Penentuan hepatitis B dan C virus

Share Tweet Pin it

Tinggalkan komen 1,493

Hepatitis adalah sekumpulan penyakit virus yang hampir tidak asymptomatic sel hati. Diagnosis awal hepatitis C, yang lebih tersembunyi, akan membolehkan masa untuk menghentikan proses patologi. Diagnosis hepatitis B dan C sangat penting untuk menentukan prognosis untuk pemulihan dan memilih rejimen rawatan. Untuk mengenal pasti virus menggunakan 2 kumpulan kaedah: makmal dan instrumental. Yang paling berkesan adalah diagnosis makmal hepatitis virus.

Kenapa diagnosis awal begitu penting?

Gejala pertama jangkitan tidak dinyatakan dan tidak khusus. Sekiranya hepatitis B pada peringkat awal dapat mengganggu pesakit dengan gejala ringan, maka Form C tidak nyata untuk masa yang lama. Sementara itu, virus itu, semasa di dalam badan, mula perlahan-lahan memusnahkan hati. Ramai orang adalah pembawa penyakit, tidak menyedari bahawa mereka menyebarkan virus kepada orang lain.

Diagnosis lewat hepatitis membawa kepada peralihan penyakit itu kepada bentuk kronik atau kerosakan hati, sirosis dan kanser yang tidak dapat dipulihkan.

Untuk memerhatikan virus dalam darah pada waktunya, adalah penting untuk melakukan penyelidikan secara berkala terhadap orang-orang yang berisiko jangkitan: orang yang mempunyai status HIV-positif, pekerja kesihatan, pesakit yang menerima pemindahan darah. Ujian hepatitis C diperlukan untuk wanita hamil untuk menolak kemungkinan menjangkiti kanak-kanak.

Ciri-ciri Hepatitis

Tahap dan gejala hepatitis B

Hepatitis B virus berkembang perlahan-lahan. Secara keseluruhan, terdapat 4 fasa penyakit, di mana manifestasi gejala bergantung. Prognosis untuk pemulihan adalah baik, kurang kerap menjadi kronik. Kemerosotan keadaan adalah mungkin dengan patologi hati yang bersamaan, kekalahan serentak virus C, D. Proses kronik jika tiada rawatan berlangsung selama 10 tahun.

  • keletihan, hilang selera makan;
  • mungkin sedikit peningkatan dalam suhu badan;
  • sakit pada otot dan sendi;
  • rasa pahit di mulut, loya, dan kadang-kadang muntah;
  • gangguan najis;
  • hati membesar dan sakit;
  • kesakitan yang membosankan di bahagian perut;
  • air kencing gelap;
  • Cal tidak berwarna.
  • meningkatkan kesedihan kulit dan mata sclera;
  • kemerosotan keadaan am;
  • ruam kulit.
  • manifestasi bersama dan beransur-ansur hilang secara beransur-ansur hilang;
  • selera makan dipulihkan;
  • kiraan darah kembali normal.

Bentuk dan gejala hepatitis C

Penyakit ini berbahaya kerana sering tanpa gejala, walaupun di peringkat akut, gejala-gejala itu terhapus. Kebanyakan pesakit bertukar kepada doktor dengan bentuk kronik. Masa inkubasi berlangsung dari 2 minggu hingga 6 bulan. Gejala bergantung kepada jenis penyakit: akut atau kronik. Fasa akut boleh berakhir dalam pemulihan, atau penyakit akan menjadi kronik. Kiri yang tidak dirawat, sirosis atau kanser hati utama berkembang selama beberapa tahun.

Hepatitis C, berbanding dengan hepatitis B, dalam 80-90% menjadi kronik kerana kursus terpendam, pengesanan lewat dan permulaan terapi.

  • suhu sedikit tinggi;
  • sakit di sendi besar;
  • keletihan dan kelemahan;
  • kadang-kadang muntah dan loya;
  • berat dan sakit di hipokondrium yang betul;
  • warna air kencing gelap dengan tajam;
  • kekuningan sclera;
  • cal cahaya.
  • keletihan kronik;
  • kitaran tidur terganggu;
  • berat dan kesakitan berterusan di hipokondrium yang betul;
  • Perubahan warna bulu dan air kencing yang berterusan;
  • pendarahan yang kerap dari hidung;
  • gangguan selera makan, kadang-kadang kebencian terhadap makanan.

Kaedah penyelidikan dalam diagnosis hepatitis B dan C

Objektif tinjauan adalah untuk mengenal pasti virus, menentukan jenis, aktiviti, tahap kerosakan pada sel-sel hati. Hanya berdasarkan hasil kajian yang membuat diagnosis akhir, memilih kaedah rawatan, juga menggunakannya untuk menilai keberkesanan terapi. Diagnosis makmal hepatitis dilakukan dengan kaedah penyelidikan pelbagai parameter darah.

Diagnosis makmal penyakit ini

  • Enzim imunosorben berkaitan enzim (ELISA). Menentukan kehadiran antigen dan antibodi spesifik dalam badan. Antibodi dihasilkan 3-6 minggu selepas jangkitan dan masih terdapat masa yang lama selepas pemulihan. Hasilnya hanya menunjukkan kehadiran virus yang mungkin dan memerlukan pemeriksaan tambahan. Diagnosis makmal hepatitis B bertujuan untuk mengesan 3 jenis antigen virus: HBsAg, HBcAg, HBeAg. Dengan hepatitis C, anti-HCV dikesan.
  • Ujian ekspres. Pengesanan antibodi dalam darah berlaku dalam masa 15 minit. Keputusan ujian tidak tepat seperti ELISA, jadi dengan hasil yang positif, anda harus berunding dengan doktor untuk diagnosis terperinci. Selalunya, menggunakan ujian, pemeriksaan kumpulan risiko untuk jangkitan dan diagnosis awal pesakit dijalankan.
  • Reaksi rantai polimerase (PCR). Kenal pasti kod genetik virus dan bilangan zarah dalam 1 ml darah. Kaedah diagnostik khusus dan kualitatif.
  • Biokimia darah dengan penentuan tahap enzim hati (ALT, AST). Jumlah enzim ini dalam aliran darah adalah penunjuk aktiviti virus dan intensitas keradangan di hati.
  • Kepekatan bilirubin pigmen empedu membolehkan anda menilai hati. Sekiranya tisu hati rosak, sebahagian daripada empedu mula memasuki darah dan jumlah peningkatan bilirubin.
  • Sampel protein.
  • Coagulogram (penilaian pembekuan darah). Petunjuk-petunjuk indikator bertambah buruk disebabkan oleh pengurangan jumlah protein prothrombin.
  • Biopsi hati. Pengumpulan zarah tisu hati. Kaedah ini dapat menentukan tahap kerosakan pada struktur tisu hati.
Kembali ke jadual kandungan

Kaedah-kaedah penting untuk diagnosis hepatitis

Diagnosis makmal hepatitis dilengkapi dengan kaedah instrumental:

  • Fibroelastography. Menggunakan peranti (fibroskana) ditentukan oleh ketumpatan hati dan perubahan dalam tisu. Kaedah ini memungkinkan untuk memerhatikan dinamika penyakit dan kesan rawatan.
  • Ultrasound organ-organ perut dan hati. Pemeriksaan hati mendedahkan hanya perubahan dangkal. Menggunakan ultrasound, anda boleh menentukan bentuk, saiz, kedudukan badan.
Kembali ke jadual kandungan

Menganalisis diagnosis pembezaan

Adalah penting untuk membezakan hepatitis B dan C daripada jenis A, E, D. Bagi diagnosis pembezaan, ujian makmal digunakan untuk mengenal pasti kod genetik virus dan antigen spesifik. Perbezaan hepatitis B dan C juga jelas dalam aspek gambar klinikal. Ia juga perlu untuk mengecualikan hepatitis provokasi oleh patogen lain (cytomegalovirus, Epstein-Barr virus, toxoplasma), jangkitan usus, keracunan makanan, cholelithiasis dan penyakit kuning sifat berjangkit (akibat daripada penyumbatan batu hempedu dalam cholelithiasis atau penggunaan banyak produk karotena kaya).

