Analisis kualitatif untuk hepatitis C

Share Tweet Pin it

Tinggalkan komen 7,180

Analisis kualitatif tindak balas rantai polimerase - PCR untuk hepatitis C menentukan kehadiran atau ketiadaan HCV dalam badan. Dalam keadaan makmal, struktur RNA dipelajari, yang akan merangkumi virus. Dalam kes pengesanan virus C, perlu menjalani rawatan, kerana keadaan hati yang diabaikan akan menyebabkan akibat yang serius. PCR berkualiti tinggi juga dilakukan selepas pemulihan untuk mengesahkan ketiadaan antibodi. Ditugaskan untuk pemeriksaan rutin. Dengan kepekatan rendah agen penyebab dalam darah, PCR (kualitatif) tidak dapat mengesan apa-apa, kerana sistem diagnostik mempunyai ambang kepekaannya sendiri. Dalam kes peringkat awal penyakit atau bentuk ringan, PCR ultra diagnostik dilakukan pada peralatan ultra-sensitif.

Apakah virus RNA?

Istilah RNA virus hepatitis C (atau RNA virus hepatitis C) adalah penyakit hati itu sendiri. Virus C mengikat sel sihat tubuh dengan menembusi ke dalam. Lama kelamaan, tersebar di seluruh badan, hanya perlu masuk ke dalam darah. Akibatnya, patogen itu menembusi hati, bersatu dengan sel-selnya dan bekerja keras. Sel-sel hepatik (hepatosit) berfungsi di bawah pengaruhnya, menjalani perubahan, dan dari ini mereka mati. Semakin lama virus C berada di hati, semakin banyak jumlah sel mati. Dari masa ke masa, mengembangkan penyakit berbahaya yang membawa kepada kemerosotan ganas dan kematian.

Jangkitan hati dengan jenis virus ini mungkin tidak nyata secara luaran. Selama bertahun-tahun atau beberapa dekad, orang yang terinfeksi terasa sihat, dan hanya pemeriksaan rawak yang paling sering mendedahkan patologi. Apabila menderma darah untuk hepatitis, sebahagian daripada rantaian RNA (ribonucleic acid), yang merupakan sebahagian daripada gen manusia (DNA), diperiksa. Hasil ujian makmal tidak boleh digunakan untuk perawatan diri, karena ini hanya merupakan indikator. Gambaran yang tepat dan diagnosis lanjut adalah lebih baik ditentukan oleh doktor.

Apabila selesai: petunjuk untuk penyelidikan

Dalam pengesahan HCV, analisis PCR dilakukan (tindak balas rantai polimerase). Kajian PCR membantu untuk mencari bahan patogen dalam struktur RNA dan menetapkan terapi yang berkesan. Dilantik dalam kes berikut:

  • pengesanan tanda-tanda keradangan hati;
  • kajian skrining untuk pencegahan;
  • pemeriksaan orang yang dihubungi;
  • diagnosis hepatitis asal campuran (penentuan patogen utama);
  • menentukan tahap aktiviti pembiakan virus dalam bentuk kronik;
  • sirosis hati;
  • untuk menentukan keberkesanan rawatan yang ditetapkan.
Kajian PCR ditetapkan oleh doktor untuk menentukan keberkesanan rawatan untuk hepatitis.

Terdapat analisis kualitatif serta kuantitatif PCR. PCR kuantitatif menunjukkan nisbah peratusan RNA kepada pembawa virus dalam darah, dan kualitatif menunjukkan kehadiran atau ketiadaan virus. Penunjuk positif kualiti (kehadiran Hepatitis C RNA) juga memerlukan penyelidikan kuantitatif. Tahap kepekatan yang tinggi dari agen penyebab hepatitis C dikaitkan dengan risiko penghantarannya, iaitu, jangkitan orang lain. Tuduhan yang lebih rendah boleh dirawat dengan lebih baik. Jumlah virus RNA dalam darah tidak berkaitan dengan intensiti penyakit ini. Analisis PCR juga dilakukan dalam kes terapi interferon untuk menetapkan tempoh dan kerumitan kursus rawatan.

Ciri-ciri analisis PCR berkualiti tinggi untuk hepatitis C

Analisis kualitatif dengan indeks reaksi rantai polimer diberikan kepada semua pesakit yang mempunyai antibodi untuk hepatitis C dalam darah mereka. Mereka yang telah sakit dan sembuh harus mengambil ujian semula. Ia disyorkan untuk lulus ujian untuk hepatitis B, maka, jika kesimpulan positif, dan untuk hepatitis D. Juga, tindak balas kualitatif yang dianalisis harus dilakukan bersamaan dengan ujian darah yang lain. Analisis akan menunjukkan gambaran lengkap penyebaran virus.

Dari hasil ujian, hanya ujian positif untuk hepatitis C akan kelihatan atau negatif, iaitu kehadiran atau ketiadaan virus. Jika output "dikesan", maka virus itu dan terus aktif. Penetapan "tidak dikesan" menunjukkan ketiadaan virus atau jumlahnya yang kecil. Dengan penunjuk ini, perlu diingat bahawa sensitiviti analisis sistem diagnostik adalah berbeza dan bahawa hepatitis C RNA mungkin masih dalam darah, tetapi tidak ditunjukkan dalam analisis.

Kaedah PCR yang sangat sensitif ultra hepatitis C mendedahkan walaupun dalam jumlah yang sedikit. Kajian hibridensi fluoresen digunakan, yang banyak kali lebih tinggi daripada sistem PCR standard. Kaedah ini digunakan dalam beberapa kes:

  • disyaki bentuk tersembunyi hepatitis C;
  • Diagnostik PCR tidak mengesahkan patogen, tetapi terdapat antibodi;
  • dalam kes pemulihan;
  • untuk mengesan jangkitan awal.
Kembali ke jadual kandungan

Analisis penyahkodan

Penyahkodan PCR HCV mempengaruhi keputusan muktamad ketika membuat diagnosis, khususnya dengan metode ultrametod. Kelemahan utama kajian ini adalah pematuhan ketat kepada keadaan steril untuk sampel dan bahan. Penyimpangan sedikit kadang-kadang menunjukkan kesimpulan analitis yang tidak tepat, merumitkan diagnosis dan rawatan berikutnya. Analisis PCR untuk menentukan RNA hepatitis tidak senantiasa menunjukkan gambaran penyakit, kadang kala ketidakakurasian dibenarkan, dan di kedua-dua arah.

Mendiagnosis virus hepatitis, disyorkan untuk menggunakan peperiksaan yang komprehensif.

Norma petunjuk

Ketiadaan antibodi JgM terhadap hepatitis C virus dalam hasil kajian dianggap sebagai norma dalam analisis reaksi rantai polimerase. Pada masa yang sama, penemuan analisis serologi menunjukkan kehadiran antibodi kepada virus C dan ini juga berada dalam jarak normal. Takrif kualitatif tidak menunjukkan keamatan penyakit, ia hanya mendedahkan agen penyebab hepatitis C dalam RNA. Analisis ini diulangi selepas rawatan untuk mengesahkan pemulihan sebenar.

Penyimpangan

Sekiranya antibodi JgM ke RNA HCV hadir, ini menunjukkan jangkitan yang membina. Penyakit ini pada masa yang sama meneruskan akut atau kronik, yang ditunjukkan dalam pelbagai peringkat. Sekiranya penurunan jumlah antibodi dicatatkan, analisis akan menunjukkan bahawa hasil rawatan dicapai semasa pemulihan. Hanya kes-kes palsu yang positif yang jarang ditemui dalam diagnosis. Mereka ditemui pada wanita semasa kehamilan dan pada orang dengan penyakit berjangkit lain.

