Apakah RNA Hepatitis C?

Share Tweet Pin it

Kajian RNA virus hepatitis C adalah prosedur yang paling penting, yang membolehkan anda menetapkan tempoh dan kaedah rawatan pesakit dengan ketepatan yang tinggi. Diagnosis penyakit ini terdiri daripada beberapa ujian darah yang berbeza, seperti:

  • penanda hepatitis C (anti-HCV);
  • penentuan RNA virus hepatitis C (RNA HCV).

Kajian pertama dilakukan pada kecurigaan pertama mengenai hepatitis. Pilihan kedua adalah yang paling penting dalam rawatan RNA HCV, jadi pertimbangkannya dengan lebih terperinci.

Apakah hepatitis C virus?

Hepatitis C virus, atau HCV, adalah penyakit berjangkit yang menjejaskan hati. Jangkitan dengan virus berlaku melalui darah. Anda boleh dijangkiti dengan melakukan pemindahan darah, apabila peraturan untuk mensterilkan instrumen perubatan tidak diikuti. Kurang kerap terdapat kes-kes apabila penyakit itu diperolehi secara seksual atau dari seorang ibu hamil kepada janin. Hepatitis C boleh terdiri daripada 2 jenis.

Hepatitis C kronik adalah yang paling berbahaya. Ia adalah satu bentuk penyakit yang boleh bertahan seumur hidup. Ia membawa kepada masalah yang serius dalam fungsi hati, seperti sirosis atau kanser. Dalam 70-90% orang yang dijangkiti, penyakit itu menjadi kronik.

Bahaya hepatitis C yang paling penting ialah ia berjalan secara rahsia, tanpa tanda-tanda icterik. Pada masa yang sama, mereka sering mengadu demam, mual dan muntah, kelemahan fizikal, peningkatan keletihan, hilang selera dan berat badan. Pada masa yang sama, pada latar belakang pengerasan tisu hati yang kecil, kemerosotan ganasnya sering berlaku. Atas sebab ini, hepatitis C virus sering dipanggil "bom masa" atau "pembunuh penyayang."

Satu lagi ciri penyakit ini adalah perkembangan yang sangat perlahan, dianggarkan dalam berpuluh-puluh tahun.

Sebagai peraturan, mereka yang dijangkiti tidak merasakan apa-apa gejala dan tidak menyedari keadaan sebenar mereka. Sering kali, penyakit hanya dapat dikesan dengan menghubungi doktor mengenai subjek lain.

Pada risiko termasuk:

  • kanak-kanak yang menerima virus hepatitis C daripada ibu mereka;
  • penagih;
  • orang yang menusuk bahagian badan atau tatu dengan instrumen yang tidak steril;
  • menerima darah atau organ penderma (sehingga 1992, apabila hemodialisis tidak dilakukan);
  • orang yang dijangkiti HIV;
  • kakitangan perubatan bersentuhan dengan pesakit yang dijangkiti.

Penentuan RNA Hepatitis C

RNA virus Hepatitis C, yang juga dipanggil Hepatitis C PCR, merupakan kajian bahan biologi (darah), yang boleh digunakan untuk menentukan kehadiran secara langsung genomaterial virus hepatitis itu sendiri dalam badan (sebarang virus tunggal adalah RNA tunggal).

Kaedah ujian utama adalah PCR, atau kaedah tindak balas rantai polimerase.

Terdapat dua jenis ujian darah untuk RNA HCV:

Ujian kualiti

Mengendalikan analisis kualitatif membolehkan menentukan sama ada virus itu ada di dalam darah. Semua pesakit yang telah dijumpai antibodi C-hepatitis mesti lulus ujian ini. Menurut hasilnya, anda boleh mendapat 2 jawapan: virus "hadir" atau "tidak hadir". Dengan hasil ujian yang positif (dikesan), seseorang boleh menilai pembiakan aktif virus yang menjangkiti sel-sel yang sihat di hati.

Ujian yang dijalankan pada PCR berkualiti tinggi disesuaikan dengan sensitiviti tertentu, dari 10 hingga 500 IU / ml. Sekiranya virus hepatitis dikesan dalam darah dengan kandungan tertentu kurang daripada 10 IU / ml, pengesanan virus mungkin menjadi mustahil. Kandungan virus tertentu yang sangat rendah diperhatikan di kalangan pesakit yang mana terapi antivirus telah ditetapkan. Oleh itu, adalah penting bahawa kepekaan sistem perubatan adalah tinggi untuk mendiagnosis dan menetapkan keputusan kualitatif dalam reaksi rantai polimerase.

Seringkali, tindak balas rantai polimerase C-hepatitis dilakukan dengan serta-merta selepas mencari antibodi yang sepadan. Ujian berikutnya, semasa laluan terapi antiviral, dijalankan pada minggu ke-4, ke-12 dan ke-24. Dan analisis lain selepas penamatan HTP dilakukan selepas 24 minggu. Kemudian - sekali setahun.

Ujian kuantitatif

Analisis kuantitatif PCR RNA, yang kadang-kadang dipanggil viral load, menentukan kepekatan (kandungan spesifik) virus dalam darah. Dalam erti kata lain, beban virus ditakrifkan sebagai jumlah tertentu RNA virus, yang boleh dalam jumlah tertentu darah (biasa digunakan 1 ml, sama dengan 1 cm dalam kiub). Unit untuk hasil ujian adalah unit antarabangsa (standard) dibahagikan dengan satu mililiter (IU / ml). Kandungan virus kadangkala muncul secara berbeza, ia bergantung kepada makmal di mana penyelidikan sedang dijalankan. Untuk hepatitis C, penentuan kuantitatif kadangkala menggunakan nilai seperti salinan / ml.

Anda harus memahami bahawa tidak ada ketergantungan khusus dalam keparahan C-hepatitis pada kepekatan ketegangan ini dalam darah.

Semak "pemuatan virus" membolehkan anda menentukan tahap penyakit menular. Oleh itu, risiko menjangkiti orang lain dengan virus meningkat dengan peningkatan kepekatan hepatitis dalam darah. Di samping itu, kandungan virus yang tinggi akan mengurangkan kesan rawatan. Oleh itu, beban virus yang rendah adalah faktor yang sangat baik untuk rawatan yang berjaya.

