiadaan antibodi JgM kepada HCV dalam serum. Hasil positif - pengesanan antibodi JgM ke HCV menunjukkan tahap awal hepatitis C virus akut, tempoh jangkitan akut, peringkat awal penyembuhan, atau hepatitis C. virus kronik aktif

Pengesanan virus hepatitis C oleh PCR (secara kualitatif)

Virus Hepatitis C dalam darah biasanya tidak wujud.
Tidak seperti kaedah serologi untuk mendiagnosis HCV, di mana antibodi untuk HCV dikesan, PCR memungkinkan untuk mengesan kehadiran RNA HCV langsung dalam darah, baik secara kualitatif dan kuantitatif. Serpihan yang ditetapkan di kedua-dua berfungsi sebagai kawasan konservatif genom hepatitis C.

Pengesanan hanya antibodi kepada HCV hanya mengesahkan fakta jangkitan pesakit, tetapi tidak membenarkan hakim mengenai aktiviti proses menular (mengenai replikasi virus), mengenai prognosis penyakit. Di samping itu, antibodi kepada virus HS didapati dalam darah pesakit dengan hepatitis akut dan kronik, dan di kalangan pesakit yang sakit dan pulih, dan selalunya antibodi dalam darah muncul hanya beberapa bulan selepas bermulanya gambaran klinikal penyakit, yang menjadikan diagnosis sukar. Pengesanan virus dalam darah dengan kaedah PCR adalah kaedah diagnostik yang lebih bermaklumat.

Pengesanan tinggi HCV oleh PCR dalam darah menunjukkan viremia, membolehkan anda menilai pembiakan virus di dalam badan dan merupakan salah satu kriteria untuk keberkesanan terapi antiviral.

Kepekaan analisis kaedah PCR adalah sekurang-kurangnya 50-100 zarah virus dalam 5 μl, yang melepasi pengasingan sampel DNA, kekhususan - 98%. Pengesanan RNA virus Hepatitis C menggunakan PCR pada peringkat awal jangkitan virus (mungkin dalam masa 1-2 minggu selepas jangkitan) terhadap latar belakang ketidakhadiran lengkap mana-mana penanda serologis boleh menjadi bukti jangkitan paling awal.

Walau bagaimanapun, pengesanan terasing RNA virus Hepatitis C terhadap ketiadaan lengkap mana-mana penanda serologis lain tidak boleh menyisihkan sepenuhnya keputusan PCR positif palsu. Dalam kes sedemikian, penilaian komprehensif kajian klinikal, biokimia, dan morfologi dan mengulangi pengesahan berulang mengenai kehadiran jangkitan PCR diperlukan.

Menurut cadangan WHO, untuk mengesahkan diagnosis hepatitis C virus, adalah perlu untuk mengesan RNA virus hepatitis C dalam darah pesakit sebanyak tiga kali.

Pengesanan RNA virus Hepatitis C oleh PCR digunakan untuk:

  • penyelesaian keputusan ujian serologi yang dipersoalkan;
  • pembezaan hepatitis C dari bentuk lain hepatitis;
  • pengesanan tahap akut penyakit berbanding dengan jangkitan atau hubungan sebelumnya; menentukan peringkat jangkitan bayi yang baru lahir dari ibu-ibu yang seropositive untuk virus hepatitis C;
  • mengawal keberkesanan rawatan antiviral.
  • Pengesanan virus hepatitis C oleh PCR (kuantitatif)

    Kaedah kuantitatif untuk menentukan kandungan RNA virus hepatitis C dalam darah memberikan maklumat penting mengenai intensiti perkembangan penyakit, mengenai keberkesanan rawatan dan perkembangan rintangan terhadap ubat antivirus. Kepekaan analitik kaedah ini adalah dari 5.102 salinan / ml zarah virus dalam serum, kekhususan - 98%.

    Tahap viremia dianggarkan seperti berikut: apabila kandungan RNA HCV adalah dari 10 ^ 2 hingga 10 ^ 4 salinan / ml, ia adalah rendah; dari 10 ^ 5 hingga 10 ^ 7 salinan / ml - sederhana dan melebihi 10 ^ 8 salinan / ml - tinggi.

    Penentuan kuantitatif kandungan RNA HCV dalam serum oleh PCR adalah penting untuk meramalkan keberkesanan rawatan dengan interferon-alpha. Telah ditunjukkan bahawa prognosis yang paling menguntungkan penyakit dan kebarangkalian tertinggi respon positif terhadap terapi antiviral adalah mereka yang mempunyai tahap viremia yang rendah. Dengan rawatan yang berkesan, tahap viremia dikurangkan.

    Genotyping Virus Hepatitis C - Definisi genotip

    Kaedah PCR bukan sahaja dapat mengesan RNA HCV dalam darah, tetapi juga untuk menentukan genotipnya. Yang paling penting untuk amalan klinikal adalah 5 subtipe HCV - 1a, 1b, 2a, 2b dan 3a. Di negara kita, subtipe 1b yang paling biasa, diikuti oleh 3a, 1a, 2a.