Analisis kualitatif PCR untuk hepatitis C

Hepatitis adalah penyakit serius yang mempunyai banyak sebab. Asas pembangunannya adalah kerosakan langsung atau tidak langsung kepada hati. Memandangkan kepentingannya untuk seluruh organisma, seseorang hanya boleh meneka betapa sukarnya patologi itu. Dalam artikel ini kita akan mengkaji secara terperinci ciri-ciri kursus dan diagnosis makmal hepatitis C.

Penyebab penyakit itu adalah agen virus yang merujuk kepada patogen yang mengandungi RNA. Ia mempunyai ciri tersendiri - keupayaan untuk bermutasi, iaitu mengubah strukturnya. Disebabkan ini, jangkitan itu melarikan diri daripada serangan sistem imun dan dalam kebanyakan kes menyebabkan keradangan kronik di hati.

Memandangkan kewujudan subtipe yang berlainan virus, pemilihan ubat-ubatan harus berdasarkan hasil genotip. Walaupun kajian lama penyakit dan struktur HCV, belum ada kemungkinan untuk mengembangkan vaksin tertentu untuk penyakit ini.

Kesukaran diagnosis awal terletak pada kursus asimtomatik hepatitis, akibatnya seseorang melawat doktor pada tahap sirosis. Untuk mengesan penyakit itu dalam masa, pemeriksaan perubatan yang kerap diperlukan. Hanya dengan ujian makmal darah adalah mungkin untuk mengesan HCV dan mencegah pencemaran orang lain. Hakikatnya ialah pembawa jangkitan itu boleh lama tidak meneka tentang patologi dan terus menghantar virus kepada orang yang sihat.

Cara penghantaran

Dalam kebanyakan kes, virus merebak melalui darah, kerana ia mengandungi kepekatan tertinggi agen patogenik. Oleh itu, jangkitan disebarkan:

  • dengan hemodialisis;
  • dengan jarum yang dijangkiti;
  • dalam proses berperang, apabila kulit cedera, dan kontak darah berlaku;
  • dengan pemindahan darah (transfusi darah).

Kebarangkalian jangkitan semasa keintiman tidak signifikan, kerana air mani dan pelepasan vagina mengandungi sejumlah kecil patogen. Risiko jangkitan meningkat dengan ketara sebagai melanggar integriti membran mukus alat kelamin. Ini diperhatikan dengan seks yang agresif dan dubur.

Bagi mod penghantaran menegak, ia dijalankan dalam proses buruh. Dalam tempoh kehamilan janin, patogen tidak boleh menembusi plasenta ke embrio. Dalam kelahiran semulajadi, agen patogenik ditularkan kepada kanak-kanak apabila kulit cedera, apabila hubungan dengan darah ibu diperhatikan.

Selepas penembusan patogen ke dalam organisma yang sihat, sintesis antibodi bermula, yang merupakan perlindungan daripada jangkitan dan kepunyaan struktur imun. Mereka didapati dalam kajian awal seseorang yang menggunakan ELISA.

Tindak balas rantai polimer dilakukan untuk mengesahkan diagnosis pesakit. Ia adalah analisis bahan genetik agen patogen dan penentuan beban virus.

Diagnosis makmal hepatitis C

Diagnosis makmal bermula dengan enzim immunoassay. Tugas utamanya adalah untuk mengesan antibodi yang dihasilkan terhadap patogen. Keberkesanannya adalah hampir 95%. Terima kasih kepada penyelidikan ini, adalah mungkin untuk mengenal pasti pembawa virus di peringkat praplinikal dan hantar untuk pemeriksaan lanjut.

Analisis kualitatif ELISA menunjukkan kehadiran atau ketiadaan imunoglobulin dalam darah pesakit. Hasilnya mungkin "positif" atau "negatif." Setelah menerima jawapan pertama, orang itu dihantar untuk pemeriksaan seterusnya - PCR. Harganya bergantung kepada kualiti reagen dan makmal. Kos tindak balas rantai polimerase dapat mencapai 4 ribu rubel.

Ciri PCR

Menggunakan tindak balas rantai polimerase, walaupun sedikit bahan biologi membolehkan kita untuk menganggarkan beban virus dalam darah, iaitu, untuk mengira kepekatan patogen dalam satu mililiter cecair.

Dengan kemunculan PCR, diagnosis hepatitis telah menjadi lebih mudah. Analisis ini memungkinkan untuk mengenal pasti RNA HCV, untuk menubuhkan tahap proses menular dan penyebaran virus pembawa.

Terdapat beberapa jenis diagnosis genetik:

  1. Analisis kualitatif PCR untuk hepatitis C - mengesahkan kehadiran atau ketiadaan HCV dalam darah subjek:
  2. kuantitatif, yang mana anda boleh mengira kepekatan virus dan menubuhkan tahap penyakit. Hasilnya diberikan dalam IU / ml atau salinan / ml (bergantung kepada makmal);
  3. genotip - diperlukan untuk menentukan genotip HCV. Ini diperlukan untuk pilihan ubat yang paling berkesan dalam kes ini. Analisis secara tidak langsung menunjukkan keparahan proses patologi di hati. Oleh itu, dengan genotip ketiga patogen, steatosis paling sering diperhatikan, asasnya adalah pengumpulan lemak dalam hepatosit (sel-selnya). Di samping itu, jenis virus menjejaskan hasil dan tempoh kursus terapeutik.

Analisis kualitatif PCR untuk hepatitis C

Pertama sekali, bahan biologi diperiksa di makmal untuk kehadiran RNA HCV. Adalah penting untuk diingat bahawa analisis kualitatif terhadap hepatitis C mempunyai tahap kepekaan tertentu, dan oleh itu mungkin tidak selalu memberi jawaban yang tepat. Dalam kes ini, disyorkan untuk menjalankan semula diagnostik makmal dengan menggunakan reagen lain.

Untuk mendapatkan hasil yang boleh dipercayai, sistem ujian dengan kepekaan sekurang-kurangnya 50 IU / ml harus digunakan.

Hasil diagnostik boleh sama ada "positif" atau "negatif". Jika patogen tidak terdapat dalam darah, kajian itu selesai. Jika agen patogenik dikesan dalam sampel, maka beban virus dikuantifikasi.

Satu tindak balas negatif palsu diperolehi apabila proses teknologi dilanggar, sebagai contoh, komponen aktif yang menekan pembinaan salinan patogen yang memasuki medium. Oleh itu, tidak mungkin untuk memaparkan gambar darah yang benar, sebab itu jangkitan seseorang tidak didiagnosis.

Hasil positif palsu boleh diperolehi jika tiub untuk pengumpulan bahan biologi, serta persekitaran untuk kajian tersebut tercemar. Di samping itu, respons analisa seperti itu boleh dilakukan dengan jangkitan campuran, apabila hati terjejas oleh beberapa virus, contohnya, hepatitis C dan D.

Petunjuk untuk penyelidikan kualitatif

Doktor boleh menetapkan pesakit kajian kualitatif mengenai pengenalpastian RNA virus hepatitis C:

  • setelah menerima tindak balas immunoassay enzim positif atau meragukan;
  • untuk pengesahan diagnosis;
  • menentukan viral load;
  • menetapkan peringkat penyakit;
  • diagnosis jangkitan bercampur. Hepatitis C sering menjangkiti hati secara bersamaan dengan virus "D";
  • penentuan taktik terapeutik dengan mempertimbangkan genotip agen penyebab;
  • menilai dinamika perubahan semasa rawatan dengan ubat-ubatan antiviral.