Rawatan hepatitis B dan C virus

Pesakit dengan bentuk akut hepatitis virus mesti dihantar ke wad penyakit berjangkit. Di samping rawatan dadah, aspek penting ialah rejimen. Memandangkan keterukan keadaan, ditugaskan untuk tidur atau tidur. Rawatan hepatitis termasuk bidang-bidang berikut:

  • Terapi pengoksidaan. Pelepasan luka-luka toksik badan. Intravena diberikan: penyelesaian glukosa 5%, "Hemodez." Apabila gejala dinyatakan - glucocorticosteroids ("Prednisone").
  • Immunomodulators: interferon (mengandungi protein pelindung yang dihasilkan semasa jangkitan virus).
  • Ubat antivirus: Cycloferon, Farmvir.
  • Antispasmodics. Terutama penting dalam cholestasis (melambatkan atau menghentikan penguraian hempedu). Digunakan "No-shpa" atau "Spazmol."
  • Dadah kolera: magnesium sulfat, "Allohol".
  • Persediaan enzim: "Mezim-forte."
  • Hepatoprotectors: Karsil, Essentiale.
  • Vitamin: kumpulan B, selalunya B6 atau B12, C, E.

Walaupun dengan penyakit ringan, latihan terhad. Hidangan 4-5 kali sehari, bergantung kepada petunjuk diet No. 5 atau No. 5a (dalam keadaan teruk). Dalam tempoh yang teruk, minum banyak air. Anda boleh menggunakan air mineral, buah-buahan dan berry decoctions. Mereka biasanya dilepaskan dari hospital pada hari ke 20-30.

Diagnosis hepatitis: kaedah dan analisis diagnostik

Doktor hepatitis memanggil sebarang penyakit hati radang. Reaksi keradangan dalam hepatosit boleh dicetuskan oleh virus, penyalahgunaan alkohol biasa, ubat, keracunan oleh bahan toksik; Hepatitis autoimun dibezakan dalam kumpulan yang berasingan, etiologi yang tidak diketahui ubat hingga ke hari ini. Pendekatan kepada rawatan hepatitis genetik yang berjangkit dan tidak berjangkit adalah berbeza, oleh itu, adalah sangat penting bagi doktor untuk memeriksa penyebab patologi semasa pemeriksaan pesakit dengan gejala "hati". Bagaimana untuk melakukan ini, apakah kaedah diagnosis hepatitis yang ada - kita akan melihat lebih jauh.

Gejala yang menunjukkan hepatitis

Hepatitis akut dalam kebanyakan kes berlaku dengan gambaran klinikal yang terang: keseronokan kulit, mabuk, mual, muntah, sakit perut, cirit-birit, demam, kelemahan yang teruk. Dengan hepatitis kronik, segala-galanya berbeza-beza - mereka hampir tidak menunjukkan diri mereka, tetapi hati itu musnah. Pesakit sedemikian sering tidak sengaja belajar mengenai penyakit mereka (semasa peperiksaan, yang boleh dijalankan sepenuhnya pada satu ketika lagi), atau walaupun terdapat akibat daripada proses keradangan yang tahan lama - sirosis dan kanser hati. Untuk mengelakkan pilihan kedua, adalah dinasihatkan supaya tidak memberi perhatian kepada gejala berikut:

  • Sebarang ketidakselesaan di bahagian hati. Ini mungkin perasaan pecah, kesemutan, dan berat.
  • Kekurangan kembung.
  • Sering mual.
  • Kulit yang tidak sihat dan putih pada mata (mereka kadang-kadang boleh mendapat warna kekuningan).
  • Keletihan yang berterusan.
  • Selera makan yang buruk.

Jika ada masalah di atas, anda pasti perlu menghubungi ahli terapi. Untuk mengesahkan diagnosis "Hepatitis" perlu menjalani pemeriksaan komprehensif, yang utama adalah ujian makmal yang pelbagai. Tetapi kajian instrumental yang memvisualisasikan hati (ultrasound, scan CT, MRI) adalah kecil kerana kandungan maklumat yang rendah - mereka memberikan maklumat hanya mengenai perubahan struktur dalam organ, tetapi bukan tentang punca penyakit.

Ciri-ciri diagnosis pelbagai jenis hepatitis

Semasa diagnostik, doktor mesti, pertama, mengetahui jenis hepatitis yang dia hadapi, kedua, menentukan sejauh mana perubahan patologi dalam hati pergi, apakah aktiviti proses keradangan, dan berapa banyak fungsi organ terganggu.

Hepatitis Viral

Virus hepatitis menular, dan oleh itu yang paling biasa di kalangan penduduk. Terdapat dua kumpulan hepatitis seperti:

  • mereka yang tergolong dalam "penyakit tangan kotor" - A, E;
  • Dihantar melalui darah atau cairan badan lain semasa hubungan seks, manipulasi perubatan dan kosmetik dengan instrumen yang tercemar, transfusi darah - B, C, D, G.

Kaedah makmal untuk mengenal pasti agen penyebab hepatitis virus:

  • sebuah enzyme immunoassay untuk antigen virus dan antibodi kepada mereka;
  • ujian darah untuk mengesan bahan genetik virus (DNA, RNA) oleh PCR.

Untuk menilai tahap aktiviti pemusnahan hepatosit dan fungsi hati, ujian darah biokimia kompleks dilakukan, di mana kepekatan AlT, AST, alkali fosfatase (enzim dilepaskan ke dalam darah semasa pemusnahan hepatosit), pecahan bilirubin (pertukaran bahan ini berkait rapat dengan hati), protein pecahan (banyak protein disintesis dalam hati). Analisis ini mempunyai nama lain - ujian hati.

Dalam hepatitis virus kronik, komponen penting pemeriksaan pesakit adalah penilaian perubahan struktur dan aktiviti proses keradangan dalam tisu hati. Kaedah berikut digunakan untuk ini:

  • Biopsi organ yang diikuti oleh analisis morfologi bahan yang diambil.
  • Elastometry adalah penentuan tahap degenerasi fibrosis hati (penggantian tisu hati normal dengan sel fibrosa yang tidak konsisten) menggunakan alat Fibroscan. Kajian ini menyerupai imbasan ultrasound.
  • FibroTest adalah kaedah bukan invasif moden untuk diagnosis fibrosis dan perubahan keradangan di hati, berdasarkan penentuan kepekatan darah 6 penanda biokimia. Tanda-tanda untuk kaedah ini adalah kursus kronik virus hepatitis B dan C.

Hepatitis autoimun

Dengan hepatitis seperti itu, pelakunya proses radang adalah sistem pertahanan imunnya sendiri - ia menyerang hepatosit, seperti sel-sel asing. Sering kali, penyakit ini berlaku pada orang yang menderita patologi autoimun lain - arthritis rheumatoid, lupus erythematosus, penyakit Crohn, dan sebagainya.

Ia adalah kebiasaan untuk membezakan 2 jenis hepatitis autoimun. Setiap jenis penyakit mempunyai penanda makmal sendiri, yang ditentukan semasa ujian darah:

  • Jenis 1 - antibodi antinuklear (ANA) dan antibodi untuk kelicinan otot (ASMA);
  • Jenis 2 - antibodi untuk mikrosom hati dan ginjal (anti-LKM), antibodi kepada antigen cytosolic hati (Anti-LC-1).

Tanda-tanda ini juga boleh dikesan dalam patologi lain, jadi "standard emas" untuk diagnosis hepatitis autoimun adalah, biopsi punca punca hati. Kajian ini membolehkan kita untuk mempertimbangkan struktur morfologi tisu hati dan untuk mewujudkan dengan ketepatan yang tinggi sifat autoimun proses keradangan, sebagai tambahan, untuk mengenal pasti perubahan ciri-ciri fibrosis. Untuk menilai daya maju fungsi hati, ujian fungsi hati juga dilakukan.

Hepatitis toksik

Banyak bahan kimia merosakkan sel hati - kesannya dipanggil hepatotoksisiti. Alkohol boleh dirangsang oleh perkembangan hepatitis toksik (ia tidak begitu banyak dos yang penting untuk menggunakan sistematik), ubat-ubatan, racun semula jadi dan perindustrian. Antara ubat-ubatan, antibiotik, ubat-ubatan anti-tuberkulosis, sulfonamida, anticonvulsants dan ubat antikanker, ubat antipiretik dan anestetik mempunyai hepatotoxicity yang paling besar.

Dalam diagnosis hepatitis toksik adalah sangat penting data anamnestic, iaitu penentuan penggunaan bahan-bahan berbahaya. Tetapi ujian makmal dijalankan tidak banyak untuk mengenal pasti punca tindak balas radang hati, tetapi untuk menentukan tahap disfungsi organ.

Ujian untuk hepatitis virus

Oleh kerana hepatitis virus dikesan paling kerap, diagnosis mereka perlu dipertimbangkan dengan lebih terperinci. Yang paling bermaklumat dari segi pengenalpastian agen penyebab hepatitis virus dianggap sebagai ujian darah untuk penanda spesifik. Petunjuk ini boleh digunakan untuk menilai jenis virus dan tempoh penyakit (peringkat perkembangan penyakit).