    Menentukan genotip (subtipe) virus adalah penting untuk meramalkan kursus HCV dan memilih pesakit dengan HCV kronik untuk rawatan dengan interferon-alpha dan ribavirin.

    Apabila pesakit menjadi dijangkiti dengan subtipe 1b, HCV kronik berkembang dalam kira-kira 90% kes, dan di hadapan subtipe 2a dan 3a, ia berkembang dalam 33-50%. Pada pesakit dengan subtipe 1b, penyakit ini lebih teruk dan sering berakhir dengan perkembangan sirosis hati dan karsinoma hepatoselular. Apabila dijangkiti dengan subtipe 3a, pesakit mempunyai steatosis yang lebih ketara, kerosakan saluran empedu, aktiviti ALT, dan perubahan berserat dalam hati kurang ketara daripada pesakit dengan subtipe 1b.

    Petunjuk untuk rawatan interferon-alfa HCV kronik adalah:

  • peningkatan tahap transaminase;
  • kehadiran RNA HCV dalam darah;
  • Genotip HCV 1;
  • paras darah tinggi dalam darah;
  • perubahan histologi di hati: fibrosis, keradangan sederhana atau teruk.
  • Dalam rawatan interferon-alpha pada pesakit dengan hepatitis C virus dengan subtipe 1b, keberkesanan terapi diperhatikan secara purata dalam 18% kes, pada mereka yang dijangkiti dengan subtipe lain - dalam 55%. Penggunaan regimen gabungan (interferon-alpha + ribavirin) meningkatkan keberkesanan terapi. Satu tindak balas yang mampan diperhatikan dalam 28% pesakit dengan subtipe 1b dan di 66% dengan subtipe HCV yang lain.

    Kaedah ELISA untuk mengesan hepatitis

    Perubatan moden terkenal dengan banyak penyakit hati. HCV (virus hepatitis C) adalah salah satu yang paling biasa dan berbahaya kerana jangkitan ini sering berkembang secara asymptomatically dan membawa kepada komplikasi kritikal, walaupun kematian. Itulah sebabnya diagnosis tepat pada masanya penyakit adalah sangat penting, yang dilakukan dengan menggunakan pelbagai kaedah, termasuk ujian imunosorben berkaitan enzim (ELISA) untuk mengesan antibodi kepada virus dalam darah.

    Penyataan jangkitan HCV untuk diagnosis hepatitis

    Di dalam diagnostik makmal untuk mengesan hepatitis C (jangkitan HCV), dua jenis kaedah digunakan:

    1. Serologi, berdasarkan pengesanan antibodi kepada virus hepatitis C (anti-HCV), juga dikenali sebagai ELISA (assay imunosorben enzim yang berkaitan enzim). Ia bertujuan untuk mengesan anti-HCV (penanda IgM dan IgG) yang digunakan untuk pemeriksaan dan diagnosis hepatitis C. Kedua-dua penanda ini boleh dikesan dalam darah (plasma) dalam kombinasi yang berbeza, yang memerlukan tafsiran klinikal yang betul. Untuk mengesahkan kehadiran anti-HCV, ujian RIBA (rekombinan imunoblot) dilakukan.
    2. Biologi molekul, yang bertujuan untuk mengesan virus RNA. Ujian RNA HCV ditetapkan untuk kategori pesakit berikut:
      • dengan anti-HCV yang dikenalpasti;
      • tanpa mengesan anti-HCV, tetapi dengan data epidemiologi dan klinikal yang ditubuhkan yang memerlukan pengecualian bentuk akut HCV.

    RNA virus dapat dikesan dalam darah sudah 14 hari selepas jangkitan, iaitu, sebelum penampilan anti-HCV, yang terjadi selama 2-3 bulan pertama.

    Untuk pengesahan akhir diagnosis (terutama apabila hanya satu daripada dua penanda jangkitan HCV yang dikesan), pakar menyarankan bahawa, selepas masa tertentu, ujian berulang terhadap anti-HCV dan RNA HCV perlu dilakukan.

    Pengesanan hepatitis oleh ELISA

    Untuk pelaksanaan diagnosis awal hepatitis virus, terutamanya asimtomatik, bentuk anikterik, dalam serum mengesan kehadiran protein virus (antigen) atau antibodi kepada mereka (yang dihasilkan oleh sistem imun apabila virus memasuki tubuh) melalui ujian imunosorben yang berkaitan dengan enzim (ELISA). Ini adalah kaedah universal diagnosis imunologi, intinya terletak pada kajian interaksi "antigen-antibodi". Digunakan secara meluas di banyak negara di seluruh dunia.

    Penentuan hepatitis oleh ELISA membolehkan bukan sahaja menubuhkan diagnosis yang tepat, tetapi juga untuk menilai jenis penyakit, serta memilih rawatan yang cekap dan berkesan menggunakan ubat-ubatan tradisional (interferon, ribavirin), ubat tindakan langsung (Sofosbuvir, Daclatasvir) dan generik pengeluaran India dan Cina.