Kelebihan reaksi polimerase termasuk:

  1. sensitiviti tinggi teknik, yang membolehkan untuk menubuhkan fakta jangkitan pada peringkat praslinik;
  2. pengenalpastian bahan genetik patogen, dan bukan antibodi;
  3. kemungkinan menubuhkan subjenis daripada agen patogenik;
  4. kelajuan diagnostik yang tinggi, kerana ia tidak memerlukan pembenihan bahan pada medium nutrien, dan cukup untuk menggunakan sistem ujian tertentu. Seseorang menerima keputusan selepas 5 jam;
  5. serba boleh. Analisis ini membolehkan untuk mengenal pasti sebarang bahan genetik (RNA, DNA). Oleh kerana itu, doktor dapat mengesahkan hepatitis C dan jenis penyakit lain (B);
  6. keupayaan untuk mengesan jangkitan laten.

Penyelidikan kuantitatif

Dalam kajian darah menggunakan tindak balas rantai polimerase dapat menghitung jumlah patogen dalam jumlah tetap bahan biologi. Penunjuk ditunjukkan dalam IU / ml. Melalui analisis, adalah mungkin untuk menentukan tahap penularan pesakit, menentukan tahap proses menular, dan juga menilai keberkesanan terapi dadah.

Atas dasar PCR, pakar memutuskan bahawa dos ubat dapat menghalang pembiakan patogen. Di samping itu, tempoh rawatan dan prognosis antiviral untuk jangka hayat ditentukan. Adalah penting untuk diingat bahawa sistem ujian mempunyai kepekaan yang tinggi, jadi kaedah ini memungkinkan untuk mengesahkan jangkitan seseorang di peringkat praslinik.

Genotyping

Memandangkan keupayaan patogen untuk bermutasi, genotipnya diperlukan untuk menentukan taktik rawatan dan pilihan ubat antiviral. Sebagai contoh, rawatan hepatitis B HCV 1 berlangsung selama 48 minggu, dengan trend positif diperhatikan hanya dalam 60% kes. Genotip 2 dan 3 mempunyai prognosis yang lebih baik. Ubat antiviral ditetapkan selama 8 bulan, dan keberkesanannya mencapai 85%.

Menurut statistik, dalam kebanyakan kes, HCV 1, 2 dan 3 didaftarkan di Persekutuan Rusia.

Apabila menguraikan ujian makmal, jawapan ini boleh ditunjukkan - "tidak ditaip". Ini bermaksud bahawa virus beredar dalam sistem peredaran pesakit dan tidak boleh diiktiraf oleh sistem ujian. Hasil analisis dalam hal ini menunjukkan bahwa patogen tidak tipikal untuk kawasan geografis tertentu.

Bagaimana untuk mendapatkan hasil yang boleh dipercayai?

Untuk kajian kualitatif PCR untuk mengesan RNA agen penyebab hepatitis C menunjukkan keputusan yang betul, adalah perlu untuk mematuhi keperluan untuk menyediakan diagnostik makmal:

  1. pensampelan darah dijalankan pada perut kosong, dan jurang "lapar" tidak sepatutnya lebih pendek daripada 8 jam;
  2. dua hari sebelum kajian, disyorkan untuk berhenti meminum minuman beralkohol dan meninggalkan masakan pedas, berlemak dan asap;
  3. membatalkan pengenalan dadah yang mengurangkan pembekuan darah, misalnya, heparin. Sekiranya ubat-ubatan ini ditetapkan untuk tujuan kesihatan, anda mesti memberitahu doktor. Di samping itu, pakar perlu menyedari pengambilan ubat lain yang boleh menjejaskan hasil penyelidikan makmal;
  4. Pada malam pengumpulan bahan biologi, prosedur physiotherapeutic tidak boleh dijalankan dan tidak boleh dikenakan tenaga fizikal yang teruk.

Hasil analisis dapat dipengaruhi bukan hanya oleh orang yang menyumbangkan darah, tetapi juga oleh faktor-faktor lain, yaitu:

  • pensampelan darah berkualiti rendah;
  • tidak mematuhi saranan pengangkutan bahan biologi;
  • latihan pekerja makmal yang tidak mencukupi;
  • tidak mematuhi teknik penyelidikan;
  • pengenalan antikoagulan (heparin) pada malam pensampelan darah. Kumpulan ubat ini mengurangkan pembekuan, sekali gus memperlahankan kerja reagen.

Di makmal yang berlainan, tindak balas diagnostik mungkin berbeza sedikit, tetapi kesilapan ini tidak menjejaskan hasil akhir kajian.

Perhatian khusus diberikan kepada jenis sistem ujian yang digunakan di makmal. Selalunya keutamaan diberikan kepada reagen dengan sensitiviti yang tinggi. Ini adalah penting untuk pesakit yang mempunyai viral load yang rendah, kerana ia sukar untuk dikesan.

Berapa kerapkah ujian makmal dilakukan?

Reaksi rantai polimer primer dilakukan pada orang yang telah dikesan oleh antibodi immunoassay kepada patogen hepatitis. Dalam kes ini, ia ditugaskan untuk mengesahkan fakta jangkitan seseorang dan menubuhkan tahap penyakit. Di samping itu, analisis ini membolehkan untuk menentukan subtipe virus, yang sangat penting untuk pilihan ubat-ubatan.

Tempoh berikutnya untuk ujian makmal wajib adalah 3 bulan dari permulaan terapi antiviral. Diagnostik memungkinkan untuk menilai keberkesanan ubat-ubatan, laraskan dos atau menggantikannya.

Sebagai tambahan kepada ujian asas, PCR boleh dilakukan pada 4 dan 24 minggu dari permulaan rawatan. Prognosis positif penyakit ini disahkan oleh penurunan dalam viral load selepas tiga bulan terapi. Sebagai contoh, ia harus berkurang dari 1 juta IU / ml kepada beberapa ratus ribu.

Sekiranya kepekatan agen patogenik dalam darah kekal pada tahap yang sama atau bertambah sedikit, ini menunjukkan keberkesanan ubat-ubatan antiviral dan memerlukan penggantiannya. Menggunakan PCR pada akhir rawatan, adalah mungkin untuk mengesahkan pemulihan pesakit.

Untuk menerangkan dengan betul hasil diagnostik makmal, perundingan pakar hepatologi atau pakar penyakit berjangkit diperlukan. Memandangkan frekuensi tinggi tindak balas palsu dalam ELISA, analisis ini digunakan secara eksklusif untuk pemeriksaan awal. Untuk pemeriksaan yang lebih menyeluruh pesakit yang menggunakan reaksi rantai polimerase.

Adakah anda berfikir bahawa mustahil untuk mengubati hepatitis C?

Hari ini, ubat-ubatan moden dari generasi baru Sofosbuvir dan Daclatasvir mungkin menyembuhkan hepatitis C untuk 97-100%. Anda boleh mendapatkan ubat-ubat terbaru di Rusia dari wakil rasmi gergasi farmaseutikal India, Zydus Heptiza. Ubat yang diperintahkan akan dihantar melalui kurier dalam tempoh 4 hari, pembayaran selepas penerimaan. Dapatkan konsultasi percuma mengenai penggunaan ubat-ubatan moden, serta belajar tentang cara memperoleh, anda boleh di laman web rasmi pembekal Zydus di Rusia.

8 cadangan untuk penyediaan penghantaran analisis PCR untuk hepatitis C

HCV atau hepatitis C dianggap sebagai salah satu daripada penyakit yang paling umum di hati. Untuk rawatan untuk menghasilkan kesan yang diharapkan, adalah penting untuk mendiagnosis penyakit pada peringkat awal. Dalam artikel ini, kami akan cuba mencari, menguji 321 analisis virus hepatitis C tentang apa itu, dan cara lulus ujian. Kami juga menjelaskan apa ujian tambahan lain yang diperlukan untuk dihantar kepada pesakit yang doktornya menganggap kehadiran virus hepatitis, dan bagaimana untuk mempersiapkan diagnosis.