Di samping itu, ujian hepatitis C dan penentuannya oleh PCR memainkan peranan yang besar dalam penerapan terapi untuk penyakit ini dan menentukan kejayaan rawatan. Berdasarkan keputusan ujian, kursus pemulihan dirancang. Sebagai contoh, jika kepekatan spesifik virus hepatitis terlalu perlahan, terapi antiviral berpanjangan, dan sebaliknya.

Dalam perubatan moden, dipercayai bahawa beban lebih daripada 800000 ME / ml adalah tinggi. Beban melebihi 10,000,000 ME / ml dianggap kritikal. Tetapi pakar dari negara-negara yang berbeza masih tidak mempunyai pendapat yang sama mengenai had virus.

Kekerapan ujian kuantitatif

Secara umum, analisis kuantitatif hepatitis dilakukan sebelum terapi antiviral dan 3 bulan selepas berakhirnya prosedur perubatan untuk menentukan kualiti terapi yang dilakukan.

Akibatnya, ujian kuantitatif akan dianggap sebagai penilaian kuantitatif bagi hasil bagi sampel yang dinyatakan di atas. Akibatnya, keputusan "di bawah julat yang diukur" atau "tidak dikesan dalam darah" akan dikeluarkan.

Parameter kepekaan ujian kualitatif biasanya lebih rendah daripada kepekaan analisis kuantitatif. Transkrip "Hilang" menunjukkan bahawa kedua-dua jenis pemeriksaan tidak menemui RNA virus. Apabila indeks ujian adalah "di bawah jangkauan yang diukur," analisis jenis kuantitatif kemungkinan besar tidak mendapati RNA hepatitis, walaupun ini mengesahkan kehadiran virus dengan kandungan khusus yang sangat kecil.

Hepatitis C dan genotipnya

Genotip RNA virus Hepatitis C mendiagnosis kehadiran jenis genetik yang berbeza dari hepatitis C. Lebih daripada 10 jenis genom virus diketahui sains, tetapi untuk amalan perubatan, ia mencukupi untuk membezakan beberapa genotip yang mempunyai bahagian terbesar di rantau ini. Menentukan jenis genetik memainkan peranan penting dalam memilih masa rawatan, yang sangat perlu jika anda mengambil kira pelbagai kesan sampingan ubat untuk hepatitis.

Kaedah rawatan hepatitis C virus

Satu-satunya cara yang berkesan untuk menyembuhkan virus hepatitis, sebagai peraturan, adalah gabungan 2 ubat: interferon-alpha bersama-sama dengan ribavirin. Secara individu, ubat ini tidak berkesan. Dos ubat yang disyorkan dan masa penggunaan perlu ditetapkan hanya oleh doktor dan secara individu untuk setiap pesakit. Rawatan dengan ubat-ubatan ini boleh mengambil masa 6 hingga 12 bulan.

Hari ini tidak mencipta ubat yang menjamin seratus peratus pemulihan daripada virus itu. Walau bagaimanapun, dengan rawatan yang betul, penyembuhan pesakit boleh mencapai sehingga 90% daripada jumlah kes.

Penanda Hepatitis C dan tafsiran hasil kuantiti HCV RNA

Baru-baru ini, pencarian "analisis kuantitatif hepatitis dengan penyahkodan" semakin muncul dalam enjin carian sumber Internet.

Sesungguhnya, virus hepatitis merebak dan berbahaya, penyakit ini memberi kesan kepada hati. Namanya berasal dari lat. hepatitis adalah keradangan hati. Jangkitan berlaku melalui darah atau secara seksual, lebih kerap, orang dewasa berumur antara 25 dan 50 tahun.

Terdapat beberapa jenis penyakit ini. Hepatitis C tidak mempunyai keterukan yang terang, tetapi dalam 40-70% kes menjadi kronik, boleh menyebabkan sirosis dan kanser. Penyakit ini memerlukan diagnosis dan tafsiran data yang tepat, yang tekniknya telah dibangunkan. Salah satunya adalah analisis RNA RNA HCV oleh PCR.

RNA analisis RNA HCV oleh PCR

RNA (asid ribonukleat) adalah sejenis makromolekul, salah satu komponen sel hidup. RNA bertanggungjawab untuk mengesan maklumat genetik. Virus hepatitis C mengandungi molekul RNA dan cenderung bermutasi. 6 dari subtipenya diketahui, serta banyak subtipe.

Penyakit dalam peringkat kroniknya membawa kepada fibrosis hati - tisu penghubung berkembang, struktur organ secara beransur-ansur terganggu. Fibrosis dapat menerima rawatan tepat pada masanya, kerana hati belum menjalani proses yang merosakkan. Tidak seperti sirosis, penyakit hati yang tidak dapat dipulihkan kembali ke mana fibrosis boleh berkembang tanpa mengambil langkah-langkah yang diperlukan dalam masa.

Seseorang yang disyaki mempunyai virus hepatitis B ditentukan oleh antibodi kepadanya. Sekiranya mereka tidak, penyakit ini tidak termasuk, jika mereka ada, mereka menggunakan kaedah PCR (tindak balas rantai polimer). Dalam biologi molekul, ia adalah eksperimen, tetapi menduduki tempat utama di antara kaedah mendiagnosis penyakit berjangkit. Dengan itu, anda boleh meningkatkan kepekatan serpihan molekul dalam sampel dengan ketara. 10 hari selepas jangkitan, RNA sudah mungkin untuk menentukan dalam darah.

Kaedah ini adalah satu-satunya yang dapat mengesan penyakit ini pada peringkat awal. Dalam cara lain (contohnya, melalui ujian darah biokimia) ini tidak dapat dilakukan, kerana hati tidak terjejas.

Kaedah ini ditemui pada tahun 1993 oleh ahli biokimia Kerry Mullis, yang mana beliau memenangi Hadiah Nobel. PCR adalah satu kejayaan dalam bidang perubatan dan sains, kerana ia membenarkan untuk mengenal pasti jangkitan dalam darah dan bahan biologi manusia yang lain dengan cepat dan tepat. Dengan kata lain, kaedah ini telah mempercepatkan perkembangan diagnosis penyakit berjangkit.

Analisis RNA RNA HCV oleh PCR adalah berkesan kerana sebab-sebab berikut:

  • mempunyai kepekaan yang baik - walaupun sejumlah kecil virus dalam darah dikesan;
  • virus itu sendiri ditentukan, bukan produk sampingan yang dibuat olehnya;
  • Jenis patogen ditentukan.