    Jika boleh, diagnosis hepatitis virus oleh ELISA ditambah oleh PCR (tindak balas rantai polymerase), yang membolehkan untuk menentukan kehadiran virus hepatitis dalam RNA.

    Betapa tepatnya kaedah enzim immunoassay

    Menurut anggaran pakar, ketepatan kaedah ELISA adalah 95%, iaitu 95 dari 100 pesakit menggunakan immunoassay enzim, kehadiran dan jumlah antibodi HCV - IgM dan IgG dapat dikesan dalam darah. Jika hasilnya positif, adalah mungkin untuk mendiagnosis hubungan HCV dengan badan (bukan virus itu sendiri, iaitu kehadiran antibodi dalam darah itu, yang mungkin disebabkan oleh penyakit yang sudah dipindahkan).

    Walau bagaimanapun, walaupun sensitiviti tinggi terhadap enzim imunosorben berkaitan (ELISA), dalam 40% pesakit yang mempunyai kesan positif, virus itu tidak dapat dikesan, menunjukkan hasil yang meragukan atau palsu.

    Untuk mengesahkan ketepatan keputusan ELISA, kaedah RIBA (imunoblotting rekombinan) digunakan untuk mengkaji dengan lebih tepat pengesanan antibodi kepada HCV.

    Ujian teras Anti NCV

    Kajian berkesan untuk menentukan kehadiran antibodi kepada virus hepatitis termasuk teras anti-HCV, yang digunakan sebagai ujian pengesahan apabila keputusan "tidak menentu" diperolehi.

    Jika teras anti-HCV dikesan dalam serum pada pengenceran 1: 1000, hasil positif mungkin didiagnosis, iaitu, penyakit itu hadir.

    Jika sampel pada pengenceran 1: 1000 adalah negatif, pada pengenceran 1: 200 adalah positif, penyelidikan diperlukan untuk kehadiran RNA virus. Dalam kes ini, kemungkinan besar, tidak ada jangkitan HCV.

    Adalah penting untuk memahami bahawa dalam bentuk kronik HCV, antibodi sentiasa dikesan, dan semasa penghapusan (penyingkiran dari sel-sel badan) virus itu berterusan selama 4-8 tahun atau lebih. Oleh itu, kehadiran anti-HCV tidak selalu menunjukkan jangkitan badan dan tidak membenarkan membuat kesimpulan yang objektif mengenai aktiviti proses. Untuk mendapatkan data yang tepat mengenai beban virus, tahap kerosakan hati, tempoh jangkitan dan perbezaan antara bentuk akut dan kronik penyakit, disyorkan untuk menggunakan definisi spektrum antibodi kepada HCV yang berbeza peptida. Ia juga penting untuk melihat dinamik kuantitatif dan kualitatif mereka.

    Penyelidikan mengenai hepatitis virus dengan kaedah ife

    ELISA dalam diagnosis hepatitis virus. Keupayaan immunoassay enzim

    Diagnostik makmal spesifik hepatitis virus adalah berdasarkan kepada kaedah penyelidikan biologi imunokimia dan molekul. Kaedah imunokimia utama adalah radioisotop atau radioimun (RIA) dan immunoassay (ELISA). Kaedah diagnostik imunokimia adalah berdasarkan interaksi tertentu antigen - antibodi dengan pengenalan selanjutnya kompleks dengan bantuan label khusus. Enzim immunoassay yang paling biasa.

    Laporan pertama tentang penggunaan enzim immunoassay. sebagai kaedah untuk menentukan sebarang bahan diterbitkan pada tahun 1971 secara bersamaan oleh dua kumpulan penyelidikan - B. Van Weemen, A. Schuurs dan E. Engvall, P. Perlmann. Enzim immunoassay berdasarkan prinsip berikut: pada fasa pepejal, yang terutamanya menggunakan permukaan telaga tablet polistirena, antigen agen atau antibodi berjangkit (selalunya campuran antibodi) kepada antigen untuk dikesan adalah tetap. Antigen atau antibodi ini, yang ditetapkan pada fasa pepejal, dipanggil immunosorbent.

    Hasil daripada inkubasi imunosorben dan serum ujian dengan kehadiran agen yang dapat dikesan, mereka terikat kepada kompleks antigen - antibodi. Selepas prosedur membasuh, di mana antigen dan antibodi yang tidak terhingga dikeluarkan, inkubasi dengan konjugasi dilakukan. Sebagai konjugasi dalam mengesan HBsAg, anti-HBs digunakan, dalam pengesanan antibodi kepada virus hepatitis C, antibodi kepada immunoglobulins manusia (antivirus conjugate) yang dilabelkan dengan peroxidase kuda. Akibat inkubasi ini, lampiran kepada kompleks antigen yang sudah ada berlaku - antibodi konjugat yang diperkenalkan tambahan. Selepas penyingkiran konjugasi yang tidak terikat (mencuci), substrat dimasukkan ke dalam telaga. Apabila menggunakan konjugasi peroxidase, hidrogen peroksida digunakan sebagai substrat dalam kombinasi dengan penunjuk, yang paling sering digunakan sebagai orthophenylene diamine (OPD) atau tetramethylbenzidine (TMB). Hasilnya dianggarkan secara fotometrik.