Hepatitis C dan ujian

Antara senegara kita, HCV, malangnya, adalah penyakit biasa. Virus Hepatitis C menyumbang kepada perkembangan patologi. Virus ini dihantar dari pesakit kepada orang yang sihat melalui darah dan cecair biologi yang lain.

Terdapat dua bentuk hepatitis C:

Kursus penyakit hati yang paling berbahaya dianggap sebagai manifestasi penyakit kronik. Masalahnya adalah bahawa pesakit mungkin tidak mempunyai gejala yang jelas, jadi dia belajar tentang kehadiran hepatitis di peringkat akhir, ketika ia telah mengembangkan sirosis dan ubat sudah tidak berdaya.

Hanya dalam kes yang jarang berlaku, bentuk HCV kronik memberikan gejala berikut:

  • menguning kulit dan sclera mata;
  • dorongan emetik;
  • mengurangkan atau kekurangan selera makan;
  • keletihan kronik;
  • najis terang dan urin gelap;
  • berat dan sakit di dalam perut.

Untuk mengelakkan proses daripada dikorek, perlu mengiktiraf patologi pada masa dan memulakan rawatan.

Kajian diagnostik yang mengesan penyakit hati manusia, banyak. Sekiranya pesakit mempunyai pakar hepatologi atau penyakit berjangkit yang mengesyaki HCV atau bentuk lain hepatitis virus, dia perlu menjalani peperiksaan yang menyeluruh. Tetapi kebanyakan ujian turun untuk memeriksa darah dari urat untuk pelbagai indikator dan antibodi.

Kaedah diagnostik utama untuk mengesan hepatitis virus:

  • analisis umum dan biokimia darah vena;
  • Diagnostik PCR;
  • analisis untuk kehadiran antibodi kepada virus;
  • ujian air kencing;
  • biopsi kelenjar.

Yang paling bermaklumat adalah diagnosis menggunakan kaedah PCR.

Analisis PCR untuk hepatitis C (ujian 321)

Analisis PCR adalah ujian yang sangat bermaklumat kerana ia menunjukkan hasil dengan peratusan kebarangkalian yang tinggi.

Menggunakan kaedah tindak balas rantai polimerase, diagnostik boleh mengesan sel-sel yang dijangkiti dalam darah pesakit yang dijangkiti, walaupun kepekatan mereka adalah minimum. Dalam masa lima hari selepas jangkitan, kaedah PCR akan menunjukkan hasil yang positif.

Diagnostik PCR dibahagikan kepada dua jenis:

  • analisis kuantitatif untuk mengawal proses rawatan;
  • analisis kualitatif yang mengesahkan atau menafikan adanya jangkitan dalam darah.

Diagnostik PCR berkualiti tinggi

Ujian kualitatif untuk mengesan RNA HCV ditetapkan untuk benar-benar semua pesakit di mana antibodi terhadap hepatitis dikesan semasa diagnosis.

Apabila memecahkan ujian, pesakit mendapat satu daripada dua keputusan:

Hasil daripada "dikesan" adalah mungkin untuk menilai bahawa jangkitan yang menjangkiti sel hati melipatgandakan tubuh pesakit.

Analisis kualitatif, sebagai peraturan, harus dilakukan segera setelah antibodi terhadap virus telah dikesan. Ulangi kualiti Ujian ini ditetapkan sebulan kemudian, serta 3 dan 6 bulan selepas jangkitan pertama dikesan. Dan kemudian, jika rawatan telah membantu dan penyakit itu telah berlalu ke tahap remisi, ujian diambil sekali setahun.

Ujian 321 untuk virus hepatitis dengan analisis kualitatif adalah kaedah penyelidikan ultrasensitif, sensitiviti yang berkisar antara 10 hingga 500 IU / ml. Oleh kerana ujian itu memungkinkan untuk mengesan kandungan virus minimum dalam serum, pakar hepatologi dapat memantau dinamika rawatan.

Tetapi hasil yang negatif tidak mengecualikan 100% kehadiran jangkitan dalam badan orang yang diperiksa.

Darah mesti diambil dari perut pada perut kosong, juruteknik makmal mengkaji plasma darah.

Analisis Kuantitatif PCR

Pilihan diagnostik ini diberikan hanya jika diagnosis sudah disahkan, dan terapi dipilih untuk pesakit. Analisis kuantitatif membantu untuk menjelaskan tahap patologi, serta memilih kursus rawatan yang diingini.

Analisis ini membantu menentukan viral load pada hati. Petunjuk boleh berbeza-beza dari nilai minimum hingga sangat tinggi.

Penyahkodan analisis kuantitatif menunjukkan jumlah virus RNA yang terkandung dalam plasma darah. Jika dalam analisis angka-angka adalah kira-kira 400,000 IU / l, maka kita bercakap tentang beban virus purata pada hati. Apabila hasilnya lebih rendah daripada nilai-nilai yang dinyatakan di atas, mereka bercakap mengenai beban rendah pada hati (peringkat awal penyakit). Dan jika nilai melebihi 800,000 IU / l, maka hati terjejas oleh virus hepatitis, pesakit dalam keadaan serius.

Kebarangkalian hasil yang tidak boleh dipercayai

Analisis ini dapat memberikan hasil positif yang salah dalam kes berikut:

  1. Norma kebersihan dilanggar dan juruteknik makmal menganalisis bahan biologi yang tercemar.
  2. Heparin hadir dalam darah pesakit.
  3. Dalam sampel, sebagai tambahan kepada darah, terdapat bahan kimia atau protein asing.

Sebagai peraturan, makmal moden menjalankan diagnostik menyeluruh menggunakan peralatan moden. Tetapi faktor manusia tidak dapat dikecualikan sepenuhnya. Oleh itu, jika terdapat kecurigaan untuk menerima keputusan yang tidak boleh dipercayai, adalah wajar untuk mengambil semula analisis di makmal lain.

Persediaan untuk ujian

Untuk ujian darah menunjukkan hasil yang boleh dipercayai, cadangan berikut harus diikuti:

  1. Darah untuk penyelidikan harus diambil dari urat pada waktu pagi, dan untuk melakukannya pada perut kosong. Hidangan terakhir tidak lewat daripada lapan jam sebelum diagnosis.
  2. Anda boleh menderma darah pada waktu siang (petang). Tetapi kemudian selang masa antara makan terakhir dan penghantaran biomaterial mestilah sekurang-kurangnya enam jam.
  3. Segera sebelum analisis anda tidak boleh minum jus, kopi, teh dan cecair lain. Hanya air tanpa gas.
  4. Dua hari sebelum tarikh kajian yang dijangkakan, pesakit harus meninggalkan makanan pedas dan berlemak (goreng), serta minuman yang mengandung alkohol (walaupun dalam jumlah minimum).
  5. Selama enam puluh minit sebelum menderma darah, anda mesti berhenti merokok.
  6. Jangan mengesyorkan melakukan ujian diagnostik dengan segera selepas imbasan ultrabunyi, pemeriksaan x-ray atau instrumental, serta prosedur fisiologi atau urutan terapeutik.
  7. Sebelum menderma darah, anda perlu sepenuhnya tenang dan berehat.
  8. 24 jam sebelum diagnosis, pesakit harus menolak untuk mengambil ubat, kerana ubat-ubatan boleh mencetuskan hasil yang salah.

Dan yang paling penting adalah untuk menghapuskan beban emosi dan lagu dengan cara yang positif.

Bagaimana darah diambil?