Hepatitis A

Hepatitis A virus didiagnosis oleh antibodi (imunoglobulin) kepada antigen virus. Pengesanan kelas immunoglobulin M adalah proses akut. Jika imunoglobulin kelas G "pergi melalui bumbung" dalam darah, pemulihan kemungkinan besar bermula (pemulihan). Pengesanan virus RNA hepatitis A praktikalnya tidak digunakan dalam diagnostik rutin.

Hepatitis B

Hepatitis B mempunyai lebih banyak penanda:

  • HBsAg (permukaan atau antigen Australia) - muncul dalam darah pesakit yang pertama.
  • HBeAg adalah penanda virus pembiakan aktif.
  • Antibodi kepada antigen daripada virus kelas yang berbeza.
  • DNA virus yang dikesan oleh PCR (dalam diagnosis Hepatitis B kronik, adalah penting bukan sahaja untuk mewujudkan kehadiran DNA virus dalam darah, tetapi juga kuantiti - apa yang dipanggil viral load).

Bergantung kepada kehadiran penanda tertentu, doktor boleh menentukan sama ada hepatitis adalah akut atau kronik. Sekiranya proses keradangan akut, maka adalah mungkin untuk menjelaskan tempoh penyakit ini: inkubasi, tempoh akut atau pemulihan. Dalam bentuk hepatitis kronik, penanda boleh membezakan replika (apabila virus mengalir) dan integratif (ketika virus tidur) fasa penyakit. Maklumat ini sangat penting untuk merangka pelan rawatan dan menentukan tahap jangkitan pesakit.

Hepatitis C

Diagnosis hepatitis C adalah berdasarkan:

  • Pengesanan penanda serologi dalam darah - antibodi kepada antigen virus.
  • Mengesan virus itu sendiri (RNA oleh PCR).
  • Menubuhkan genotip virus. Kajian ini perlu untuk meramalkan keberkesanan rawatan antiviral dan menilai risiko mengembangkan akibat yang serius dari penyakit - hepatokarsinoma, sirosis.

Hepatitis D

Penanda darah utama hepatitis D virus adalah RNA virus. Virus ini tidak boleh parasitisasi sendiri, kerana ia tidak mempunyai kulit, sahabat tetapnya adalah virus hepatitis B. Dalam hubungan ini, pesakit dengan hepatitis B mesti diperiksa untuk hepatitis D. Pengesanan yang dianggap sebagai tanda prognostik yang tidak baik.

Hepatitis E

Untuk mendiagnosis hepatitis ini dalam darah pesakit, kepekatan antibodi kelas G dan M kepada virus E ditentukan. Di peringkat akut penyakit, immunoglobulin M sentiasa hadir, tetapi imunoglobulin G muncul selepas penyakit tersebut telah diselesaikan.

Hepatitis G

Hepatitis G virus sering dikombinasikan dengan hepatitis C virus, jadi jika pesakit itu didapati pesakit juga melakukan:

  • ujian darah untuk RNA virus G;
  • ujian serologi untuk antibodi kepada antigen virus G.

Bagaimana doktor menentukan analisis yang diperlukan untuk disampaikan kepada pesakit

Pada pandangan pertama, ia mungkin menunjukkan bahawa diagnosis hepatitis adalah proses yang sangat kompleks. Malah, hepatologi berpengalaman (doktor yang pakar dalam penyakit hati) mempunyai corak tindakan yang terbukti apabila mereka mengesan tanda-tanda patologi hepatik dalam pesakit.

Pada peringkat pertama, doktor mengumpul maklumat yang mungkin memberi gambaran tentang penyebab hepatitis:

  • sikap pesakit terhadap alkohol, dadah;
  • hubungan dengan orang yang sakit atau mempunyai hepatitis virus;
  • penyakit ditangguhkan;
  • rawatan yang diterima, dsb.

Tahap seterusnya adalah penilaian keupayaan fungsi hati menggunakan ujian darah biokimia. Jika ujian hepatik menunjukkan keabnormalan, ujian serologi untuk penanda hepatitis virus dijalankan (untuk permulaan tiga utama, A, B, C) - ini adalah peringkat ketiga. Dengan hasil negatif dari kajian serologi, peperiksaan hati yang diperluas terus menyisihkan proses autoimun. Jika sifat virus hepatitis disahkan, ujian tambahan dan kajian instrumental dilantik untuk memilih strategi rawatan yang betul.

Pusat makmal moden menawarkan perkhidmatan pakej untuk diagnosis hepatitis. Kajian semacam itu wajar disampaikan kepada orang yang berisiko tinggi mengontrak hepatitis virus, contohnya, mereka yang ditransfusikan dengan darah atau hemodialisis.

Ingat! Dengan pengesanan tepat pada masanya hepatitis virus dan tidak berjangkit, kemungkinan pemulihan penuh atau penstabilan maksimum keadaannya sangat tinggi.

Olga Zubkova, Penyelidik Perubatan, Ahli Epidemiologi

Kaedah untuk diagnosis hepatitis B

Hepatitis B virus (b) adalah salah satu penyakit berjangkit yang paling biasa di hati. Kira-kira 50 ribu orang dijangkiti virus ini setiap tahun di Rusia, dan hari ini ada kira-kira 3 juta orang yang mengalami jangkitan kronik.

Dalam kebanyakan kes, sistem imun orang dewasa mengatasi HBV sahaja. Dalam 10% kes, jangkitan itu berlaku tanpa gejala yang teruk, tetapi mengalir ke peringkat kronik. Kira-kira separuh daripada kes yang dicirikan dengan asimtomatik, kira-kira satu perempat lagi berlaku dengan gejala yang lembap. Oleh kerana persamaan luaran gambar simptom HBV dengan jenis hepatovirus lain, diagnosis hepatitis B adalah penting untuk pemilihan skim terapeutik.

Perbezaan hepatitis B dari jenis lain

Seperti mana-mana hepatitis lain, penyakit yang disebabkan oleh virus HBV terutamanya memberi kesan kepada hati.

Ini merumitkan pemilihan ejen terapeutik, kerana interferon dalam kes ini hanya akan mempercepatkan sitolisis autoimun. Terdapat beberapa perbezaan antara HBV dan jenis penyakit lain.

  1. Bentuk akut HBV yang teruk dicirikan dengan pesat, dengan simptom gejala, perkembangan hampir serta-merta selepas jangkitan. Penyakit fulminant (fulminant) dengan cepat membawa kepada perkembangan koma dan kematian, tetapi kes-kes seperti ini, sememangnya jarang berlaku.
  2. Jika bayi yang baru lahir telah dijangkiti hepatitis B, anda boleh menjadi 90% yakin bahawa penyakit itu akan menjadi kronik.
  3. Pada orang dewasa, sebaliknya, dalam 90% kes jangkitan boleh diselaraskan sepenuhnya.
  4. Sekiranya penyakit itu tidak bersifat asimtomatik untuk masa yang lama, ia biasanya berakhir dengan bentuk kronik.
  5. HBV kronik adalah punca utama sirosis dan karsinoma hepatoselular (kanser).
  6. Virus HBV dianggap sebagai salah satu yang paling berjangkit kerana ketahanannya yang luar biasa dalam alam sekitar.
  7. Disebabkan kesamaan virus HBV, vaksinasi terhadap hepatitis B, tidak seperti HCV, wujud.

Diagnosis Hepatitis B

Pada masa ini, beberapa kaedah makmal asas bagi penentuan hepatitis B digunakan dalam perubatan domestik. Diagnosis HBV termasuk:

  • Enzim imunosorben berkaitan enzim (ELISA) untuk menentukan kehadiran dalam darah antibodi kepada virus HBV (anti-HBV), yang kini dianggap penyelidikan yang paling dipercayai, cepat dan murah;
  • ujian darah untuk kehadiran DNA virus menggunakan tindak balas rantai polimerase (PCR), hasilnya dapat menentukan keberadaan dan aktivitas virus (viral load);
  • analisis biokimia darah untuk tahap bilirubin, alkali fosfatase, enzim hati (ALT dan AST), yang membolehkan untuk menilai kehadiran proses keradangan di hati.

Adalah jelas bahawa rujukan kepada ujian ini diberikan oleh doktor jika gambaran gejala keadaan pesakit dan kajian sejarahnya mencadangkan idea jangkitan dengan HBV atau untuk memantau keadaan dalam proses kronik.

Kaedah diagnostik tambahan

Sehingga baru-baru ini, biopsi organ dianggap kaedah yang paling boleh dipercayai untuk menentukan sejauh mana perubahan patologi dalam hati. Ini adalah kajian mengenai serpihan hati yang diekstrak dengan menggunakan jarum khas.

Prosedur ini dilakukan di bawah anestesia tempatan dan jarang menyebabkan komplikasi, walaupun ia merujuk kepada campur tangan pembedahan.