    Kualiti dan kebolehpercayaan keupayaan analisis kaedah immunoassay enzim disifatkan oleh beberapa kriteria, yang merangkumi kepekaan, kekhususan, ketepatan dan kebolehulangan.

    Kepekaan adalah jumlah minimum bahan yang dapat dikesan menggunakan immunoassay enzim. Dalam kes ini, batasan bawah kepekaan kaedah ini adalah kepekatan bahan uji dalam sampel, yang sepadan dengan hasil positif terkecil penentuan, yang secara statistiknya berbeza dengan indikator sampel negatif yang sengaja. Kepekaan sesuatu IFTS bergantung kepada beberapa keadaan yang berkaitan dengan reka bentuk sistem ujian (persamaan imunosorben, kualiti sistem pengekstrakan dan penyangga), dan penyelesaian dan ketepatan kaedah pendaftaran.

    Spesifik - keupayaan untuk mengenal pasti tepat komponen untuk penentuan yang mana immunoassay enzim ini direka. Kekhususan ELISA ditentukan oleh tindak balas silang antibodi atau antigen (iaitu komposisi yang digunakan sebagai immunosorbent) dengan sebatian yang berkait rapat, serta komposisi medium inkubasi (kesan matriks).

    Ketepatan - korespondensi nilai purata hasil penentuan berulang sampel kawalan yang sama dengan nilai sebenar parameter yang diukur. Ketepatan penentuan dalam ELISA bergantung kepada kualiti sistem ujian dan sampel kawalan. Untuk sistem ujian ELISA yang baik, penunjuk ketepatan berada dalam lingkungan 90-110%. Ciri penyelidikan bioperubatan dalam ELISA adalah tidak mustahil untuk menetapkan nilai yang tepat, dan oleh itu purata beberapa makmal pakar diambil sebagai nilai sebenar. Kriteria statistik untuk ketepatan adalah rata-rata aritmetik dan tahap penyelewengannya dari nilai sebenar, dinyatakan sebagai peratusan.

    Reproduktif - keupayaan sistem ujian untuk menunjukkan nilai yang sama dengan kajian berulang dari sampel yang sama. Reproducibility tersebut bergantung kepada ralat rawak (kesalahan) semasa prosedur menetapkan reaksi, dan pada sistem pengujian mutu dan ketepatan metode pencatatan hasil. Adalah dipercayai bahawa reproduktibiliti sampel kawalan yang sama dari syarikat yang sama di makmal yang berbeza tidak boleh melebihi nilai pekali variasi sebanyak 15%.

    Terdapat beberapa rejimen ELISA yang spesifik untuk penentuan penanda hepatitis virus: a) immunoassay enzim langsung; b) immunoassay enzim tidak langsung; c) perencatan kompetitif; c) kaedah "perangkap", atau "menangkap".

    Kaedah biologi molekul untuk diagnosis hepatitis virus, tindak balas rantaian polimerase dan hibridasi lebih kerap digunakan. Kaedah ini, terutama PCR, memungkinkan untuk mengesan sejumlah kecil DNA virus atau RNA tertentu dan, dengan itu, menghukum replikasi, dan dalam sesetengah kes, aktiviti replikasi.

    Ujian darah untuk hepatitis C

    Hepatitis C adalah salah satu daripada penyakit hati yang paling biasa yang berlaku apabila dijangkiti dengan virus hepatitis C (HCV), yang memasuki tubuh terutamanya ketika bersentuhan dengan darah orang yang dijangkiti. Hepatitis C kronik dan akut yang dihadapi Di 70-80 peratus pesakit dengan hepatitis C akut, tiada gejala penyakit, hanya dalam sesetengah kes, selepas beberapa jangkamasa selepas jangkitan, ada manifestasi penyakit, yang dinyatakan dalam keletihan, sakit perut, kehilangan selera makan, kegelapan air kencing, muntah-muntah, loya, najis ringan, jaundis, sakit di sendi. Sebagai peraturan, gejala berlaku 6-7 minggu selepas jangkitan, tetapi tempoh permulaan tanda-tanda penyakit berbeza dari 2 minggu hingga enam bulan. Sekiranya gejala di atas berlaku, anda perlu berunding dengan doktor penyakit berjangkit dan menjalani ujian darah untuk hepatitis C. Diagnosis hepatitis yang dilakukan pada masa yang tepat dapat mengesan penyakit itu pada peringkat awal dan meningkatkan kemungkinan pemulihan.