Darah Venous diambil seperti berikut:

  • Bundle khas dibalut di lengan lengan pesakit, yang menghentikan aliran darah. Tourniquet membantu membuat urat lebih kelihatan, yang menjadikannya lebih mudah bagi jururawat untuk memasukkan jarum;
  • vena dan kawasan di sekelilingnya mesti dibasmi kuman;
  • jarum sangat perlahan dimasukkan ke dalam urat, yang tiub dikumpulkan untuk mengumpul bahan biologi;
  • selepas memasukkan jarum, tourniquet dikeluarkan dari lengan;
  • apabila darah mengisi tiub, jarum perlahan dikeluarkan;
  • tapak tusukan ditutup dengan kapas yang dicelup dalam cecair yang mengandungi alkohol;
  • lengan dengan kapas harus dibengkokkan pada siku dan dibiarkan dalam posisi ini selama 2 - 3 minit. Manipulasi ini akan menghalang kemungkinan hematoma.

Jika juruteknik makmal mengetahui perniagaannya dan menggunakan peralatan perubatan moden, pensampelan darah adalah satu prosedur yang tidak menyakitkan dan selamat.

Phlebitis (urat bengkak) berlaku pada pesakit yang paling jarang berlaku. Tekanan panas yang digunakan untuk kawasan bengkak akan membantu menghilangkan masalah dan membuang bengkak.

Pesakit yang mengidap gangguan pembekuan juga mungkin mengalami masalah tertentu: pendarahan mungkin bermula. Sekiranya terdapat pelanggaran pembekuan darah, ini mesti dilaporkan kepada doktor dan juruteknik makmal. Pakar perubatan akan mengambil langkah pencegahan.

Hasil positif diagnostik PCR dalam amalan sangat jarang berlaku. Tetapi jika ada syak wasangka bahawa hasilnya palsu, lebih baik merebut kembali biomaterial itu. Dan adalah wajar untuk melakukan ini dalam dua makmal bebas daripada satu sama lain.

Apakah RNA Hepatitis C?

Kajian RNA virus hepatitis C adalah prosedur yang paling penting, yang membolehkan anda menetapkan tempoh dan kaedah rawatan pesakit dengan ketepatan yang tinggi. Diagnosis penyakit ini terdiri daripada beberapa ujian darah yang berbeza, seperti:

  • penanda hepatitis C (anti-HCV);
  • penentuan RNA virus hepatitis C (RNA HCV).

Kajian pertama dilakukan pada kecurigaan pertama mengenai hepatitis. Pilihan kedua adalah yang paling penting dalam rawatan RNA HCV, jadi pertimbangkannya dengan lebih terperinci.

Apakah hepatitis C virus?

Hepatitis C virus, atau HCV, adalah penyakit berjangkit yang menjejaskan hati. Jangkitan dengan virus berlaku melalui darah. Anda boleh dijangkiti dengan melakukan pemindahan darah, apabila peraturan untuk mensterilkan instrumen perubatan tidak diikuti. Kurang kerap terdapat kes-kes apabila penyakit itu diperolehi secara seksual atau dari seorang ibu hamil kepada janin. Hepatitis C boleh terdiri daripada 2 jenis.

Hepatitis C kronik adalah yang paling berbahaya. Ia adalah satu bentuk penyakit yang boleh bertahan seumur hidup. Ia membawa kepada masalah yang serius dalam fungsi hati, seperti sirosis atau kanser. Dalam 70-90% orang yang dijangkiti, penyakit itu menjadi kronik.

Bahaya hepatitis C yang paling penting ialah ia berjalan secara rahsia, tanpa tanda-tanda icterik. Pada masa yang sama, mereka sering mengadu demam, mual dan muntah, kelemahan fizikal, peningkatan keletihan, hilang selera dan berat badan. Pada masa yang sama, pada latar belakang pengerasan tisu hati yang kecil, kemerosotan ganasnya sering berlaku. Atas sebab ini, hepatitis C virus sering dipanggil "bom masa" atau "pembunuh penyayang."

Satu lagi ciri penyakit ini adalah perkembangan yang sangat perlahan, dianggarkan dalam berpuluh-puluh tahun.

Sebagai peraturan, mereka yang dijangkiti tidak merasakan apa-apa gejala dan tidak menyedari keadaan sebenar mereka. Sering kali, penyakit hanya dapat dikesan dengan menghubungi doktor mengenai subjek lain.

Pada risiko termasuk:

  • kanak-kanak yang menerima virus hepatitis C daripada ibu mereka;
  • penagih;
  • orang yang menusuk bahagian badan atau tatu dengan instrumen yang tidak steril;
  • menerima darah atau organ penderma (sehingga 1992, apabila hemodialisis tidak dilakukan);
  • orang yang dijangkiti HIV;
  • kakitangan perubatan bersentuhan dengan pesakit yang dijangkiti.

Penentuan RNA Hepatitis C

RNA virus Hepatitis C, yang juga dipanggil Hepatitis C PCR, merupakan kajian bahan biologi (darah), yang boleh digunakan untuk menentukan kehadiran secara langsung genomaterial virus hepatitis itu sendiri dalam badan (sebarang virus tunggal adalah RNA tunggal).

Kaedah ujian utama adalah PCR, atau kaedah tindak balas rantai polimerase.

Terdapat dua jenis ujian darah untuk RNA HCV:

Ujian kualiti

Mengendalikan analisis kualitatif membolehkan menentukan sama ada virus itu ada di dalam darah. Semua pesakit yang telah dijumpai antibodi C-hepatitis mesti lulus ujian ini. Menurut hasilnya, anda boleh mendapat 2 jawapan: virus "hadir" atau "tidak hadir". Dengan hasil ujian yang positif (dikesan), seseorang boleh menilai pembiakan aktif virus yang menjangkiti sel-sel yang sihat di hati.

Ujian yang dijalankan pada PCR berkualiti tinggi disesuaikan dengan sensitiviti tertentu, dari 10 hingga 500 IU / ml. Sekiranya virus hepatitis dikesan dalam darah dengan kandungan tertentu kurang daripada 10 IU / ml, pengesanan virus mungkin menjadi mustahil. Kandungan virus tertentu yang sangat rendah diperhatikan di kalangan pesakit yang mana terapi antivirus telah ditetapkan. Oleh itu, adalah penting bahawa kepekaan sistem perubatan adalah tinggi untuk mendiagnosis dan menetapkan keputusan kualitatif dalam reaksi rantai polimerase.

Seringkali, tindak balas rantai polimerase C-hepatitis dilakukan dengan serta-merta selepas mencari antibodi yang sepadan. Ujian berikutnya, semasa laluan terapi antiviral, dijalankan pada minggu ke-4, ke-12 dan ke-24. Dan analisis lain selepas penamatan HTP dilakukan selepas 24 minggu. Kemudian - sekali setahun.

Ujian kuantitatif

Analisis kuantitatif PCR RNA, yang kadang-kadang dipanggil viral load, menentukan kepekatan (kandungan spesifik) virus dalam darah. Dalam erti kata lain, beban virus ditakrifkan sebagai jumlah tertentu RNA virus, yang boleh dalam jumlah tertentu darah (biasa digunakan 1 ml, sama dengan 1 cm dalam kiub). Unit untuk hasil ujian adalah unit antarabangsa (standard) dibahagikan dengan satu mililiter (IU / ml). Kandungan virus kadangkala muncul secara berbeza, ia bergantung kepada makmal di mana penyelidikan sedang dijalankan. Untuk hepatitis C, penentuan kuantitatif kadangkala menggunakan nilai seperti salinan / ml.

Anda harus memahami bahawa tidak ada ketergantungan khusus dalam keparahan C-hepatitis pada kepekatan ketegangan ini dalam darah.