Hari ini ada cara yang lebih moden dan kurang trauma:

Ujian terakhir 2 adalah berdasarkan ujian darah untuk beberapa penunjuk menggunakan algoritma khas. Dan fibroelastografi memungkinkan untuk menentukan kepadatan parenchyma hati menggunakan kaedah yang serupa dengan ultrasound.

Adakah diagnosis hepatitis B salah?

Diagnosis hepatitis B mungkin salah kerana beberapa sebab:

  • pencemaran bahan biologi;
  • kesilapan sistem analisis;
  • kesilapan makmal.

Yang terakhir, malangnya, sering terjadi. Oleh itu, sumbangan darah sekali untuk kajian untuk mendiagnosis hepatitis B tidak mencukupi.

Untuk mengecualikan pengaruh luaran pada hasil kajian, peraturan berikut harus diikuti pada malam analisa:

  1. Berhenti daripada makan selama 12 jam sebelum menderma darah.
  2. Berhenti merokok setengah jam sebelum kajian.
  3. Setengah jam sebelum ujian, hentikan tekanan emosi dan fizikal yang berlebihan.

Video berguna

Ujian apa yang perlu anda lulus untuk diagnosis hepatitis, lihat dalam video ini:

Diagnosis hepatitis B dan hepatitis C. Pemeriksaan

Hepatitis adalah nama biasa untuk proses keradangan di hati. Selalunya, virus hepatitis B dan hepatitis C menyebabkan hepatitis. Seseorang boleh dijangkiti semasa melakukan tindikan, tatu, manicure, atau ubat intravena. Terdapat risiko jangkitan yang tinggi di doktor gigi, semasa pembedahan, pemindahan darah. Hepatitis B ditularkan secara seksual dan dari ibu kepada anak semasa mengandung (risiko adalah kira-kira 30-40%). Untuk hepatitis C, cara penghantaran ini tidak relevan.

Gejala hepatitis B virus dan hepatitis C adalah serupa.

Gambar klinikal berbeza dengan bentuk akut dan kronik.

Hepatitis virus akut adalah proses radang dalam tisu hati yang disebabkan jangkitan baru-baru ini (kurang daripada 6 bulan). Hepatitis virus kronik adalah kecederaan hati keradangan-dystropik dengan fibrosis sederhana lebih daripada 6 bulan.

Gejala hepatitis virus disebabkan oleh mabuk akibat detoksifikasi gangguan hati dan cholestasis (pelanggaran aliran keluar hempedu). Pertama sekali, terdapat kesan cerebrotoxic, yang menyebabkan peningkatan keletihan, gangguan tidur (dalam bentuk ringan hepatitis akut dan dalam hepatitis kronik).

Dalam kes penyakit akut penyakit, tempoh awal berlangsung kira-kira 2-3 minggu. Ia disertai oleh sakit sendi, kelemahan, senak (mual, muntah, hilang selera makan), demam, terutama sekali dengan hepatitis B. Virus yang sakit disebabkan oleh cholestasis juga lebih banyak ciri hepatitis B. Perubahan warna urin (gelap) dan najis (cerah ). Selalunya bentuk akut secara amnya tidak gejala, terutamanya dalam hepatitis C.
Hepatitis B virus akut dalam 80% kes berakhir dengan pemulihan, dan dalam 20% ia menjadi kronik. Dengan hepatitis C, kursus kronik berkembang pada kira-kira 90% pesakit dewasa dan 20% kanak-kanak. Bentuk kronik adalah yang paling berbahaya, kerana ia sering berubah menjadi sirosis hati.

Dalam pesakit yang tidak dirawat, kemurungan mental dan keletihan mungkin satu-satunya manifestasi hepatitis virus kronik walaupun sebelum diagnosis dibuat. Pada peringkat lanjut hepatitis kronik, dengan fibrosis dan sirosis yang luas, sindrom hipertensi portal, yang mengancam nyawa akibat pengumpulan cecair di rongga perut (ascites) dan kemungkinan pendarahan dalaman, datang ke hadapan.

Pada penampilan pertama ciri-ciri gejala hepatitis, perlu menjalani pemeriksaan diagnostik untuk virus hepatitis B (B) dan C. Memandangkan fakta bahawa penyakit asimptomatik penyakit itu mungkin, serta kemudahan jangkitan, ujian untuk virus hepatitis perlu dilakukan secara teratur, dan untuk hepatitis B virus inokulasi.

Diagnosis makmal hepatitis B dan C virus

Hasil kajian makmal memainkan peran penting, jika tidak memimpin, dalam mengesahkan diagnosis hepatitis virus dan menetapkan etiologinya.

Ujian darah biokimia

Analisis biokimia darah pesakit telah lama memasuki amalan makmal klinikal. Keseluruhan data yang diperoleh pada penunjuk pertukaran bilirubin, protein whey dan enzim dapat mengesan proses keradangan yang terjadi di dalam tubuh manusia dan mencadangkan penyetempatan mereka. Kriteria ini tidak khusus dan tidak mencirikan etiologi hepatitis virus, bagaimanapun, adalah penting untuk menilai keadaan fungsi hati.

Petunjuk pertukaran bilirubin.

Pesakit boleh menilai keadaan metabolisme bilirubin berdasarkan analisis biokimia darah, air kencing dan najis. Bilirubin bebas adalah turunan hemoglobin yang dikeluarkan semasa hemolisis sel darah merah. Di bawah keadaan fisiologi, kira-kira 1% daripada erythrocytes yang beredar, yang membentuk 200-250 mg bilirubin, dihancurkan setiap hari. Bahagian utama bilirubin memasuki aliran darah dari sel-sel sistem phagocyte mononuklear limpa dan sumsum tulang. Bilirubin tidak larut dalam air, oleh itu, dalam darah ia dipindahkan oleh protein pengangkutan spesifik, albumin. Bilirubin percuma adalah sebatian toksik yang mampu menembusi halangan otak darah, menyebabkan encephalopathy. Detoksifikasi Bilirubin berlaku di dalam sel-sel hati, di mana asid glukuronik dilampirkan, membentuk glukuronida bilirubin. Senyawa ini tidak lagi menjadi toksik dan larut air, yang memudahkan penghapusan mereka dari tubuh sebagai sebahagian daripada hempedu. Di dalam usus, di bawah tindakan enzim bakteria, dua kumpulan produk penguraian bilirubin terbentuk - urobilinogens dan stercobilinogens, yang kebanyakannya diekstrak dalam tinja. Di bawah keadaan fisiologi biasa, buah pinggang tidak terlibat dalam penyingkiran bilirubin.
Bilirubin dalam darah seseorang yang sihat terkandung dalam kepekatan 1.7-17.1 μmol / l dan diwakili oleh dua pecahan: bilirubin tidak larut yang berkaitan dengan bilirubin tidak langsung albumin, dan bilirubin langsung glukoronida bilirubin - larut langsung. Biasanya, nisbahnya adalah 3: 1.
Dalam hepatitis, sel hati rosak dan, akibatnya, pengeluaran empedu berkurang. Di samping itu, akibat kerosakan pada parenchyma hati, empedu memasuki bukan sahaja ke kanal empedu, tetapi juga ke dalam darah. Proses-proses ini membawa kepada peningkatan jumlah bilirubin darah kerana kedua-dua pecahannya. Telah diingatkan bahawa pada akhir tempoh pra-epidermal, pada sesetengah pesakit, terhadap latar belakang bilirubin total yang normal, pecahan bilirubin langsung mula berkembang, yang merupakan penunjuk awal proses-proses sitolitik dalam hati. Bilirubin dan urobilin mula dikesan dalam air kencing, dan kepekatan stercobilin dalam najis berkurangan secara mendadak (Jadual 1).
Jadual 1. Nisbah metabolisme bilirubin secara normal dan dalam perkembangan penyakit kuning hepatik.

Bilirubin serum total

1.7 - 17.1 μmol / l

Bilirubin serum terus

Bilirubin serum tidak langsung

Reaksi air kencing ke bilirubin dan urobilin

Reaksi feses kepada sterkobilin

Perlu diperhatikan bahawa penunjuk metabolisme bilirubin untuk diagnosis hepatitis virus memainkan peranan hanya dalam perkembangan penyakit kuning. Kebanyakan bentuk anikterik dan fasa hepatitis fasa preikterik kebanyakannya tidak diiktiraf.

Penilaian aktiviti enzim.

Penentuan aktiviti serum aminotransferase (alanine aminotransferase (ALT) dan aspartate aminotransferase (AST)) adalah penunjuk yang sangat sensitif terhadap sitokimia hepatosit, yang menentukan peranan utama dalam diagnosis hepatitis pelbagai etiologi. Dalam proses cytolytic, yang berkembang di hati pesakit dengan hepatitis virus, ALT "menyingkirkan" berlaku, tahap peningkatan AST adalah kurang jelas (Jadual 2).