    Apabila ujian hepatitis C dijadualkan

    Situasi apabila ujian Hepatitis C diperlukan:

    • semasa kehamilan dan perancangan keluarga;
    • pesakit dengan gejala hepatitis kronik atau akut;
    • orang itu berisiko. Ini adalah pekerja perubatan, orang dalam penjara, pegawai penguatkuasa undang-undang, orang yang menggunakan dadah, mempunyai banyak pasangan seksual, menderita AIDS, berada di hemodialisis, dan lain-lain.

    Persediaan untuk Analisis Hepatitis C

    Persediaan khusus untuk analisis hepatitis C tidak diperlukan. Untuk analisis, darah diambil dari urat pada perut kosong, pada masa yang sama, sekurang-kurangnya lapan jam harus lulus selepas makan terakhir.

    Pemeriksaan hepatitis C ELISA

    Analisis pertama, biasanya ditetapkan untuk diagnosis ujian hepatitis C - ELISA (assay imunosorben enzim yang berkaitan). Pemeriksaan hepatitis C ELISA boleh mengesan kehadiran antibodi kepada virus hepatitis C (anti-HCVAb) dalam darah. Sekiranya keputusan ujian ELISA adalah positif, maka ia menunjukkan adanya hubungan badan dengan virus hepatitis C. Tetapi 40% orang yang mempunyai ELISA positif tidak mengesan virus dalam darah mereka. Fenomena ini dinamakan hasil positif palsu. Juga, dengan bantuan ELISA, darah penderma diperiksa.

    RIBA untuk Hepatitis C

    Ujian RIBA untuk hepatitis C digunakan untuk mengesahkan keputusan ELISA yang positif. Kaedah imunoblotting rekombinan (RIBA) adalah kajian yang lebih tepat tentang kehadiran antibodi terhadap virus hepatitis C. Kehadiran virus hepatitis C dalam badan juga tidak menentukan hasil yang positif, tetapi hanya mengesahkan kehadiran antibodi.

    Ujian hepatitis C PCR

    Untuk mengesan kehadiran virus hepatitis C dalam darah (RNA HCV) dan membuat diagnosis, mereka paling sering menggunakan analisis dengan kaedah reaksi rantai polimerase (PCR). Kajian ini memungkinkan untuk mengesan dengan ketepatan yang tinggi kehadiran dalam darah walaupun sedikit virus. Analisis PCR untuk hepatitis C boleh mendedahkan kehadiran virus yang sudah 5 hari selepas jangkitan, jauh sebelum penampilan antibodi. Apabila hasil analisis PCR adalah positif, itu bermakna adanya jangkitan aktif.

    Terdapat variasi analisis PCR:

    • PCR kuantitatif, yang membolehkan untuk menentukan bukan sahaja fakta kehadiran virus, tetapi juga virus (jumlah virus). Penunjuk ini sangat penting untuk menentukan keberkesanan rawatan;
    • genotip, menubuhkan genotip virus hepatitis C, yang penting untuk menentukan tempoh dan taktik rawatan. Terdapat lebih daripada 10 genotip virus hepatitis C, tetapi untuk amalan klinikal, cukup untuk menentukan lima jenis yang paling biasa: 1a, 1b, 2,3a / 3b.

    Analisis kuantitatif PCR dilakukan:

    • dengan ujian positif kualitatif untuk kehadiran virus RNA hepatitis C dalam serum;
    • untuk penilaian yang tepat mengenai keberkesanan rawatan;
    • untuk menentukan taktik rawatan pesakit.

    Tidak ada hubungan langsung antara keterukan hepatitis C dan jumlah virus dalam darah. Kepekatan virus menjejaskan infectivity penyakit, iaitu semakin besar jumlah virus dalam darah pesakit, semakin besar risiko penularan virus, misalnya, melalui hubungan seksual atau dari ibu ke anak. Juga, keberkesanan rawatan bergantung kepada kepekatan virus. Semasa terapi, faktor yang menguntungkan adalah beban virus yang rendah, dan yang sangat tinggi tidak menguntungkan.

    Analisis genotyping dilakukan:

    • dengan ujian positif kualitatif untuk kehadiran virus RNA hepatitis C dalam serum;
    • untuk penilaian yang tepat mengenai keberkesanan rawatan;
    • untuk menentukan taktik rawatan pesakit;
    • untuk meramalkan kronisasi proses berjangkit;
    • untuk menentukan perkembangan penyakit.

    Pengesanan genotip virus adalah sangat penting untuk menentukan tempoh rawatan, yang penting, kerana interferon mempunyai pelbagai kesan sampingan dan toleransi pesakit yang rendah.

    Analisis penyahkodan untuk hepatitis C

    Biasanya, RNA virus, antibodi kepada mereka dan antigen tidak hadir sepenuhnya. Kehadiran antibodi dalam darah menunjukkan kehadiran hepatitis C kronik atau akut atau tempoh pemulihan. Jika RNA HCV hadir dalam darah, yang ditentukan oleh analisis PCR, ini menunjukkan kehadiran virus dalam darah.