Perbezaan dalam analisis kuantitatif RNA HCV dari kualitatif

Kaedah PCR merangkumi dua cara utama untuk mengkaji bahan biologi untuk mencari virus hepatitis C:

Kajian ini mempunyai tugas yang berbeza.

Analisis kualitatif hepatitis dengan penyahkodan mengesahkan kehadiran virus selepas antibodi terhadap penyakit itu telah dijumpai dalam darah. Sekiranya kajian memberikan hasil yang positif, maka penyakit ini dikesan. Dalam erti kata lain, seseorang dijangkiti. Sekiranya hasil negatif diperoleh, ini bermakna bahawa orang itu tidak dijangkiti, atau kepekatan virus terlalu kecil. Kepekatan ini tidak dikesan dengan cara ini.

Di samping itu, gambaran klinikal penyakit itu berdasarkan penanda hepatitis C dan tafsiran analisis. Penanda utama adalah imunoglobulin (antibodi) M dan G. Kehadiran mereka di dalam darah pesakit menunjukkan proses bukan ciri untuk organisma yang sihat. Berdasarkan kehadiran antibodi ini, pesakit, sebagai peraturan, menetapkan diagnosis primer.

Analisis kuantitatif ditetapkan untuk pengesanan utama antibodi dan, jika perlu, rawatan.

Juga, analisis kuantitatif hepatitis C ditetapkan untuk pengesanan hepatitis bercampur (jangkitan dengan beberapa virus sekaligus).

Analisis kuantitatif dengan pengekodan dilakukan untuk:

  • penjelasan diagnosis akhir;
  • membina ramalan mengenai perjalanan penyakit dan rawatannya - lanjutan, pengurangan rawatan atau perubahan taktik;
  • terapi pengawasan.

Agar hasilnya benar, anda mesti mengikut rejim yang ditetapkan sebelum menderma darah:

  • datang ke makmal pada perut kosong, kali terakhir anda boleh makan 8 jam sebelum prosedur;
  • dua hari sebelum alkohol kajian, makanan berlemak dan goreng dilarang;
  • ultrasound, urut, fisioterapi sebelum kajian tidak dapat dijalankan;
  • ubat dilarang untuk hari ini, jika tidak mungkin untuk membatalkan pengambilan ubat tertentu, ini dilaporkan sebelum sampel darah;
  • sebelum prosedur, disyorkan untuk mengurangkan beban fizikal dan saraf sebanyak mungkin.

Pemenuhan keperluan ini akan menjadi kunci untuk mendapatkan hasil analisis kuantitatif yang tepat mengenai hepatitis C.

Tafsiran analisis kuantitatif

Selepas mendapat penunjuk analisis kuantitatif, ia perlu menguraikan keputusan ujian untuk hepatitis C. Hasilnya dikira dalam unit IU / ml dan dalam salinan per ml. Untuk mendapatkan keputusan, ditukar menjadi salinan, menggunakan beberapa teknik.

  • Monitor HCV (faktor penukaran kepada ME - 2.7);
  • LCX HCV RNA (faktor penukaran kepada ME - 3.8).

Jadual Tafsiran analisis kuantitatif RNA HCV oleh PCR.

RNA analisis virus hepatitis c

"Mengenal pasti gen virus hepatitis C (HVC) dalam darah pesakit adalah tahap kedua diagnosis makmal patologi berjangkit ini. Untuk mengesan patogen yang tidak mempunyai membran sel dan, dengan itu, antigen permukaan, kaedah reaksi rantai polimerase digunakan. Dengan menggunakan kaedah ini, molekul secara langsung ditentukan, di mana semua maklumat genetiknya dikodkan - RNA.

RNA - Asid ribonukleat, bersama dengan DNA, adalah sebahagian daripada sel-sel semua organisma hidup. Virus hepatitis C mengandungi molekul RNA dan mempunyai keupayaan untuk memutuskannya.

Ujian genom HVC biasanya ditetapkan selepas ujian darah biokimia dilakukan dan tindak balas positif terhadap antibodi (anti-HVC) diperolehi.

Apa maksudnya?

Kajian antibodi terhadap HVC adalah pemeriksaan, iaitu, ia boleh digunakan untuk memeriksa populasi besar (doktor, wanita hamil, pesakit hospital, penderma, pengguna dadah suntikan, dijangkiti HIV). Hasil negatif daripada analisis makmal anti-HVC menunjukkan bahawa tiada tindak balas imun terhadap virus itu dikesan dalam darah pesakit. Hasil negatif boleh diperolehi dalam kes seperti berikut:

Sekiranya seseorang tidak pernah dijangkiti hepatitis C.

Sekiranya sensitiviti sistem ujian makmal adalah lebih rendah daripada kepekatan anti-HVC.

Sekiranya jangkitan berlaku kurang dari 2 bulan yang lalu dan anti-HVC dalam darah tidak cukup untuk ditentukan. Apabila tindak balas negatif palsu disebabkan oleh faktor manusia.

Sekiranya hasilnya adalah antibodi kepada HVC yang dijumpai di pesakit, ini bermakna virus hepatitis C berada di dalam tubuh pesakit pada masa kajian atau berada dalam darah beberapa lama dahulu. Dengan hasil positif terhadap anti-HVC, terdapat keperluan untuk kajian makmal tambahan yang akan mengesan bahan genetik patogen itu sendiri, menentukan kepekatan gennya (viral load, viremia) dan menubuhkan genotip.

Analisis RNA Virus Hepatitis C

Genom HVC di bawah keadaan makmal boleh dikesan menggunakan beberapa kajian:

DNA bercabang (p-DNA);

penguatan transkripsi (TMA);

reaksi rantai polimerase (PCR).

Kaedah p-DNA adalah cara yang murah dan mudah untuk mengesan genom virus dalam sebilangan besar orang yang diperiksa. Kelemahan utamanya adalah kepekaan yang rendah: ia mendedahkan HVC hanya apabila kepekatannya melebihi 500 IU / ml.

Kaedah penguatan transkrip mengesan asid nukleat virus dalam serum. Analisis ini mempunyai sensitiviti tinggi (5-10 IU / ml), tetapi ia belum lagi cukup dimasukkan ke dalam amalan makmal di mana-mana.