Jadual 2. Penentuan aktiviti enzim dalam serum

Nilai hepatitis

Kekhususan Hepatocyte

Fosfatase alkali (SHF)

31-115 U / l kanak-kanak: sehingga 350 U / l

* nilai diberikan sesuai dengan saranan sistem uji diagnostik yang digunakan dalam KDL NPF "Liteh"

Untuk mengesahkan sifat hepatogenik fermentemia, adalah mungkin untuk menentukan aktiviti enzim khusus hati - sorbitol dehydrogenase, fruktosa-1-phosphataldolase, urokinase, dan lain-lain. Ia terutamanya terletak pada hepatosit dan pengenalan mereka dalam darah jelas berkaitan dengan patologi hati. Walau bagaimanapun, ujian ini lebih rendah daripada kepekaan terhadap penentuan aktiviti ALT. Aktiviti ALT dan AST mencerminkan keparahan keradangan di hati, tetapi bukan etiologi hepatitis.

Sampel protein

Dalam hepatitis virus akut, jumlah kandungan protein plasma darah dan komposisi mereka tetap tidak berubah. Pengecualian adalah ujian thymol, biasanya mempunyai nilai sehingga 4 U dan meningkat kepada 6-8 IU dalam hepatitis.

Apabila CG pada peringkat CP, terdapat penurunan kepekatan albumin dalam serum darah, pengurangan dalam indeks prothrombin (kurang daripada 70%), penurunan kepekatan faktor pembekuan lain dalam rangka sindrom kekurangan hepatoselular. Petunjuk tambahan aktiviti hepatitis adalah ESR dipercepat (~ 15 mm / h), peningkatan kepekatan gamma globulin serum.

Pengesanan penanda serologi hepatitis virus

Adalah mungkin untuk menubuhkan sifat virus hepatitis dan mendapatkan maklumat mengenai etiologinya hanya dengan mengenal pasti penanda serologi virus hepatitis. Penanda tersebut termasuk protein virus (antigen), antibodi spesifik yang dihasilkan oleh badan sebagai tindak balas terhadap jangkitan, dan asid nukleat virus (DNA atau RNA), yang mewakili genomnya.

Gabungan kaedah untuk mengesan virus atau bakteria protein (antigen) tertentu atau antibodi yang dihasilkan dalam tuan rumah dengan kehadiran satu atau patogen lain dalam tisu dan cecair biologi dirujuk sebagai kaedah imunologi analisis makmal. Sejak beberapa dekad yang lalu, kaedah penyelidikan imunologi telah menjadi semakin meluas. Alasan untuk ini adalah gabungan imunologi dan bioteknologi, yang memungkinkan untuk membangun dan mengamalkan pelbagai sistem ujian berdasarkan interaksi antara antigen - antibodi. Untuk hepatitis virus, ELISA merujuk kepada kaedah tidak langsung untuk mengesan patogen, yang membolehkan untuk menentukan etiologi penyakit.

Baru-baru ini, kaedah genodiagnostik telah diperkenalkan ke dalam amalan makmal diagnostik klinikal, yang membolehkan pengesanan dan pencirian gen atau urutan DNA dan / atau RNA yang tidak masuk akal. Pembangunan mereka adalah disebabkan oleh perkembangan pada tahun 1983 prinsip tindak balas rantai polimerase (PCR). Laporan pertama tentang penggunaan PCR praktikal muncul pada tahun 1985 dan sejak itu bilangan penerbitan di mana PCR digunakan sebagai salah satu kaedah penyelidikan adalah salah satu tempat pertama dalam kesusasteraan sains dunia. Pendekatan ini boleh digunakan untuk mengesan dan mengkaji genom agen berjangkit, pengesanan penanda penyakit onkologi, pengesanan perubahan genetik dalam genom manusia yang berkaitan dengan pelbagai gangguan fungsi. Tidak seperti ELISA, analisis PCR merujuk kepada kaedah langsung mengesan patogen dalam bahan klinikal, yang membolehkan untuk menilai aktiviti proses virus dan untuk mengesan proses penyebaran patogen dalam pelbagai organ dan tisu.

Serodiagnosis hepatitis B. Virus

Virus Hepatitis B (virus hepatitis B, HBV) tergolong dalam keluarga Hepadnoviridae. Genom virus ini diwakili oleh molekul DNA pekeliling sebahagian besarnya sebanyak 3200 bp. Di bawah mikroskop cahaya, HBV kelihatan seperti zarah sfera dengan diameter 42 nm (partikel Dane) yang terdiri daripada nukleus - nukleoid berbentuk seperti icosahedron dengan diameter 28 nm, di dalamnya terdapat DNA double-strand, protein terminal dan enzim polimerase DNA. Protein nukleoid mengandungi HBcAg dan HBeAg. Cangkang luar (7 nm tebal) dibentuk oleh antigen permukaan HBV - HBsAg (Rajah 2, 3). Virus hepatitis B adalah pseudoretrovirus, iaitu DNAnya boleh dimasukkan sebahagiannya ke dalam genom hepatosit.

Rajah. 2. Skim struktur virion HBV dan komponen antigen permukaan. Pengeluaran berlebihan protein permukaan (HBsAg) membawa kepada kehadirannya dalam serum pesakit dalam bentuk bebas.

Rajah. 3. Zarah-zarah Dane dalam serum pesakit (mikroskop cahaya)

Dengan AVH dan pemutihan hepatitis kronik, zarah virus dapat dikesan dalam hepatosit dan serum pesakit. Dengan bentuk integratif hepatitis B kronik dan dalam tahap remisi, HBV dalam serum tidak dikesan.

Asas diagnosis makmal terhadap jangkitan HBV adalah penanda penanda serologi jangkitan virus: HBsAg, HBeAg, IgM dan IgG kelas anti-HBc, anti-HBe dan anti-HBs, HBV DNA dan aktiviti polimerase DNA virus. Bergantung kepada perjalanan hepatitis B virus, spektrum perubahan dalam penanda serologis kelihatan berbeza (Rajah 4, 5)

Rajah. 4. Spektrum perubahan dalam penanda serologi dalam hepatitis B akut dengan tahap penyelesaian

Rajah 5. Spektrum perubahan dalam penanda serologis dalam kes hepatitis B kronik

HBsAg merupakan penanda utama jangkitan HBV. Dalam B akut yang teruk dalam kebanyakan kes (90-80%) HBsAg boleh dikesan dalam tempoh inkubasi, bermula dari minggu ke-3 jangkitan. Purata tempoh peredaran antigen adalah 70-80 hari. Kehilangan cepat HBsAg (pada hari pertama penyakit kuning) dengan penampilan antiBBs adalah tanda prognostik yang buruk. Dalam hepatitis B kronik, HBsAg boleh beredar dalam darah pesakit selama bertahun-tahun. Harus diingat bahawa kaedah yang digunakan sekarang untuk penentuan HBsAg, termasuk ELISA, mempunyai ambang kepekaan. Oleh itu, dengan adanya tanda-tanda klinikal hepatitis dan ketiadaan HBsAg dalam serum, adalah perlu untuk menyiasat penanda lain jangkitan HBV. Kehadiran HBsAg dalam darah menunjukkan kehadiran virus dalam hati dan kemungkinan besar dalam darah. Tidak semua serum yang mengandung HBsAg mengandungi virus hepatitis B. Dalam beberapa kes, DNA virus tidak terintegrasi sepenuhnya ke dalam DNA hepatokyte, tetapi sebahagiannya hanya oleh rantau yang menyandikan sintesis HBsAg. Dalam kes ini, HBsAg disintesis tanpa komponen lain dari virion (iaitu, tanpa antigen lain). Adalah dipercayai bahawa keadaan ini berlaku apabila syarikat penerbangan "sihat" HBsAg.

HBeAg virus hepatitis B mencirikan infeksi darah yang tinggi, sebagai penunjuk replikasi aktif HBV. HBeAg beredar di dalam darah pesakit hanya dengan kehadiran HBsAg. Pada minggu pertama tempoh icterik, ia dikesan dalam 85-95% pesakit. Pengesanan HBeAg selama dua bulan atau lebih berfungsi sebagai tanda prognostik perkembangan hepatitis kronik. Dalam majoriti pesakit dengan hepatitis kronik dengan proses tinggi proses HBeAg, ia berterusan untuk masa yang lama (sehingga beberapa tahun).