Semak "pemuatan virus" membolehkan anda menentukan tahap penyakit menular. Oleh itu, risiko menjangkiti orang lain dengan virus meningkat dengan peningkatan kepekatan hepatitis dalam darah. Di samping itu, kandungan virus yang tinggi akan mengurangkan kesan rawatan. Oleh itu, beban virus yang rendah adalah faktor yang sangat baik untuk rawatan yang berjaya.

Di samping itu, ujian hepatitis C dan penentuannya oleh PCR memainkan peranan yang besar dalam penerapan terapi untuk penyakit ini dan menentukan kejayaan rawatan. Berdasarkan keputusan ujian, kursus pemulihan dirancang. Sebagai contoh, jika kepekatan spesifik virus hepatitis terlalu perlahan, terapi antiviral berpanjangan, dan sebaliknya.

Dalam perubatan moden, dipercayai bahawa beban lebih daripada 800000 ME / ml adalah tinggi. Beban melebihi 10,000,000 ME / ml dianggap kritikal. Tetapi pakar dari negara-negara yang berbeza masih tidak mempunyai pendapat yang sama mengenai had virus.

Kekerapan ujian kuantitatif

Secara umum, analisis kuantitatif hepatitis dilakukan sebelum terapi antiviral dan 3 bulan selepas berakhirnya prosedur perubatan untuk menentukan kualiti terapi yang dilakukan.

Akibatnya, ujian kuantitatif akan dianggap sebagai penilaian kuantitatif bagi hasil bagi sampel yang dinyatakan di atas. Akibatnya, keputusan "di bawah julat yang diukur" atau "tidak dikesan dalam darah" akan dikeluarkan.

Parameter kepekaan ujian kualitatif biasanya lebih rendah daripada kepekaan analisis kuantitatif. Transkrip "Hilang" menunjukkan bahawa kedua-dua jenis pemeriksaan tidak menemui RNA virus. Apabila indeks ujian adalah "di bawah jangkauan yang diukur," analisis jenis kuantitatif kemungkinan besar tidak mendapati RNA hepatitis, walaupun ini mengesahkan kehadiran virus dengan kandungan khusus yang sangat kecil.

Hepatitis C dan genotipnya

Genotip RNA virus Hepatitis C mendiagnosis kehadiran jenis genetik yang berbeza dari hepatitis C. Lebih daripada 10 jenis genom virus diketahui sains, tetapi untuk amalan perubatan, ia mencukupi untuk membezakan beberapa genotip yang mempunyai bahagian terbesar di rantau ini. Menentukan jenis genetik memainkan peranan penting dalam memilih masa rawatan, yang sangat perlu jika anda mengambil kira pelbagai kesan sampingan ubat untuk hepatitis.

Kaedah rawatan hepatitis C virus

Satu-satunya cara yang berkesan untuk menyembuhkan virus hepatitis, sebagai peraturan, adalah gabungan 2 ubat: interferon-alpha bersama-sama dengan ribavirin. Secara individu, ubat ini tidak berkesan. Dos ubat yang disyorkan dan masa penggunaan perlu ditetapkan hanya oleh doktor dan secara individu untuk setiap pesakit. Rawatan dengan ubat-ubatan ini boleh mengambil masa 6 hingga 12 bulan.

Hari ini tidak mencipta ubat yang menjamin seratus peratus pemulihan daripada virus itu. Walau bagaimanapun, dengan rawatan yang betul, penyembuhan pesakit boleh mencapai sehingga 90% daripada jumlah kes.

Apakah analisis PCR dan viral load?

Reaksi rantai polimerase (PCR) adalah kaedah makmal untuk menentukan DNA dan RNA. Ia pertama kali diuji hampir setengah abad yang lalu oleh American Carey Mullis. Analisis supersensitif ini dapat mengenal pasti pembawa genom oleh satu molekul sumber tunggal yang terkandung dalam darah, air liur atau kulit.

Kaedah PCR mempunyai prospek yang hebat, digunakan bukan sahaja dalam bidang perubatan, tetapi juga dalam kejuruteraan genetik dan sains forensik. Dengan itu, klonkan dan buat jenis baru DNA, tentukan tahap kekeluargaan. Seorang penjenayah dikenal pasti oleh sekeping epitel yang ditemui di tempat kejadian.

Analisis PCR untuk hepatitis - apa yang mereka lakukan dan mengapa?

Mengapa analisis PCR diperlukan untuk disyaki hepatitis C, apa itu?

Virus Hepatitis C adalah virus RNA yang mengandungi 6 genotip dan sehingga 500 subtipe. Dari semua hepatitis, virus ini mempunyai kapasiti mutasi tertinggi dan mengatasi penghalang perlindungan sistem kekebalan tubuh. Daripada jumlah kes hepatitis, virus C menyebabkan 70% daripada kes-kes bentuk kronik dan 30% daripada sirosis dan kanser hati.

Inti dari kaedah ini: sebahagian daripada gen yang sedang diteliti dengan bantuan enzim dan syarat-syarat khas terpaksa melipatgandakan in vitro. Analisis PCR membolehkan menentukan ketegangan virus, tanpa mana mustahil untuk melakukan rawatan yang berkesan: setiap genotip berbeza dengan ubat-ubatan antiviral. Dua jenis PCR digunakan:

Terapi antiviral memerlukan pemantauan berterusan untuk segera menyesuaikan rawatan, dan untuk tujuan ini tindak balas rantai polimer juga digunakan.

PCR kualitatif dan kuantitatif

PCR kualitatif mengenai hepatitis C memberikan jawapan: adakah terdapat virus C dalam darah pesakit dan yang mana satu. Genotyping diperlukan untuk menjelaskan diagnosis, prognosis penyakit dan menentukan masa rawatan.

Menurut klasifikasi yang diterima, gen ditunjukkan dengan nombor, dan subtipe adalah huruf Latin kecil.

Penyediaan khas berdasarkan bahan semulajadi.

Harga dadah

Ulasan rawatan

Hasil pertama dirasakan selepas seminggu pentadbiran.

Baca lebih lanjut mengenai ubat ini

Hanya 1 kali sehari, 3 titik

Arahan untuk digunakan

Memecahkan jadual virus genotip C:

  • Genotype 1a, 1b, 1c
  • Genotip 2a, 2b, 2c, 2 d
  • Genotype 3a, 3b, 3c, 3d, 3e, 3f
  • Genotype 4a, 4b, 4c, 4d, 4e, 4f, 4g, 4h, 4i, 4j
  • Genotip 5 a
  • Genotip 6 a

Genotip yang paling biasa 1,2,3. Di Rusia, yang paling biasa adalah 1a, 1b, 2, dan 3 jenis virus C.

Genotip virus 1b lebih sukar daripada yang lain untuk dirawat, dalam 90% ia menjadi kronik, di mana 30% dilahirkan semula sebagai kanser hati atau sirosis.

Genotip 2a dan 3a mempunyai tahap kejernihan 33-50%, lebih responsif terhadap terapi antiviral.

Apabila mengesahkan kehadiran virus, ujian PCR kuantitatif dijalankan untuk hepatitis C, yang digunakan untuk mengira bilangan molekul RNA yang terdapat dalam sampel makmal pesakit.

Analisis penyahkodan

Analisis PCR berkualiti tinggi mempunyai dua jawapan:

PCR negatif bermakna bahawa patogen tidak dikesan dalam sampel darah.
Jawapan positif menunjukkan sebaliknya: RNA satu atau genotip lain dari virus C ditemui.

Kebarangkalian kebolehpercayaan hasilnya ialah 95%. Baki 5% adalah kesilapan yang disebabkan oleh seseorang. Kemungkinan ini dibenarkan kerana keperluan yang tinggi untuk kajian ini:

  • peraturan untuk penyimpanan reagen;
  • kelayakan yang sesuai bagi kakitangan perubatan;
  • kesucian biomaterial.