Kaedah PCR di Rusia adalah peperiksaan makmal yang paling biasa dan boleh diakses dengan sensitiviti tinggi (dari 50-60 IU / ml).

Kajian PCR dilakukan di mana-mana makmal klinikal yang mempunyai akreditasi yang sesuai. Satu kaedah diagnostik yang sangat penting, yang mempengaruhi keputusan analisis, adalah kepekaan sistem ujian yang digunakan di makmal. Sebagai contoh, sensitiviti diagnostik sebanyak 60 IU / ml, seperti dalam Invitro Laboratories, membenarkan pengesanan RNA virus 3 bulan selepas jangkitan. Pada sensitiviti rendah sistem ujian, gen patogen tidak dapat dikesan walaupun 4 bulan selepas jangkitan.

RNA virus Hepatitis C: Kaedah PCR

Kaedah PCR mempunyai banyak kelebihan berbanding ujian makmal lain untuk mengesan gen HVC:

kepekaan yang tinggi. Kaedah ini membolehkan untuk menentukan bahan genetik patogen walaupun dengan kepekatan minimum dalam sampel;

kekhususan yang hebat. Mengenal pasti gen virus genotip tertentu di antara pelbagai DNA dan RNA patogen lain, yang membolehkan genotip patogen;

kelajuan pegangan. Ketiadaan proses penanaman patogen yang panjang memendekkan masa untuk mendapatkan hasil sehingga beberapa jam; universiti analisis.

Prosedur penyelidikan universal membolehkan penggunaan serentak satu sampel darah manusia untuk mengesan bahan genetik patogen yang berbeza. Kelebihan ini memungkinkan untuk mempertimbangkan PCR sebagai "standard emas" untuk diagnosis makmal hepatitis C virus bersama dengan immunoassay enzim untuk anti-HVC.

PCR adalah kajian yang digunakan untuk menentukan gen HVC dalam darah individu. Kajian ini terdiri daripada beberapa peringkat:

Pensampelan biomaterial.

Berulang kali meningkatkan kepekatan salinan RNA dalam sampel yang dipilih.

Pengesanan bahan genetik menggunakan sistem ujian khas.

Selepas mengambil darah vena dari pesakit, secara artifisial memulakan proses pelbagai replikasi (penguatan, penyalinan) gen HVC dilakukan.

Untuk melakukan ini, dengan cara tertentu, ubah suhu di dalam tiub dengan biomaterial beberapa kali. Apabila bilangan salinan RNA dalam tiub ujian mencapai nilai yang dikehendaki, lakukan pengesanan patogen menggunakan diagnostik ujian khas.

kualitatif (mengesan kehadiran virus),

kuantitatif (menentukan kepekatan gen virus per unit volume)

genotip (menetapkan genotip patogen).

RNA hepatitis C: Analisis kualitatif

Tugas PCR yang berkualiti adalah untuk menentukan kehadiran HVC dalam biomaterial yang dibentangkan. Kajian ini biasanya dijalankan untuk pemeriksaan diagnosis penyakit atau pengesanan pengangkutan. Berikannya selepas anti-HVC dikesan oleh ELISA.

Untuk mendiagnosis hepatitis C, adalah mencukupi untuk mengesan bahan genetik HCV secara kualitatif, iaitu, tanpa mengira kepekatannya dalam jumlah darah. Hasil PCR berkualiti tinggi boleh: "RNA dikesan" atau "RNA tidak dikesan."

Ketepatan kaedah itu bersamaan dengan 95%. Pada masa yang sama, ketepatan diagnostik ujian sendiri mencapai 100%, dan 5% adalah faktor manusia, yang selalu ada dalam kajian makmal. Untuk mengelakkan analisa negatif palsu, terutama pada orang yang mempunyai viremia rendah, kepekaan tinggi terhadap sistem diagnostik yang digunakan dalam kajian ini adalah perlu. Kepekaan sistem ujian tidak boleh kurang daripada 60 IU / ml.

RNA hepatitis C: Analisis Kuantitatif

Analisis kuantitatif ditetapkan apabila anda perlu mengetahui tahap viremia dalam tubuh manusia. Petunjuk untuk menjalankan kajian ini adalah:

hasil positif PCR berkualiti tinggi, dengan syarat pengesanan antibodi kepada virus;

menubuhkan tahap patologi;

penentuan beban virus dalam hepatitis;

pilihan gabungan ubat-ubatan antiviral;

memantau tindak balas virologi terhadap terapi antiviral;

penilaian kebarangkalian peralihan dari hepatitis C akut ke kronik.

Hasil analisis dinyatakan dalam IU / ml (unit internasional dalam 1 ml serum) atau dalam salinan / ml (jumlah salinan gen virus dalam 1 ml serum). PCR kuantitatif tidak normal: biasanya, gen HVC dalam darah manusia tidak boleh dikesan. Hasil kajian dibandingkan dengan nilai rujukan yang ditetapkan untuk tahap viral load yang berbeza.

Oleh itu, penunjuk (dalam IU / ml):

di bawah 4 × 10 * 5 dianggap sebagai viremia rendah;

dari 4 × 10 * 5 hingga 8 × 10 * 5 - purata;

lebih dari 8 × 10 * 5 - tinggi.

Lebih banyak salinan RNA virus dalam darah, lebih agresif penyakit dan lebih besar risiko penghantaran virus kepada orang lain. Tetapi paras viral load bukanlah satu-satunya penunjuk yang mempengaruhi keparahan patologi dan prognosis lanjut untuk pesakit: genotip patogen juga penting.

Mengadakan genotip adalah perlu untuk menetapkan rejimen rawatan yang betul. Ia juga menentukan prognosis untuk kesihatan dan kehidupan pesakit. Sebagai contoh, virus 3 genotip sering membawa kepada fibrosis atau sirosis hati, berbanding dengan pesakit yang membawa 1 genotip.

Hepatitis C: analisis dan transkrip

RNA Diagnosis hepatitis C tidak boleh dibuat hanya dengan hasil analisis kualitatif dan / atau kuantitatif PCR sahaja: penentuan HVC dan tahap beban virus tidak mencukupi untuk menetapkan terapi antiviral yang mencukupi. Seorang pesakit yang berpotensi harus diperiksa secara komprehensif (klinikal, makmal, instrumen) untuk mempunyai gambaran objektif patologi. Betul menetapkan satu set peperiksaan untuk menentukan diagnosis hepatitis C, dan hanya doktor sahaja yang dapat menguraikan hasilnya dengan betul.