Antibodi kepada antigen nuklear kelas virus hepatitis B M (anti-HBc IgM) - penanda replikasi aktif HBV dan jangkitan akut. Dikenali 1-2 minggu selepas penemuan HBsAg dan berterusan selama 2-18 bulan. Dalam 4-20% pesakit dengan hepatitis B akut, IgM anti-HBc adalah satu-satunya penanda jangkitan. Pada pesakit hepatitis B kronik, IgM anti-HBc dapat dikesan dalam sesetengah pesakit dengan titres yang lebih rendah daripada semasa jangkitan akut, dengan titel antibodi yang mencerminkan keparahan hepatitis.

Antibodi kepada HBcAg kelas G (anti-HBc IgG) muncul hampir serentak dengan IgM anti-HBc. Sebagai peraturan, mereka kekal bersama semua orang yang mempunyai hepatitis B untuk hidup. Anti-HBc IgG diedarkan bersama dengan HBsAg dalam 95% pembawa HBsAg.

Antibodi kepada HBsAg (anti-HBs) menunjukkan jangkitan sebelum ini atau kehadiran imuniti selepas vaksinasi (paras perlindungan - 10 IU / ml). Mereka muncul dalam tempoh pemulihan, 4 minggu selepas kehilangan HBsAg, mencapai kepekatan maksimum dalam 1-2 tahun, diikuti dengan penurunan secara beransur-ansur dalam tahap yang tidak dapat dihubungi untuk pengesanan oleh kaedah diagnostik moden. Dalam sesetengah kes, anti-HBs boleh beredar untuk hidup. Kemunculan anti-HBs terhadap latar belakang peningkatan klinikal dalam pesakit dengan hepatitis B adalah tanda prognostik yang baik. Adalah penting untuk diperhatikan bahawa dalam dinamika jangkitan HBV akut terdapat "tetingkap" apabila HBsAg tidak lagi ditentukan, dan anti-HBs belum muncul. Pada masa yang sama IgM dan IgG anti-HBc dikesan. Ini berikutan dari itu, adalah perlu untuk memeriksa pesakit dengan AVH untuk anti-HBc IgM walaupun dengan keputusan negatif kajian HBsAg dan anti-HBs.

Antibodi kepada HBeAg (anti-HBe) muncul dalam darah selepas penghapusan HBeAg dan penyelesaian replikasi virus. Menjelang akhir minggu ke-9 tempoh akut hepatitis B, lebih daripada 90% pesakit mempunyai anti-HBe. Semasa tempoh pemulihan, anti-HBe mungkin hilang. Bagaimanapun, kehadiran anti-HBe bukan merupakan petunjuk ketidakhadiran serum tertentu. Telah ditunjukkan bahawa dalam beberapa pesakit semasa perkembangan hepatitis B (kira-kira 10%), di bawah pengaruh "tekanan imun" pada virus, bentuk mutan timbul yang "mengelakkan" pengawasan imun dan tidak dihapuskan. Seorang mutan diasingkan daripada pembawa anti-HBe, tidak dapat menghasilkan HBeAg disebabkan oleh kecacatan di wilayah sebelum dan telah ditetapkan HBeAg-negatif. Kemunculan mutant HBeAg-negatif membawa kepada kemajuan kerosakan hati dengan replikasi virus yang berterusan (kehadiran DNA HBV dalam serum). Jangkitan utama dengan mutan HBeAg-negatif dengan ketara meningkatkan risiko hepatitis fulminant.

Penanda hepatitis B yang diterangkan diperiksa oleh ELISA. Spektrum antibodi (anti-HBe, anti-HBs, anti-HBc IgM, anti-HBc IgG) dan antigen (HBsAg, HBeAg) membolehkan anda menubuhkan diagnosis hepatitis B dan menentukan peringkat penyakit ini (Jadual 3). Kelemahan kaedah ini adalah kemustahilan penggunaannya dalam jangkitan dengan bentuk mutan virus, dengan imunosupresi (pesakit kanser, penagih dadah, dan lain-lain) dan untuk penilaian kuantitatif patogen yang ada di dalam badan. Penyelesaian masalah ini menjadi mungkin akibat pengenalan kaedah molekul-biologi dalam praktik makmal diagnostik klinikal.

Jadual 3. Pelbagai penanda serologi jangkitan virus hepatitis B dan tafsirannya

antiNBc
Igm

antivb
jumlah c

Kaedah-kaedah genodiagnostik, yang termasuk PCR, secara signifikan memperluaskan kemungkinan diagnosis makmal viral B, membolehkan anda untuk mengenal pasti patogen, menubuhkan tisu dan penyetempatan intraselular HBV, mengenalpasti dan mencirikan bentuk-bentuk mutan virus, menilai tahap viremia semasa penyakit itu, termasuk terhadap latar belakang terapi antiviral.

Pada masa ini, terdapat pelbagai sistem ujian diagnostik untuk mengesan DNA HBV di bawah keadaan makmal berdasarkan kaedah PCR - Roche, NPF Litekh, teknologi DNA, LCR (reaksi rantai ligase) - Abbott, bDNA (kaedah "menyelaraskan" probe DNA) - firma "Chiron". Sistem ujian ini membolehkan penentuan kualitatif kehadiran patogen dalam bahan biologi: serum atau plasma, tisu hati, sel mononuklear. Salah satu pilihan bagi penentuan kualitatif DNA HBV ialah teknologi PCR in situ (dalam bahagian histologi), yang membolehkan untuk menentukan lokalisasi intraselular virus dalam hepatosit.

Satu-satunya sistem ujian komersial untuk diagnosis pembezaan HBeAg-negatif hepatitis B dicipta oleh Abbot menggunakan LCR. Kelemahan penting sistem ini ialah pengesanan hanya satu daripada banyak mutasi, mengakibatkan ketiadaan sintesis virus HBeAg. Pengenalpastian keseluruhan set perubahan genetik ciri-ciri virus HBeAg-negatif hepatitis B adalah mungkin setakat ini hanya oleh penjujukan langsung serpihan PCR yang diperkuatkan daripada genom virus.

Pencirian kuantitatif kandungan DNA HBV dalam spesimen klinikal adalah penting untuk menilai keberkesanan terapi antiviral dan mempunyai makna prognostik untuk menentukan kronik HBV. Dengan tahap awal viremia rendah (DNA HBV kurang daripada 500 fg / μl), peratusan hepatitis B kronik hampir sama dengan sifar, dengan kepekatan DNA HBV dari 500 hingga 2000 fg / μl, prosesnya kronik dalam 25-30% pesakit, dan dengan tahap yang tinggi dalam viremia pesakit (lebih daripada 2000 fg / μl) hepatitis B akut sering menjadi kronik.

Sistem ujian komersial yang dikenali untuk menilai kepekatan DNA HBV melaksanakan prinsip analisis PCR yang kompetitif diikuti oleh skim hibridisasi untuk menentukan produk penguatan (Roche, NPF Liteh). Pendekatan ini didasarkan pada memperkenalkan ke dalam sampel klinikal piawaian dalaman kepekatan yang diketahui yang secara kualitatif berbeza daripada matriks yang akan ditentukan. Selepas PCR, kepekatan HBV DNA dalam bahan ujian dikira berdasarkan kepekatan standard dalaman dan nisbah pengumpulan produk penguatan standard dalaman dan matriks yang akan ditentukan.

Pada masa ini, pembangunan kaedah untuk diagnosis makmal hepatitis B adalah untuk mewujudkan sistem ujian komersial untuk mengenal pasti strain HBV mutan penting klinikal, serta penggunaan alat optik baru (biosensor) untuk diagnosis bersepadu jangkitan HBV (protein virus, antibodi dan DNA HBV)

Serodiagnosis Hepatitis C

Virus hepatitis C (virus hepatitis C, HCV) adalah RNA yang mengandungi virus hepatotropik dan limfhotropik yang dimiliki oleh keluarga Flaviviridae. Genom virus ini diwakili oleh satu molekul RNA (+) tunggal yang mengukur kira-kira 9,500 pangkal, mengarang protein struktur dan bukan struktur (Rajah 6).

Rajah. 6. Skim RNA genomik HCV dan sintesis protein virus

Protein struktur termasuk protein teras (teras) dan glikoprotein sampul (E1 dan E2). Rantau bukan struktur adalah kompleks protein dengan aktiviti enzimatik, terutamanya RNA-bergantung - RNA polimerase. Selain protein virus, di luar virion dilindungi dengan membran lipid yang terdiri daripada organisme hayat berkepadatan rendah lipoprotein (Rajah 7).

Rajah. 7. Rajah struktur virion virus hepatitis C.