Kit PCR itu sendiri mempunyai ketepatan diagnostik 100%.

PCR kuantitatif RNA Hepatitis C membolehkan penentuan viral load pada tubuh pesakit. Dengan bantuannya:

  • peringkat penyakit dinyatakan (akut, kronik);
  • menentukan keberkesanan rawatan antiviral;
  • Keperluan untuk biopsi hati sedang disiasat.

Dalam sesetengah kes, pesakit tidak merasakan apa-apa tanda penyakit, sementara jangkitan HCV dikesan oleh kaedah PCR. Ini bermakna bahawa penyakit itu adalah pada peringkat awal pembangunan atau dalam bentuk kronik. Kajian tambahan diperlukan untuk menjelaskan diagnosis, untuk permulaan rawatan antiviral awal.

Hepatitis C viral load

Beban virus menunjukkan aktiviti virus hepatik, bagaimana secara aktif pembiakannya berlaku.

Apa ini?

PCR hepatitis C kuantitatif diukur dalam Unit Antarabangsa setiap 1 ml atau IU / ml, yang bermaksud berapa banyak salinan asid ribonukleat sesetengah virus C yang terdapat dalam 1 ml darah yang diuji.

Apa yang tinggi, apa yang rendah?

Analisis beban virus membolehkan untuk menentukan kehadiran RNA virus pada kepekatan 50 IU / ml. Beban virus normal adalah apabila tiada molekul RNA HCV dikesan oleh PCR.

Jadual beban virus:

  • kepekatan rendah 600 IU / ml 3 * 104 IU / ml;
  • kepekatan sederhana dari 3 * 104 IU / ml hingga 8 * 105 MM;
  • tahap tinggi lebih daripada 8 * 105 IU / ml.

Beban viral yang rendah adalah isyarat bahawa rawatan terapeutik dipilih dengan betul, dan prognosis untuk mengubati hepatitis C adalah baik.

Kepekatan tinggi sel-sel virus menunjukkan bahawa penyakit itu berada dalam fasa akut. Darah pesakit adalah sumber jangkitan yang berbahaya.

Beban virus, petunjuk yang berada pada paras purata, mencirikan sama ada peringkat kronik HWS, atau mungkin mempunyai dua trend pembangunan: untuk meningkatkan atau menurun.

Setelah selesai, selepas 6 bulan, kawalan PCR dilakukan.

Kos diagnostik PCR

Gejala berikut harus menjadi perhatian:

  • kelemahan umum;
  • perubahan warna kulit, sklera mata, pelepasan;
  • mual;
  • menurun selera makan;
  • sakit pada otot dan sendi;
  • berat di hipokondrium yang betul;
  • paras darah tinggi AST dan ALT.

Dalam hubungan dengan pesakit yang dijangkiti, dalam tempoh pra operasi, hemodialisis juga disemak pemeriksaan.

Klinik kerajaan melakukan ujian darah untuk PCR secara percuma jika terdapat rujukan dari pakar penyakit berjangkit atau pakar hepatologi.

Perkhidmatan yang dibayar untuk diagnosis PCR disediakan di semua bandar utama di Rusia. Kos bergantung pada jenis ujian, peralatan yang tersedia, masa dan faktor lain.

Analisis PCR berkualiti tinggi di Moscow dan St. Petersburg akan berkurangan dari 600 hingga 900 Rubles. Di kawasan - dari 300 hingga 800 rubel.

Penentuan hepatitis C viral load akan menelan 17.000-22.000 rubel. Untuk jenis lain jangkitan harga penyelidikan kuantitatif: 1200-10000 rubel.

Kelebihan dan kekurangan kaedah PCR

Apakah kelebihan kaedah tindak balas rantaian polimerase terhadap kaedah diagnostik lain?

  1. Pelbagai aplikasi. Menggunakan PCR, menggunakan peralatan standard, anda boleh mengenal pasti virus.
  2. Ketepatan penentuan patogen. Menggunakan pelbagai kombinasi enzim dan teknik analisis, spesifikasi 100% kajian untuk jangkitan yang ditunjukkan dicapai.
  3. Kepekaan yang tinggi. Kaedah ini membolehkan untuk mengesan kehadiran satu molekul virus dalam darah.
  4. Kecekapan. Analisis kualitatif sudah siap dalam beberapa jam, kuantitatif - dalam dua hari.
  5. Diagnosis virus dalam tempoh inkubasi. Semasa PCR, patogen tersebut tidak ditentukan oleh kehadiran antibodi, apabila badan mempunyai tindak balas imun, tetapi sebelum permulaan proses patologi, yang memudahkan rawatan.

Kelemahan PCR adalah hasil kelebihannya:

  • kesucian analisis memerlukan tahap kesucian tertinggi, termasuk udara di dalam makmal, supaya DNA "asing" tidak masuk ke dalam sampel yang sedang diteliti;
  • keperluan yang tinggi untuk kakitangan yang terlibat dalam pengumpulan dan analisis biomaterial.

Analisis kualitatif dan kuantitatif PCR untuk hepatitis C: negatif, positif, transkrip

Hepatitis C adalah penyakit hati virus yang disebabkan oleh HCV flavivirus (dari bahasa Inggeris hepatitis C virus), struktur yang mengandungi molekul asid ribonucleic (RNA). RNA membawa kod genetik virus. Kehadirannya membolehkan analisis PCR untuk hepatitis C.

Bahaya HCV untuk seseorang terletak pada hakikat bahawa tetingkap serologi yang disebut (masa antara jangkitan dan penampilan reaksi dari sistem imun) boleh agak lama - dari beberapa minggu hingga enam bulan.

Ia tidak mengesan jangkitan dan memulakan rawatan mengikut masa.

Bergantung kepada ciri-ciri individu organisma, pembawa HCV dapat nyata dalam bentuk akut, dan juga berlaku sebagai penyakit kronik yang memerlukan rawatan yang panjang dan mahal. Apabila antibodi ke HCV dikesan, satu siri ujian makmal dilakukan, termasuk PCR untuk hepatitis C. Ujian ini dilakukan kepada semua orang yang antibodi darah ke HCV telah dijumpai.

Apakah analisis PCR?

Analisis makmal PCR untuk hepatitis C - kajian bahan biologi untuk mengesan kehadiran flavavirus.

Tindak balas rantai polimerase (sebagai singkatan bermaksud) menunjukkan nilai kuantitatif lesi viral tubuh, ciri kualitatifnya, serta genotip virus yang mengandungi RNA.

Secara asasnya, serta berdasarkan analisis tambahan, kaedah dan tempoh terapi, serta faktor epidemiologi (tahap risiko penghantaran ke pembawa lain) ditentukan.

Apakah Analisis RNA Hepatitis C?

Hepatitis C PCR juga dipanggil analisis RNA (RNA HCV), kerana Flavavirus mengandungi zarah RNA dengan saiz virion 30-60 nm. Salah satu ciri mikroorganisma ini adalah kecenderungan mutasi tinggi.

Setiap subspesies (genotip) virus mempunyai rintangan yang berbeza, yang menyebabkan kaedah rawatan yang berbeza dan sifat prognosis lanjut untuk pesakit.

Bahan biologi (darah vena) diberikan pada perut kosong dan, sebagai peraturan, diuji dengan kaedah PCR Masa Nyata (diagnostik masa sebenar yang sangat sensitif dengan had pengesanan yang lebih rendah sebanyak 15 IU / ml menggunakan sistem automatik tertutup).

Terdapat ujian lain, contohnya COBAS AMPLICOR dengan kepekaan 50-100 IU / ml. Bagi mana-mana ujian makmal, ambang kepekaan adalah penting, i.e. keupayaan reagen untuk mengesan kepekatan minimum virus dalam bahan biologi.