Analisis kualitatif PCR untuk hepatitis C

Hepatitis adalah penyakit serius yang mempunyai banyak sebab. Asas pembangunannya adalah kerosakan langsung atau tidak langsung kepada hati. Memandangkan kepentingannya untuk seluruh organisma, seseorang hanya boleh meneka betapa sukarnya patologi itu. Dalam artikel ini kita akan mengkaji secara terperinci ciri-ciri kursus dan diagnosis makmal hepatitis C.

Penyebab penyakit itu adalah agen virus yang merujuk kepada patogen yang mengandungi RNA. Ia mempunyai ciri tersendiri - keupayaan untuk bermutasi, iaitu mengubah strukturnya. Disebabkan ini, jangkitan itu melarikan diri daripada serangan sistem imun dan dalam kebanyakan kes menyebabkan keradangan kronik di hati.

Memandangkan kewujudan subtipe yang berlainan virus, pemilihan ubat-ubatan harus berdasarkan hasil genotip. Walaupun kajian lama penyakit dan struktur HCV, belum ada kemungkinan untuk mengembangkan vaksin tertentu untuk penyakit ini.

Kesukaran diagnosis awal terletak pada kursus asimtomatik hepatitis, akibatnya seseorang melawat doktor pada tahap sirosis. Untuk mengesan penyakit itu dalam masa, pemeriksaan perubatan yang kerap diperlukan. Hanya dengan ujian makmal darah adalah mungkin untuk mengesan HCV dan mencegah pencemaran orang lain. Hakikatnya ialah pembawa jangkitan itu boleh lama tidak meneka tentang patologi dan terus menghantar virus kepada orang yang sihat.

Cara penghantaran

Dalam kebanyakan kes, virus merebak melalui darah, kerana ia mengandungi kepekatan tertinggi agen patogenik. Oleh itu, jangkitan disebarkan:

  • dengan hemodialisis;
  • dengan jarum yang dijangkiti;
  • dalam proses berperang, apabila kulit cedera, dan kontak darah berlaku;
  • dengan pemindahan darah (transfusi darah).

Kebarangkalian jangkitan semasa keintiman tidak signifikan, kerana air mani dan pelepasan vagina mengandungi sejumlah kecil patogen. Risiko jangkitan meningkat dengan ketara sebagai melanggar integriti membran mukus alat kelamin. Ini diperhatikan dengan seks yang agresif dan dubur.

Bagi mod penghantaran menegak, ia dijalankan dalam proses buruh. Dalam tempoh kehamilan janin, patogen tidak boleh menembusi plasenta ke embrio. Dalam kelahiran semulajadi, agen patogenik ditularkan kepada kanak-kanak apabila kulit cedera, apabila hubungan dengan darah ibu diperhatikan.

Selepas penembusan patogen ke dalam organisma yang sihat, sintesis antibodi bermula, yang merupakan perlindungan daripada jangkitan dan kepunyaan struktur imun. Mereka didapati dalam kajian awal seseorang yang menggunakan ELISA.

Tindak balas rantai polimer dilakukan untuk mengesahkan diagnosis pesakit. Ia adalah analisis bahan genetik agen patogen dan penentuan beban virus.

Diagnosis makmal hepatitis C

Diagnosis makmal bermula dengan enzim immunoassay. Tugas utamanya adalah untuk mengesan antibodi yang dihasilkan terhadap patogen. Keberkesanannya adalah hampir 95%. Terima kasih kepada penyelidikan ini, adalah mungkin untuk mengenal pasti pembawa virus di peringkat praplinikal dan hantar untuk pemeriksaan lanjut.

Analisis kualitatif ELISA menunjukkan kehadiran atau ketiadaan imunoglobulin dalam darah pesakit. Hasilnya mungkin "positif" atau "negatif." Setelah menerima jawapan pertama, orang itu dihantar untuk pemeriksaan seterusnya - PCR. Harganya bergantung kepada kualiti reagen dan makmal. Kos tindak balas rantai polimerase dapat mencapai 4 ribu rubel.

Ciri PCR

Menggunakan tindak balas rantai polimerase, walaupun sedikit bahan biologi membolehkan kita untuk menganggarkan beban virus dalam darah, iaitu, untuk mengira kepekatan patogen dalam satu mililiter cecair.

Dengan kemunculan PCR, diagnosis hepatitis telah menjadi lebih mudah. Analisis ini memungkinkan untuk mengenal pasti RNA HCV, untuk menubuhkan tahap proses menular dan penyebaran virus pembawa.

Terdapat beberapa jenis diagnosis genetik:

  1. Analisis kualitatif PCR untuk hepatitis C - mengesahkan kehadiran atau ketiadaan HCV dalam darah subjek:
  2. kuantitatif, yang mana anda boleh mengira kepekatan virus dan menubuhkan tahap penyakit. Hasilnya diberikan dalam IU / ml atau salinan / ml (bergantung kepada makmal);
  3. genotip - diperlukan untuk menentukan genotip HCV. Ini diperlukan untuk pilihan ubat yang paling berkesan dalam kes ini. Analisis secara tidak langsung menunjukkan keparahan proses patologi di hati. Oleh itu, dengan genotip ketiga patogen, steatosis paling sering diperhatikan, asasnya adalah pengumpulan lemak dalam hepatosit (sel-selnya). Di samping itu, jenis virus menjejaskan hasil dan tempoh kursus terapeutik.

Analisis kualitatif PCR untuk hepatitis C

Pertama sekali, bahan biologi diperiksa di makmal untuk kehadiran RNA HCV. Adalah penting untuk diingat bahawa analisis kualitatif terhadap hepatitis C mempunyai tahap kepekaan tertentu, dan oleh itu mungkin tidak selalu memberi jawaban yang tepat. Dalam kes ini, disyorkan untuk menjalankan semula diagnostik makmal dengan menggunakan reagen lain.

Untuk mendapatkan hasil yang boleh dipercayai, sistem ujian dengan kepekaan sekurang-kurangnya 50 IU / ml harus digunakan.