Sehingga tahun 1990, CGN-A-Ni-B dengan penghantaran parenteral didiagnosis berdasarkan peningkatan aktiviti ALT serum selama 6 bulan, tanpa ketiadaan penanda hepatitis virus yang lain. Walau bagaimanapun, dalam sesetengah pesakit dengan hepatitis C kronik, tahap ALT tidak meningkat. Dalam diagnostik moden hepatitis C, peranan utama diberikan kepada penentuan antibodi kepada HCV dan pengesanan RNA HCV.

Tidak seperti hepatitis B, di mana antigen virus dan antibodi kepada mereka boleh dikesan, dengan hepatitis C, hanya antibodi yang dikesan oleh ELISA. Antigen HCV, jika mereka memasuki darah, dalam kuantiti yang tidak terperangkap. Mereka hanya boleh didapati dalam tisu hati menggunakan kaedah penyelidikan imunohistokimia. Ini mengehadkan keupayaan untuk menilai kursus dan aktiviti proses berjangkit.

Anti-HCV tidak menunjukkan replikasi virus yang berterusan, dan mungkin merupakan tanda jangkitan semasa dan masa lalu. Ia juga perlu mengambil kira bahawa penderma anti-HCV, yang tidak semestinya menunjukkan jangkitan HCV, dapat dikesan dalam penerima yang telah ditransfusikan dengan darah yang dijangkiti. Pada pesakit hepatitis C kronik, anti-HCV didapati dalam darah bukan sahaja dalam bentuk bebas, tetapi juga dalam komposisi kompleks imun yang beredar.

Antibodi dibentuk untuk setiap protein virus yang terletak di kawasan struktur dan bukan struktur genom virus. Ini menentukan kekhususannya yang berbeza dan, dengan itu, maklumat diagnostik yang berbeza. Untuk pemeriksaan hepatitis C, kaedah ELISA digunakan, dan kaedah imunoblot (RIBA) digunakan sebagai ujian pengesahan. Terdapat beberapa generasi sistem ujian diagnostik untuk mengesan anti-HCV, berbeza dalam sensitiviti dan spesifisinya (Jadual 4).

Jadual 4. Perbandingan pelbagai sistem ujian immunoassay enzim diagnostik yang berbeza untuk mengesan antibodi kepada HCV.

* Sistem ujian generasi ke 4 mengandungi antigen virus sintetik dan rekombinan, saiz yang mungkin berbeza daripada serpihan generasi ke-3.

Sistem ujian diagnostik pertama berdasarkan pengesanan antibodi ke C-100-3 telah dibangunkan pada tahun 1989 di makmal M. Houghton dan dengan cepat menjadi di mana-mana. Ia memungkinkan untuk menjebak antibodi di zon yang mencirikan hanya 12% daripada protein virus di rantau bukanstruktur (NS3, NS4). Di samping itu, antigen rekombinan tiruan C-100-3 tidak sepenuhnya bersamaan dengan protein virus semulajadi, yang menentukan ketahanan immunogeniknya. Antibodi kepada C-protein (Ag core) dengan bantuan antigen C-100-3 tidak terperangkap sama sekali. Ini telah menentukan kekhususan rendah definisi anti-HCV dan sejumlah besar hasil negatif palsu, terutamanya pada pesakit hepatitis C. Di kalangan pesakit yang mengalami hipergiglukolemia yang teruk, sebaliknya, ujian C-100-3 sering kali positif palsu.

Sistem ujian generasi ke-2, yang muncul pada tahun 1991, membolehkan untuk menangkap antibodi untuk protein di zon yang berlainan daripada genom, bukan sahaja tidak struktur, tetapi juga kawasan struktur. Kelebihan mereka adalah, di atas semua, kekhususan tinggi, serta kemungkinan perwakilan yang lebih lengkap dari spektrum antigen HCV. Penggunaan sistem ujian generasi ke-2 memungkinkan untuk meningkatkan pemilihan penderma dan mengurangkan risiko perkembangan hepatitis C. Selepas pemindahan

Apabila menggunakan sistem ujian generasi ke-2, keputusan negatif palsu juga tidak dikecualikan, khususnya, pada pesakit dengan genotip HCV yang tidak biasa untuk rantau ini. Sistem ujian yang paling sempurna dari generasi ke-3 dan ke-4, yang digunakan dalam amalan klinikal sejak tahun 1995.