    Dengan teknik ujian yang salah, pengangkutan dan keabnormalan darah, analisis PCR kadangkala menunjukkan hasil positif palsu. Analisis ELISA dan RIBA pada peringkat awal penyakit, apabila badan belum menghasilkan jumlah antibodi yang mencukupi, mungkin menunjukkan hasil negatif palsu.

    Jika semasa penyahkodan ujian untuk keputusan positif hepatitis C diperoleh, adalah perlu untuk menghubungi pakar penyakit berjangkit dan pakar gastroenterologi untuk mendapatkan diagnosis dan rawatan lanjut.

    Neutrophil segmen diturunkan

    Platelet kanak-kanak adalah normal, dinaikkan, diturunkan

    TGT hormon yang merangsang tiroid

    Diagnosis Hepatitis

    Orang tidak boleh menentukan kehadiran hepatitis di dalam badan dengan serta-merta, kerana tempoh pengeraman penyakit ini boleh bertahan hingga empat minggu. Apabila tanda-tanda pertama timbul, perubahan radikal dalam komposisi darah berlaku di organisma yang terkena: analisis biokimia melaporkan masalah kesihatan yang serius dan kehadiran virus patogenik. Walau bagaimanapun, tidak cukup untuk menderma darah untuk hepatitis untuk membuat diagnosis akhir, diagnosis terperinci hepatitis juga diperlukan.

    Diagnosis makmal hepatitis

    Adalah wajar untuk menjalankannya selepas tamat tempoh inkubasi, supaya doktor dengan ketepatan yang paling boleh menentukan penyakit hati yang ada di dalam badan. Jika tidak, rawatan yang ditetapkan tidak akan memberikan kesan terapeutik yang diingini dan bahkan memburukkan lagi gambaran klinikal yang berlaku.

    Diagnosis Hepatitis A

    Lazimnya, diagnosis hepatitis A bermula dengan persoalan terperinci mengenai pesakit dan pelantikan sejumlah ujian yang harus dilakukan secepat mungkin. Ini adalah:

    • ujian darah biokimia;
    • jumlah darah yang lengkap;
    • Kaedah PCR;
    • ELISA;
    • coagulogram.

    Jika penyakit Botkin berlangsung, maka lompat bilirubin, AlAT dan Asat yang tidak normal, sampel thymol diperhatikan mengikut hasil analisis darah biokimia. Lebih-lebih lagi, IgM anti-HAV spesifik dihasilkan, yang merupakan fakta yang tidak dapat disangkal tentang kehadiran hepatitis A.
    Secara umumnya, analisis darah ditentukan oleh penurunan leukosit, lompat dalam ESR dan limfositosis. Dan, bagaimanapun, kaedah yang paling boleh dipercayai ialah PCR, yang menentukan penunjuk RNA virus patogen.
    Di samping itu, doktor mengkaji gejala-gejala penyakit itu, dan selepas itu ia boleh membuat diagnosis akhir dan menjalani terapi yang paling berkesan. Keperluan pemeriksaan instrumental sangat jarang berlaku. Selepas rawatan konservatif yang berjaya dalam keadaan kemasukan ke hospital dan kuarantin pesakit, pemulihan akhir menanti, dan hepatitis A semula tidak berulang.

    Diagnosis Hepatitis B

    Untuk menentukan kehadiran virus hepatitis B juga mungkin mengikut keputusan ujian makmal, dan untuk ini hal pertama diperlukan untuk menderma darah untuk hepatitis. Secara semula jadi, virus patogen mempunyai tiga antigen utama - HBsAg, HBcAg dan HBeAg, yang mana antibodi dihasilkan dalam tubuh. Ciri utama gambar klinikal ini ialah ELISA - ELISA, yang hanya menunjukkan penanda spesifik hepatitis B.
    Segera ia harus dijelaskan bahawa antigen HBsAg muncul dalam darah walaupun sebelum gejala pertama hepatitis dan boleh ditentukan dengan pasti dalam tempoh yang lebih lama. Walau bagaimanapun, ujian negatif tidak mengecualikan kehadiran hepatitis B, dan dengan itu memerlukan penggunaan kaedah reaksi rantai polimerase (PCR) yang sama.
    Jika anda mengesyaki bahawa hepatitis B adalah wajib, ujian darah biokimia disyorkan, yang disyorkan untuk diluluskan di tempat pertama. Melakukan biopsi hati dan ultrasound organ-organ peritoneal dibincangkan secara individu, tetapi apabila sejarah penyakit itu jelas, tidak perlu kaedah pemeriksaan klinikal.