Hasil diagnostik boleh sama ada "positif" atau "negatif". Jika patogen tidak terdapat dalam darah, kajian itu selesai. Jika agen patogenik dikesan dalam sampel, maka beban virus dikuantifikasi.

Satu tindak balas negatif palsu diperolehi apabila proses teknologi dilanggar, sebagai contoh, komponen aktif yang menekan pembinaan salinan patogen yang memasuki medium. Oleh itu, tidak mungkin untuk memaparkan gambar darah yang benar, sebab itu jangkitan seseorang tidak didiagnosis.

Hasil positif palsu boleh diperolehi jika tiub untuk pengumpulan bahan biologi, serta persekitaran untuk kajian tersebut tercemar. Di samping itu, respons analisa seperti itu boleh dilakukan dengan jangkitan campuran, apabila hati terjejas oleh beberapa virus, contohnya, hepatitis C dan D.

Petunjuk untuk penyelidikan kualitatif

Doktor boleh menetapkan pesakit kajian kualitatif mengenai pengenalpastian RNA virus hepatitis C:

  • setelah menerima tindak balas immunoassay enzim positif atau meragukan;
  • untuk pengesahan diagnosis;
  • menentukan viral load;
  • menetapkan peringkat penyakit;
  • diagnosis jangkitan bercampur. Hepatitis C sering menjangkiti hati secara bersamaan dengan virus "D";
  • penentuan taktik terapeutik dengan mempertimbangkan genotip agen penyebab;
  • menilai dinamika perubahan semasa rawatan dengan ubat-ubatan antiviral.

Kelebihan reaksi polimerase termasuk:

  1. sensitiviti tinggi teknik, yang membolehkan untuk menubuhkan fakta jangkitan pada peringkat praslinik;
  2. pengenalpastian bahan genetik patogen, dan bukan antibodi;
  3. kemungkinan menubuhkan subjenis daripada agen patogenik;
  4. kelajuan diagnostik yang tinggi, kerana ia tidak memerlukan pembenihan bahan pada medium nutrien, dan cukup untuk menggunakan sistem ujian tertentu. Seseorang menerima keputusan selepas 5 jam;
  5. serba boleh. Analisis ini membolehkan untuk mengenal pasti sebarang bahan genetik (RNA, DNA). Oleh kerana itu, doktor dapat mengesahkan hepatitis C dan jenis penyakit lain (B);
  6. keupayaan untuk mengesan jangkitan laten.

Penyelidikan kuantitatif

Dalam kajian darah menggunakan tindak balas rantai polimerase dapat menghitung jumlah patogen dalam jumlah tetap bahan biologi. Penunjuk ditunjukkan dalam IU / ml. Melalui analisis, adalah mungkin untuk menentukan tahap penularan pesakit, menentukan tahap proses menular, dan juga menilai keberkesanan terapi dadah.

Atas dasar PCR, pakar memutuskan bahawa dos ubat dapat menghalang pembiakan patogen. Di samping itu, tempoh rawatan dan prognosis antiviral untuk jangka hayat ditentukan. Adalah penting untuk diingat bahawa sistem ujian mempunyai kepekaan yang tinggi, jadi kaedah ini memungkinkan untuk mengesahkan jangkitan seseorang di peringkat praslinik.

Genotyping

Memandangkan keupayaan patogen untuk bermutasi, genotipnya diperlukan untuk menentukan taktik rawatan dan pilihan ubat antiviral. Sebagai contoh, rawatan hepatitis B HCV 1 berlangsung selama 48 minggu, dengan trend positif diperhatikan hanya dalam 60% kes. Genotip 2 dan 3 mempunyai prognosis yang lebih baik. Ubat antiviral ditetapkan selama 8 bulan, dan keberkesanannya mencapai 85%.

Menurut statistik, dalam kebanyakan kes, HCV 1, 2 dan 3 didaftarkan di Persekutuan Rusia.

Apabila menguraikan ujian makmal, jawapan ini boleh ditunjukkan - "tidak ditaip". Ini bermaksud bahawa virus beredar dalam sistem peredaran pesakit dan tidak boleh diiktiraf oleh sistem ujian. Hasil analisis dalam hal ini menunjukkan bahwa patogen tidak tipikal untuk kawasan geografis tertentu.

Bagaimana untuk mendapatkan hasil yang boleh dipercayai?

Untuk kajian kualitatif PCR untuk mengesan RNA agen penyebab hepatitis C menunjukkan keputusan yang betul, adalah perlu untuk mematuhi keperluan untuk menyediakan diagnostik makmal:

  1. pensampelan darah dijalankan pada perut kosong, dan jurang "lapar" tidak sepatutnya lebih pendek daripada 8 jam;
  2. dua hari sebelum kajian, disyorkan untuk berhenti meminum minuman beralkohol dan meninggalkan masakan pedas, berlemak dan asap;
  3. membatalkan pengenalan dadah yang mengurangkan pembekuan darah, misalnya, heparin. Sekiranya ubat-ubatan ini ditetapkan untuk tujuan kesihatan, anda mesti memberitahu doktor. Di samping itu, pakar perlu menyedari pengambilan ubat lain yang boleh menjejaskan hasil penyelidikan makmal;
  4. Pada malam pengumpulan bahan biologi, prosedur physiotherapeutic tidak boleh dijalankan dan tidak boleh dikenakan tenaga fizikal yang teruk.

Hasil analisis dapat dipengaruhi bukan hanya oleh orang yang menyumbangkan darah, tetapi juga oleh faktor-faktor lain, yaitu:

  • pensampelan darah berkualiti rendah;
  • tidak mematuhi saranan pengangkutan bahan biologi;
  • latihan pekerja makmal yang tidak mencukupi;
  • tidak mematuhi teknik penyelidikan;
  • pengenalan antikoagulan (heparin) pada malam pensampelan darah. Kumpulan ubat ini mengurangkan pembekuan, sekali gus memperlahankan kerja reagen.

Di makmal yang berlainan, tindak balas diagnostik mungkin berbeza sedikit, tetapi kesilapan ini tidak menjejaskan hasil akhir kajian.

Perhatian khusus diberikan kepada jenis sistem ujian yang digunakan di makmal. Selalunya keutamaan diberikan kepada reagen dengan sensitiviti yang tinggi. Ini adalah penting untuk pesakit yang mempunyai viral load yang rendah, kerana ia sukar untuk dikesan.