Sistem ujian generasi ke-3 dan ke-4 membolehkan mengesan anti-HCV dalam 99.7% kes. Dalam sesetengah kes, antibodi kepada HCV mungkin tidak dapat dikesan, sebagai contoh, apabila tindak balas imun ditangguhkan, apabila terapi imunosupresif digunakan atau ketika imunosuppression diperhatikan di latar belakang penyakit onkologi, ketika mengambil ubat, dll. Hasil positif palsu jarang diperhatikan. Untuk mengecualikan mereka, sera yang dipersoalkan dianalisis dalam ujian RIBA atau INNO LIA, yang mengesan antibodi kepada setiap protein HCV individu. Menubuhkan diagnosis hepatitis C dan pesakit pemantauan sering sukar apabila hanya menggunakan kaedah klasik diagnosis makmal. Ini adalah disebabkan oleh keunikan jangkitan HCV, di mana berikut boleh diperhatikan: tanpa gejala semasa peringkat awal penyakit; rendah, seringkali tahap normal ALT; penampilan antibodi lewat (sehingga 2 tahun dari permulaan penyakit); kekurangan sistem ujian yang boleh dipercayai untuk mengesan protein virus. Diagnosis genetik hepatitis C Kedudukan utama dalam diagnosis makmal terhadap jangkitan HCV diduduki oleh kaedah diagnosis genetik, yang membolehkan: secara langsung mengenal pasti bahan genetik virus dalam serum darah dan tisu badan manusia (sel mononuklear, hepatosit, tisu sumsum tulang, dll); menilai aktiviti replikasi virus dalam tisu; mengukur kepekatan virus dalam serum; menubuhkan genotip virus dan memantau kebolehubahan HCV. Pengesanan RNA HCV dalam serum adalah "standard emas" diagnosis, menunjukkan replikasi HCV yang berterusan. Menurut cadangan WHO, diagnosis hepatitis C boleh dibuat berdasarkan pengesanan tiga kali ganda RNA HCV dalam serum pesakit tanpa ketiadaan tanda-tanda hepatitis yang lain. Dalam fasa akut hepatitis, RNA dikesan dalam darah seawal 1-2 minggu selepas jangkitan, i.e. lama sebelum kedatangan anti-HCV. Dengan semua heterogenitas penduduk HCV, semua varian genetik virus mempunyai kawasan konservatif dalam rantau genom 5'-diterjemahkan, dengan pengesanan yang mana sistem ujian diagnostik yang paling terkenal untuk mengesan RNA HCV adalah berdasarkan. Sehingga baru-baru ini, ujian Amplicor HCV Roche, yang mendedahkan 700 salinan RNA per ml, dianggap sebagai ujian yang paling sensitif untuk menentukan RNA HCV. Menggunakan kit Abbott LCx, 200 salinan RNA / ml boleh dikesan. Ujian BDNA Quantiplex (firma "Chiron") saat ini kurang sensitif, tetapi meluas. Sistem ujian domestik adalah berdasarkan penentuan RNA HCV dalam sampel klinikal oleh RT-PCR dengan menggunakan penguatan rantau 5 yang tidak diterjemahkan genom virus (NPF Liteh, teknologi DNA) sebagai sasaran. PCR membolehkan mengesan RNA HCV bukan sahaja dalam serum darah, tetapi juga dalam tisu hati, yang penting dalam mengesahkan peranan HCV dalam pembentukan karsinoma hepatoselular. Dalam kategori pesakit ini, RNA HCV dikesan dalam hepatosit dan dengan ketiadaan anti-HCV dan RNA HCV dalam serum. Ciri khas jangkitan HCV ialah perkembangan manifestasi extrahepatic yang memerlukan pemantauan penyebaran virus dalam tubuh. RNA HCV ditentukan oleh PCR dalam sel darah mononuklear, cryoprecipitates, tisu otak sel, biopsi hati dan tisu otot. Terdapat pendekatan metodologi yang membolehkan bukan sahaja menentukan kehadiran virus dalam tisu, tetapi juga untuk menilai aktiviti replikasi - tindak balas kepada (-) RNA untai. Apabila memantau pesakit dengan hepatitis C kronik, penilaian kuantitatif kandungan virus dalam plasma serum atau darah pesakit dan penentuan genotip HCV memainkan peranan penting. Tindak balas yang paling baik terhadap rawatan antiviral diperhatikan pada individu yang mempunyai viremia rendah dan genotip 2 atau 3. Asas sistem ujian diagnostik yang terkenal untuk mengkuantifikasi kandungan HCV adalah pendekatan berdasarkan prinsip penguatan kompetitif RNA HCV dan piawai dalaman. Pertama sekali, ini adalah firma diagnostik kit Amplicor HCV dari Roche dan NASBA HCV (Organon). Sistem ujian kuantitatif firma "Chiron" bDNA Quantiplex, yang membolehkan anda untuk menganggarkan secara langsung kepekatan matriks dalam sampel dengan intensiti isyarat yang direkodkan. Sistem ujian ini dibezakan oleh kebolehpercayaan, kebarangkalian yang lebih baik, tetapi tahap kepekaan yang lebih rendah berbanding dengan amplifikasi. Pekerja syarikat Gen-Probe dan Diagnostik Bayer menerbitkan hasil pengkeberanaan RNA HCV menggunakan TMA (amplifikasi pengantara transkripsi) dengan ambang kepekaan yang sangat rendah sebanyak 50 naskah / ml. Kebanyakan makmal domestik menggunakan kaedah pengenceran yang mengehadkan untuk menganggarkan kepekatan RNA HCV. Ia adalah berdasarkan pematangan matriks yang dianalisis untuk menghilangkan kepekatan dan pengiraan kepekatan awal berdasarkan hasil penguatan berbanding dengan lengkung penentukuran. Malangnya, kaedah ini tidak cukup tepat, kerana ia tidak mengambil kira kemungkinan menekan reaksi amplifikasi dalam tiub ujian dengan sampel ujian. Walau bagaimanapun, kaedah ini agak mudah dalam pelaksanaan dan masih digunakan dalam beberapa makmal untuk "kegunaan dalaman" (di rumah). Ciri penting ciri HCV ialah heterogenitas genetiknya, sepadan dengan nukleotida nukleus yang sangat pantas. Akibatnya, banyak genotip dan subtipe yang berbeza terbentuk. Menurut klasifikasi Simmonds, 11 jenis dibezakan (genotip 1-11), yang kemudiannya terbahagi kepada 70 subtipe (contohnya, subtipe 1a, 1c, 1c) HCV. Terutamanya banyak subtipe HCV yang terdapat di Afrika dan Asia Tenggara. Ini secara tidak langsung mengesahkan kewujudan HCV di rantau ini selama beberapa abad. Mereka mengandaikan bahawa HCV muncul kemudian di Eropah dan Amerika Utara, yang sepadan dengan bilangan subtipe yang sangat kecil. Untuk amalan klinikal, cukup untuk membezakan antara 5 subtipe HCV: 1a, 1b, 2a, 2b, 3a. Perbezaan geografi yang ditubuhkan dalam pengagihan genotip yang berbeza. Oleh itu, di Jepun, di Taiwan, sebahagiannya di China, genotip 1b, 2a, 2b kebanyakan didaftarkan. Jenis 1b juga dipanggil "Jepun." Di Amerika Syarikat, 1a - genotip "Amerika" berlaku. Di negara-negara Eropah, genotip HCV 1a berlaku, di Selatan Eropah proporsi genotip 1b meningkat dengan ketara. Di wilayah Persekutuan Rusia, genotip utama adalah 1b, yang membentuk 80% daripada populasi virus, dengan kekerapan menurun - 3a, 1a, 2a. Pendekatan metodologi biasa untuk menaip HCV adalah untuk mengesan perubahan genetik ciri (mutasi) di kawasan konservatif genom virus - 5 'tidak diterjemahkan, Cor, NS5A kawasan. Menaip HCV adalah penguatan kawasan genom virus yang dipelihara dan analisis urutan nukleotida tertentu dengan kaedah urutan langsung serpihan amplifikasi oleh PCR berikutnya dengan primer RFLP spesifik (analisis serpihan amplifikasi menggunakan enzim sekatan) pembalikan hibridasi dengan probe jenis khusus (LiPA) Sampel polimer. DNA) Untuk menubuhkan genotip HCV, sistem ujian InnoLiPA HCV komersil ("Innogenetics") telah diwujudkan, pada asasnya Yang berdasarkan prinsip hibridisasi terbalik dengan probe jenis-spesifik (Rajah 8). Genus genus 1-1a 2-1c genotip 3-2a genotip 4-1c + 3a genotip genotip 5-2c 6-1a + 2a genotip 7 kawalan negatif penguat Pic. 8. Menetapkan genotip virus hepatitis C menggunakan sistem ujian HCV InnoLiPA Di beberapa pusat diagnostik yang besar, menaip HCV dilakukan dengan menggunakan kaedah asal, menggunakan PCR dengan primer spesifik jenis, analisis sekatan DNA fragmen (RFLP), atau analisis konformasi fragmen DNA terkandas tunggal (SSCP ). Oleh itu, dalam makmal klinikal dan diagnostik NPF Litekh, genotip virus ditentukan oleh PCR-SSCP (Rajah 9) atau amplifikasi khusus alel dengan primer yang sepadan. Rajah 9. Genotyping RNA HCV oleh analisis SSCP: 1-5 genotip 1 hingga 6 - 1a7 - 2a8 - 3a. Telah ditubuhkan bahawa populasi HCV tidak seragam dalam setiap pesakit. HCV beredar di dalam tubuh manusia sebagai campuran heterogen yang mutan berkaitan mutan yang berkaitan dengan genotip virus yang sama, tetapi mempunyai perbezaan genetik dalam kawasan pembolehubah genom virus. Varian yang berbeza secara genetik HCV yang beredar di dalam badan satu tuan rumah, yang dipanggil "kuasi-spesies". Ketidakstabilan luar biasa dicirikan oleh rantau E2 / NS1, mengandungi hanya 80 nukleotida dan dipanggil rantau hypervariable (HVR1). Adalah dipercayai bahawa ia adalah antibodi kepada protein yang dikodkan oleh genom E2 / NS1 yang telah meneutralkan sifat. Ketidakstabilan luar biasa rantau HVR1 membawa kepada fakta bahawa virus itu berjaya mengubah struktur antigennya, dan sel-sel immunocompetent tidak dapat mengenali antigen terus menerus dikemas kini. Kehadiran "kuasi-spesis" dikaitkan dengan fenomena pelepasan virus dari respon imun, penyingkiran HCV yang tidak berkesan, dan, sebagai akibatnya, kegigihan jangka panjang dalam tubuh manusia dan peratusan jangkitan kronik yang tinggi. Penilaian heterogenitas populasi HCV individu biasanya dijalankan berdasarkan rekod jumlah varian genetik genom virus HVR1 menggunakan analisis heteroduplex atau SSCP. Menurut beberapa penyelidik asing, tahap heterogeniti tinggi populasi HCV individu di lokus HVR menyebabkan HCG C yang lebih teruk dengan corak fluktuasi seperti gelombang dalam tahap transaminasi tisu dan toleransi terhadap terapi antiviral. Penyelidikan sendiri dijalankan berdasarkan Institut Penyelidikan Perubatan Physico-Chemical menunjukkan bahawa pendaftaran perubahan genetik dalam populasi HCV dalam hepatitis C akut tidak mempunyai nilai ramalan, seperti dalam beberapa kes HCG C. Oleh itu, adalah perlu untuk mempertimbangkan heterogen genetik sebagai tindak balas penyesuaian virus yang hidup di perubahan keadaan organisma tuan rumah, seperti yang dibuktikan oleh perbezaan dalam subpopulations HCV hepatosit, sel mononuklear dan serum manusia. Di samping itu, diperhatikan dalam dinamik kepelbagaian genetik populasi individu HCV, bersama-sama dengan perubahan kepekatan virus dalam serum pesakit, boleh berfungsi sebagai penanda tidak langsung aktiviti proses replikasi yang berlaku di sel-sel hati. Diagnostik makmal hepatitis C sedang berkembang di sepanjang jalan untuk mencipta sistem ujian yang lebih baru. Diagnostik Klinik Ortho telah melancarkan kit immunoassay baru untuk menentukan antigen teras dalam darah. Tahap pertama adalah pelepasan antigen dari struktur selular dengan serum lysing, yang kedua ialah penangkapan antigen menggunakan antibodi monoklonal tertentu. Ujian ini amat berguna dalam mengesan tahap awal jangkitan HCV, apabila antibodi spesifik virus belum muncul. Chiron dan Gen-Probe menawarkan ujian amplifikasi baru - ujian NAT - untuk mengesan kedua-dua HCV dan RNA HIV, yang boleh menangkap satu salinan virus dalam bahan yang dianalisis. Sebagai kesimpulannya, adalah perlu untuk menyatakan keperluan untuk pemeriksaan komprehensif pesakit dengan penglibatan kemajuan terkini dalam sains perubatan dan biologi untuk diagnosis yang tepat mengenai hepatitis virus dan pelantikan terapi yang mencukupi kepada pesakit.


Artikel Yang Berkaitan Hepatitis