    Echogram hati dalam hepatitis autoimun di peringkat hepatitis kronik

    Diagnosis Hepatitis C

    Untuk membuat diagnosis ini tidak cukup untuk menderma darah untuk hepatitis, kerana virus itu mungkin mendominasi dalam tubuh dalam bentuk laten. Dan, bagaimanapun, ujian makmal utama adalah semua ujian yang dibentangkan di atas, serta prestasi tambahan biopsi hati. Pemeriksaan mikroskopik bahan biologi (dalam kes kita, sekeping tisu hati) menentukan sejauh mana proses patologi dan fibrosis tisu. Pensampelan bahan dilakukan di bawah anestetik tempatan, komplikasi prosedur sedemikian amat jarang berlaku dalam amalan perubatan.
    Sekiranya hepatitis C disyaki, kaedah utama pemeriksaan klinikal adalah ultrasound organ-organ peritoneal. Alasannya adalah mudah: penyakit ini sering ditunjukkan oleh perubahan visual dalam hati yang terjejas, perubahan struktur dan saiznya. Dengan cara ini, anda boleh menentukan:

    • saiz hati, limpa, pankreas dan pundi hempedu;
    • perubahan patologi dalam organ-organ ini;
    • aliran darah umum di organ peritoneal;
    • kawasan yang optimum untuk melakukan biopsi hati.

    Kaedah pemeriksaan klinikal ini menentukan semua pathologi fokus organ di peringkat mikroskopik. Jika hati diwakili pada skrin dalam skala kelabu, biopsi segera diperlukan, kerana warna kelabu menggambarkan tisu-tisu yang terkena "penapis manusia".

    Pencegahan hepatitis

    Oleh kerana penyakit itu tidak nyata dengan segera, ia jauh dari semua gambar klinikal yang meneruskan rawatan segera. Pesakit mungkin tidak menyedari kewujudan virus patogen dalam tubuh, yang seterusnya, dengan cepat merebak ke aliran darah dan menjangkiti sel-sel hati yang sihat.
    Untuk mengelakkan nasib tragis, disyorkan untuk mematuhi semua langkah pencegahan. Kewaspadaan sedemikian akan mengurangkan risiko morbiditi dan menyelamatkan anda daripada masalah kesihatan yang serius pada masa akan datang. Peraturan dasar untuk pencegahan disenaraikan di bawah:

    • basuh tangan anda selepas jalan;
    • untuk tertakluk kepada pemprosesan sayur-sayuran dan buah-buahan segar yang bermutu tinggi;
    • menjalankan semua vaksin pencegahan yang dinyatakan dalam jadual tahunan;
    • sikap selektif kepada pasangan seksual;
    • elakkan bersentuhan dengan orang yang sakit;
    • gunakan hanya jarum suntikan sekali pakai dan terutama berhati-hati di stesen pemindahan darah.

    Ia juga disyorkan secara berkala (sekali setiap enam bulan) untuk menderma darah untuk hepatitis, untuk memastikan bahawa virus itu tidak menembusi ke dalam badan, dan tidak menjangkiti sel-sel hati yang pernah sihat. Sekiranya diagnosis ditentukan, perlu segera menjadi akaun dispensari dan ikuti semua cadangan pakar.

    Penerbit penerbitan:
    Syropyatov Sergey Nikolaevich
    Pendidikan: Universiti Perubatan Negeri Rostov (Universiti Perubatan Negeri Rostov), ​​Jabatan Gastroenterologi dan Endoskopi.
    Ahli gastroenterologi
    Doktor Sains Perubatan

    Analisis penyahkodan untuk hepatitis C

    Apa yang perlu diuji untuk ini? Apakah norma mereka? Dan doktor apa yang akan diuraikan dan membuat diagnosis yang tepat?

    Syarat Penyerahan

    Ujian mandatori untuk hepatitis C adalah norma untuk:

    1. Wanita dalam tempoh perancangan dan kehamilan;
    2. Pesakit dengan gejala hepatitis kronik atau akut;
    3. Orang yang berisiko, termasuk:
      • profesional perubatan;
      • pegawai penguatkuasa undang-undang;
      • penagih;
      • Pesakit AIDS.

    Analisis dan penyediaan untuk mereka

    Persediaan khusus untuk ujian untuk hepatitis C tidak diperlukan. Pensambilan darah dibuat pada perut kosong dari urat sekurang-kurangnya 10 jam selepas makan.

    Norma yang mengawal selia masa kajian, tidak lebih dari 2 hari.

    Pemeriksaan hepatitis C ELISA

    Pada mulanya ditetapkan untuk diagnosis penyakit, analisisnya adalah ujian ELISA, atau immunoassay enzim, yang dapat mengesan kehadiran dan jumlah antibodi spesifik Anti-HCV dalam darah dalam 95% kes. Antibodi ini adalah 2 jenis - IgM dan IgG. Sekiranya hasilnya positif, ia menunjukkan adanya hubungan badan dengan HCV. Walau bagaimanapun, 40% orang yang mempunyai ELISA yang positif tidak mengesan virus dalam darah - ini adalah keputusan positif yang diragui, atau palsu.

    RIBA untuk Hepatitis C

    Untuk mengesahkan keputusan positif ELISA, imunoblotting rekombinan (RIBA) digunakan, yang merupakan kajian yang lebih tepat mengenai kehadiran antibodi terhadap virus hepatitis C. Walau bagaimanapun, keputusan positif juga tidak menentukan kehadiran HCV dalam tubuh pesakit, tetapi hanya mengesahkan kehadiran antibodi di dalamnya.