Berapa kerapkah ujian makmal dilakukan?

Reaksi rantai polimer primer dilakukan pada orang yang telah dikesan oleh antibodi immunoassay kepada patogen hepatitis. Dalam kes ini, ia ditugaskan untuk mengesahkan fakta jangkitan seseorang dan menubuhkan tahap penyakit. Di samping itu, analisis ini membolehkan untuk menentukan subtipe virus, yang sangat penting untuk pilihan ubat-ubatan.

Tempoh berikutnya untuk ujian makmal wajib adalah 3 bulan dari permulaan terapi antiviral. Diagnostik memungkinkan untuk menilai keberkesanan ubat-ubatan, laraskan dos atau menggantikannya.

Sebagai tambahan kepada ujian asas, PCR boleh dilakukan pada 4 dan 24 minggu dari permulaan rawatan. Prognosis positif penyakit ini disahkan oleh penurunan dalam viral load selepas tiga bulan terapi. Sebagai contoh, ia harus berkurang dari 1 juta IU / ml kepada beberapa ratus ribu.

Sekiranya kepekatan agen patogenik dalam darah kekal pada tahap yang sama atau bertambah sedikit, ini menunjukkan keberkesanan ubat-ubatan antiviral dan memerlukan penggantiannya. Menggunakan PCR pada akhir rawatan, adalah mungkin untuk mengesahkan pemulihan pesakit.

Untuk menerangkan dengan betul hasil diagnostik makmal, perundingan pakar hepatologi atau pakar penyakit berjangkit diperlukan. Memandangkan frekuensi tinggi tindak balas palsu dalam ELISA, analisis ini digunakan secara eksklusif untuk pemeriksaan awal. Untuk pemeriksaan yang lebih menyeluruh pesakit yang menggunakan reaksi rantai polimerase.

Adakah mungkin untuk menyembuhkan hepatitis C tanpa kesan sampingan?

Hari ini, ubat-ubatan moden dari generasi baru Sofosbuvir dan Daclatasvir mungkin menyembuhkan hepatitis C untuk 97-100%. Anda boleh mendapatkan ubat-ubat terbaru di Rusia dari wakil rasmi gergasi farmaseutikal India, Zydus Heptiza. Ubat yang diperintahkan akan dihantar melalui kurier dalam tempoh 4 hari, pembayaran selepas penerimaan. Dapatkan konsultasi percuma mengenai penggunaan ubat-ubatan moden, serta belajar tentang cara memperoleh, anda boleh di laman web rasmi pembekal Zydus di Rusia.

Analisis kualitatif untuk hepatitis C

Tinggalkan komen 7,180

Analisis kualitatif tindak balas rantai polimerase - PCR untuk hepatitis C menentukan kehadiran atau ketiadaan HCV dalam badan. Dalam keadaan makmal, struktur RNA dipelajari, yang akan merangkumi virus. Dalam kes pengesanan virus C, perlu menjalani rawatan, kerana keadaan hati yang diabaikan akan menyebabkan akibat yang serius. PCR berkualiti tinggi juga dilakukan selepas pemulihan untuk mengesahkan ketiadaan antibodi. Ditugaskan untuk pemeriksaan rutin. Dengan kepekatan rendah agen penyebab dalam darah, PCR (kualitatif) tidak dapat mengesan apa-apa, kerana sistem diagnostik mempunyai ambang kepekaannya sendiri. Dalam kes peringkat awal penyakit atau bentuk ringan, PCR ultra diagnostik dilakukan pada peralatan ultra-sensitif.

Apakah virus RNA?

Istilah RNA virus hepatitis C (atau RNA virus hepatitis C) adalah penyakit hati itu sendiri. Virus C mengikat sel sihat tubuh dengan menembusi ke dalam. Lama kelamaan, tersebar di seluruh badan, hanya perlu masuk ke dalam darah. Akibatnya, patogen itu menembusi hati, bersatu dengan sel-selnya dan bekerja keras. Sel-sel hepatik (hepatosit) berfungsi di bawah pengaruhnya, menjalani perubahan, dan dari ini mereka mati. Semakin lama virus C berada di hati, semakin banyak jumlah sel mati. Dari masa ke masa, mengembangkan penyakit berbahaya yang membawa kepada kemerosotan ganas dan kematian.

Jangkitan hati dengan jenis virus ini mungkin tidak nyata secara luaran. Selama bertahun-tahun atau beberapa dekad, orang yang terinfeksi terasa sihat, dan hanya pemeriksaan rawak yang paling sering mendedahkan patologi. Apabila menderma darah untuk hepatitis, sebahagian daripada rantaian RNA (ribonucleic acid), yang merupakan sebahagian daripada gen manusia (DNA), diperiksa. Hasil ujian makmal tidak boleh digunakan untuk perawatan diri, karena ini hanya merupakan indikator. Gambaran yang tepat dan diagnosis lanjut adalah lebih baik ditentukan oleh doktor.

Apabila selesai: petunjuk untuk penyelidikan

Dalam pengesahan HCV, analisis PCR dilakukan (tindak balas rantai polimerase). Kajian PCR membantu untuk mencari bahan patogen dalam struktur RNA dan menetapkan terapi yang berkesan. Dilantik dalam kes berikut:

  • pengesanan tanda-tanda keradangan hati;
  • kajian skrining untuk pencegahan;
  • pemeriksaan orang yang dihubungi;
  • diagnosis hepatitis asal campuran (penentuan patogen utama);
  • menentukan tahap aktiviti pembiakan virus dalam bentuk kronik;
  • sirosis hati;
  • untuk menentukan keberkesanan rawatan yang ditetapkan.
Kajian PCR ditetapkan oleh doktor untuk menentukan keberkesanan rawatan untuk hepatitis.

Terdapat analisis kualitatif serta kuantitatif PCR. PCR kuantitatif menunjukkan nisbah peratusan RNA kepada pembawa virus dalam darah, dan kualitatif menunjukkan kehadiran atau ketiadaan virus. Penunjuk positif kualiti (kehadiran Hepatitis C RNA) juga memerlukan penyelidikan kuantitatif. Tahap kepekatan yang tinggi dari agen penyebab hepatitis C dikaitkan dengan risiko penghantarannya, iaitu, jangkitan orang lain. Tuduhan yang lebih rendah boleh dirawat dengan lebih baik. Jumlah virus RNA dalam darah tidak berkaitan dengan intensiti penyakit ini. Analisis PCR juga dilakukan dalam kes terapi interferon untuk menetapkan tempoh dan kerumitan kursus rawatan.