Jenis analisis untuk hepatitis C oleh PCR

Hepatitis C PCR merangkumi tiga komponen penting:

  • analisis kualitatif;
  • analisis kuantitatif;
  • genotyping.

Ujian ini membolehkan anda menentukan sifat viremia, serta ciri genetik patogen. Bergantung pada sensitiviti sistem diagnostik, kajian ini dilakukan sekali, dan kadang-kadang ujian kedua dilakukan dengan reagen yang lebih sensitif untuk mengesahkan atau memperbaiki hasilnya.

PCR berkualiti tinggi hepatitis C

Kualitatif analisis Hepatitis C PCR adalah satu lagi nama umum untuk analisis tindak balas rantai polimerase. Kepekaan standard ujian, yang membolehkan untuk mengesan kehadiran lesi virus, berada dalam lingkungan 10-500 IU / ml.

Analisis PCR negatif untuk hepatitis C menunjukkan bahawa kepekatan virus di dalam darah pesakit adalah di bawah ambang kerentanan sistem diagnostik.

Jika PCR berkualiti tinggi memberikan jawapan "tidak dikesan", maka untuk rawatan berikutnya adalah penting untuk mengetahui ambang kepekaan reagen.

Fraksi protein untuk flavavirus muncul lebih lama.

PCR Kuantitatif Hepatitis C

Kuantitatif PCR hepatitis C adalah penunjuk viral load, yang mencerminkan tahap kepekatan RNA flavavirus dalam tubuh. Ini adalah penunjuk yang menunjukkan berapa banyak serpihan RNA virus yang terkandung setiap sentimeter padu darah. Hasil PCR hepatitis C RNA dalam ujian kuantitatif dalam sistem konvensional ditunjukkan dalam unit antarabangsa per mililiter (IU / ml) dan dapat direkam dalam berbagai cara, contohnya, 1.7 juta atau 1.700.000 IU / ml.

Diagnostik PCR kuantitatif hepatitis C ditetapkan kepada pesakit sebelum memulakan terapi antiviral, dan pada minggu 12 rawatan, untuk menilai keputusan kaedah yang dipilih untuk berurusan dengan HCV. Beban virus membolehkan menentukan tiga petunjuk penting penyakit ini:

  • infektif, iaitu. tahap risiko penghantaran virus dari satu pembawa ke yang lain (semakin tinggi kepekatan RNA flavavirus, semakin tinggi kebarangkalian menjangkiti orang lain, misalnya, melalui hubungan seksual);
  • kaedah dan keberkesanan rawatan;
  • tempoh dan prognosis terapi antiviral (semakin tinggi beban virus, semakin lama rawatan berlangsung).

Diagnostik PCR kuantitatif hepatitis C bergantung kepada jenis ujian makmal dan ambang kepekaannya. Batasan yang lebih rendah dari norma dianggap sebagai penunjuk hingga 600.000 IU / ml, nilai rata-rata berada dalam kisaran 600.000-700.000 IU / ml. Keputusan 800.000 IU / ml dan ke atas dianggap sebagai paras tertinggi virus yang mengandung RNA.

Genotyping

Oleh kerana aktiviti mutasi HCV yang tinggi, semasa ujian, adalah penting untuk mengenal pasti genotip virus yang ada di dalam darah pesakit. Secara keseluruhan, 11 genotip virus hepatitis C telah direkodkan di planet ini, termasuk banyak subspesies (subtipe). Di wilayah Persekutuan Rusia mengagihkan 1,2 dan 3.

RNA PCR Hepatitis C bersama-sama dengan genotip adalah komponen penting dalam analisis, kerana membolehkan doktor menentukan rintangan (rintangan) virus itu, memilih ubat-ubatan yang sesuai dan menetapkan kursus rawatan.

Genotyping juga membolehkan anda secara tidak langsung menentukan keadaan hati. Sebagai contoh, 3 genotip HCV sering diiringi oleh steatosis, di mana lemak terkumpul di dalam sel-sel organ.

Ujian darah untuk PCR untuk hepatitis C harus menghasilkan angka yang menentukan genotip tersebut. Tanggapan makmal boleh mengatakan "tidak ditaip" - dan ini bermakna bahawa virus adalah dalam darah manusia yang tidak dikesan oleh sistem ujian. Ini mungkin menunjukkan bahawa genotip itu tidak tipikal untuk kawasan geografi yang diberikan. Dalam kes ini, anda perlu mengulangi analisis dengan kepekaan yang tinggi terhadap sistem diagnostik.

Pengkodan analisis PCR untuk hepatitis C

Ujian untuk dekripsi kuantitatif hepatitis C PCR boleh berdasarkan pada data di atas. Apabila memperoleh keputusan ujian makmal, data berikut biasanya ditulis:

  • "Found" / "tidak dijumpai" (PCR berkualiti tinggi untuk hepatitis C);
  • bilangan pecahan yang mengandungi RNA, contohnya 831.680 ME / ml (analisis PCR kuantitatif);
  • angka yang menentukan genotip HCV, sebagai contoh - 1, 2, 3, 4;
  • Nama ujian paling kerap adalah Real-time.

Yang paling penting dalam menafsirkan analisis PCR untuk hepatitis C adalah perenggan kedua, yang menunjukkan beban virus, yang menentukan prognosis, kaedah dan tempoh rawatan.

Sekiranya ujian PCR untuk hepatitis C adalah negatif, dan ELISA adalah positif - apakah maksudnya?

Untuk menguraikan ujian makmal, adalah penting untuk menghubungi pakar hepatologi atau pakar penyakit berjangkit yang akan menerangkan maklumat yang diperolehi mengikut jenis sistem diagnostik dan kepekaan ambangnya. Dalam amalan perubatan, terdapat banyak data ujian darah yang boleh mengelirukan seseorang tanpa pendidikan perubatan.

Sebagai contoh, jika ujian untuk hepatitis C PCR adalah negatif, dan ELISA adalah positif, ini mungkin bermakna tiada HCV dalam darah pesakit pada masa ini, tetapi sebelum ini ia mengalami bentuk akut hepatitis C. Adalah dipercayai bahawa ujian imunosorben berkaitan enzim positif (ELISA) menunjukkan bahawa terdapat antibodi dalam darah yang telah dihasilkan selepas pencerobohan virus pada masa lalu. Tetapi dalam amalan perubatan moden, analisis ELISA dianggap tidak dapat dipercayai dan sering memberikan hasil tidak tepat, jadi doktor menggunakannya sebagai pemeriksaan utama. Apabila mendiagnosis penyakit, pakar dipandu dengan tepat oleh ujian PCR.

Video berguna

Video berikut memberikan penerangan yang sangat terperinci dan menarik mengenai intipati kaedah PCR, bagaimana analisis dilakukan:

Kesimpulannya

Untuk analisis PCR untuk hepatitis C, darah vena biasanya diambil. Selalunya terdapat pengambilan bahan biologi berganda - untuk ELISA, dan secara langsung untuk ujian PCR. Untuk keputusan ujian yang betul, pematuhan dengan peraturan asas untuk pensampelan makmal bahan biologi diperlukan:

  • darah untuk analisis diberikan pada separuh pertama hari perut kosong;
  • antara makanan dan pensampelan darah perlu mengambil masa sekurang-kurangnya 8 jam;
  • alkohol dan makanan goreng juga harus dikecualikan sebelum mengambil ujian;
  • pada siang hari sebelum menderma darah, adalah perlu untuk mengelakkan penuaan fizikal yang tinggi.

Keputusan ujian darah biasanya siap pada keesokan harinya.


Artikel Yang Berkaitan Hepatitis