    Ujian hepatitis C PCR

    Ujian RNA HCV, yang sering dirujuk sebagai assay PCR, atau PCR, adalah ujian darah yang lebih tepat yang secara langsung mengesan bahan genetik virus hepatitis (setiap virus adalah satu zarah RNA). Analisis PCR terhadap hepatitis C mendedahkannya sebelum berlakunya antibodi dalam tempoh tidak melebihi lima hari selepas jangkitan.

    • PCR kuantitatif, yang menentukan bukan sahaja fakta kehadiran virus itu, tetapi juga kuantiti.
    • Genotyping, yang membolehkan untuk menubuhkan genotip virus hepatitis C, yang memungkinkan untuk menentukan kaedah terapi yang perlu digunakan dalam setiap kes tertentu.

    Terdapat lebih daripada 10 genotip HCV, tetapi untuk amalan klinikal, cukup untuk mengenal pasti 5 orang yang paling biasa.

    Mari kita perhatikan lebih terperinci ujian kuantitatif dan kualitatif untuk RNA HCV.

    Analisis kualitatif menunjukkan kehadiran virus dalam darah. Ini adalah analisis yang agak meragukan, kerana ia mempunyai had sensitiviti. Apabila melakukan PCR berkualiti tinggi, adalah wajar untuk menggunakan sistem untuk diagnostik, kadar sensitiviti yang tidak kurang daripada 50 unit antarabangsa per ml (IU / ml). Nilai rujukan, atau norma, adalah hasil negatif ("tidak dikesan"), yang menunjukkan bahawa tiada serpihan RNA spesifik HCV dikesan dalam sampel dianalisis. Hasil PCR positif ("dikesan") menunjukkan adanya jangkitan aktif.

    Analisis kuantitatif PCR, atau viral load, merupakan ujian untuk kepekatan virus (viremia) dalam darah, yang menunjukkan jumlah unit RNA virus dalam jumlah darah tertentu.

    Tafsiran petunjuk:

    1. Lebih daripada 800 IU / ml adalah norma dari viral load yang tinggi;
    2. Kurang daripada 800 IU / ml adalah norma untuk viral load yang rendah.
    3. Analisis PCR kuantitatif perlu dilakukan jika:
    4. Ujian kualitatif untuk kehadiran virus RNA hepatitis C dalam serum mempunyai hasil yang positif;
    5. Taktik yang ditentukan dan penilaian keberkesanan terapi pesakit.

    Penunjuk kuantitatif virus dalam darah dan keterukan penyakit itu tidak berkaitan secara langsung antara satu sama lain.

    • infeksi penyakit, yang menunjukkan risiko yang lebih tinggi untuk penghantaran virus dengan kandungan yang lebih tinggi dalam darah pesakit;
    • keberkesanan terapi, yang lebih tinggi, semakin rendah beban virus.

    Analisis genotip dilakukan dengan ujian positif kualitatif untuk kehadiran virus RNA hepatitis C dalam serum, serta untuk:

    1. Definisi perkembangan penyakit;
    2. Taktik rawatan;
    3. Menilai keberkesanan terapi;
    4. Ramalan proses jangkitan kronik.

    Tempoh rawatan, bergantung kepada pengesanan genotip virus, adalah faktor penting, kerana ubat-ubatan yang digunakan untuk rawatan mempunyai beberapa kesan sampingan dan kurang diterima oleh pesakit.

    Analisis penyahkodan untuk hepatitis C

    Ujian deskripsi dilakukan oleh juruteknik yang berkelayakan. Norma ini membayangkan ketiadaan lengkap RNA virus, antibodi kepada mereka dan antigen. Kandungan antibodi dalam darah mungkin menunjukkan kehadiran hepatitis C akut atau kronik, dan tempoh pemulihan. Kehadiran RNA HCV dalam darah, yang dikesan oleh PCR, menunjukkan kehadiran virus dalam darah.

    Apabila pelanggaran pengumpulan dan pengangkutan darah, serta teknologi kajian, analisis PCR kadang-kadang menunjukkan hasil positif palsu, atau diragui. Analisis RIBA dan ELISA dapat menunjukkan hasil positif palsu dalam hal tahap awal penyakit, ketika tubuh belum mampu menghasilkan antibodi yang cukup.

    Statistik perubatan menunjukkan bahawa pada masa ini kira-kira 4% penduduk dunia dijangkiti virus hepatitis C. Walau bagaimanapun, angka ini tidak mencerminkan realiti objektif, kerana ramai orang tidak menyedari bahawa mereka adalah pembawa virus ini. Sebab itulah sangat penting untuk selalu memeriksa doktor dan secara berkala melakukan ujian darah untuk hepatitis. Setiap ujian individu boleh memberikan hasil yang meragukan, dan hanya dalam kombinasi mereka akhirnya boleh menentukan diagnosis dan mula mengubati hepatitis secukupnya.


    Artikel Yang Berkaitan Hepatitis