Ciri-ciri analisis PCR berkualiti tinggi untuk hepatitis C

Analisis kualitatif dengan indeks reaksi rantai polimer diberikan kepada semua pesakit yang mempunyai antibodi untuk hepatitis C dalam darah mereka. Mereka yang telah sakit dan sembuh harus mengambil ujian semula. Ia disyorkan untuk lulus ujian untuk hepatitis B, maka, jika kesimpulan positif, dan untuk hepatitis D. Juga, tindak balas kualitatif yang dianalisis harus dilakukan bersamaan dengan ujian darah yang lain. Analisis akan menunjukkan gambaran lengkap penyebaran virus.

Dari hasil ujian, hanya ujian positif untuk hepatitis C akan kelihatan atau negatif, iaitu kehadiran atau ketiadaan virus. Jika output "dikesan", maka virus itu dan terus aktif. Penetapan "tidak dikesan" menunjukkan ketiadaan virus atau jumlahnya yang kecil. Dengan penunjuk ini, perlu diingat bahawa sensitiviti analisis sistem diagnostik adalah berbeza dan bahawa hepatitis C RNA mungkin masih dalam darah, tetapi tidak ditunjukkan dalam analisis.

Kaedah PCR yang sangat sensitif ultra hepatitis C mendedahkan walaupun dalam jumlah yang sedikit. Kajian hibridensi fluoresen digunakan, yang banyak kali lebih tinggi daripada sistem PCR standard. Kaedah ini digunakan dalam beberapa kes:

  • disyaki bentuk tersembunyi hepatitis C;
  • Diagnostik PCR tidak mengesahkan patogen, tetapi terdapat antibodi;
  • dalam kes pemulihan;
  • untuk mengesan jangkitan awal.
Kembali ke jadual kandungan

Analisis penyahkodan

Penyahkodan PCR HCV mempengaruhi keputusan muktamad ketika membuat diagnosis, khususnya dengan metode ultrametod. Kelemahan utama kajian ini adalah pematuhan ketat kepada keadaan steril untuk sampel dan bahan. Penyimpangan sedikit kadang-kadang menunjukkan kesimpulan analitis yang tidak tepat, merumitkan diagnosis dan rawatan berikutnya. Analisis PCR untuk menentukan RNA hepatitis tidak senantiasa menunjukkan gambaran penyakit, kadang kala ketidakakurasian dibenarkan, dan di kedua-dua arah.

Mendiagnosis virus hepatitis, disyorkan untuk menggunakan peperiksaan yang komprehensif.

Norma petunjuk

Ketiadaan antibodi JgM terhadap hepatitis C virus dalam hasil kajian dianggap sebagai norma dalam analisis reaksi rantai polimerase. Pada masa yang sama, penemuan analisis serologi menunjukkan kehadiran antibodi kepada virus C dan ini juga berada dalam jarak normal. Takrif kualitatif tidak menunjukkan keamatan penyakit, ia hanya mendedahkan agen penyebab hepatitis C dalam RNA. Analisis ini diulangi selepas rawatan untuk mengesahkan pemulihan sebenar.

Penyimpangan

Sekiranya antibodi JgM ke RNA HCV hadir, ini menunjukkan jangkitan yang membina. Penyakit ini pada masa yang sama meneruskan akut atau kronik, yang ditunjukkan dalam pelbagai peringkat. Sekiranya penurunan jumlah antibodi dicatatkan, analisis akan menunjukkan bahawa hasil rawatan dicapai semasa pemulihan. Hanya kes-kes palsu yang positif yang jarang ditemui dalam diagnosis. Mereka ditemui pada wanita semasa kehamilan dan pada orang dengan penyakit berjangkit lain.

Diagnosis Virus Hepatitis C

Virus Hepatitis C (HCV) adalah virus yang mengandungi RNA dari keluarga Flaviviridae. Jangkitan ini mampu mengalikan sel darah (monosit, neutrofil, limfosit B dan makrofaj), dan juga menjejaskan sel-sel hati itu sendiri - hepatosit. Oleh kerana tahap aktiviti mutasi yang tinggi, jenis hepatitis ini dapat mengelakkan pendedahan kepada sistem imun manusia.

Terdapat 11 genotip dan jisim subtipe virus sedemikian, yang berbeza dengan tahap kerosakan hati dan mempengaruhi tempoh rawatan hepatitis. Pelbagai hepatitis C memerlukan pelbagai kaedah terapi antiviral. Sebagai contoh, hepatitis 1 dan 4 genotip perlu dirawat selama 48 minggu, dan untuk kursus terapi terhadap virus jenis ke-2 dan ke-3, ia mungkin mengambil masa hanya 24 minggu.

Selepas ujian cepat untuk hepatitis C memberikan hasil yang positif, analisis PCR dilakukan untuk mengesan RNA virus dalam sampel darah.

Diagnostik PCR

Reaksi rantai polimerase (PCR) adalah teknik eksperimen untuk mengesan virus. Analisis seperti hepatitis C boleh meningkatkan ketumpatan beberapa serpihan DNA atau RNA virus dalam sampel yang dipindahkan. Ini membolehkan mereka mengenali dan mengira nombor tersebut.

Ujian hepatitis C ini dilakukan mengikut prosedur berikut:

  1. Contoh darah (bahan genetik) yang mungkin mengandungi gen hepatitis yang diingini dimasukkan ke dalam tiub ujian. Bahan khas, primer, diletakkan di atasnya, mereka adalah segmen panjang pendek dari gen yang dikehendaki, yang disintesis secara kimia. Polimerase DNA atau RNA juga ditambah kepada kapal ini, ia mampu membina rantai asid nukleik yang sama sekali sama dengan yang asal. Pemilihan nukleotida bebas, yang merupakan bahan binaan khusus untuk DNA dan RNA, ditambah kepada komposisi yang diperoleh, dan salah satunya mengandungi zarah kecil fosforus radioaktif.
  2. Campuran yang dihasilkan pada mulanya dipanaskan hingga 95 darjah, akibatnya kedua-dua helai DNA yang saling berkait dalam keadaan normal tidak dimansuhkan.
  3. Untuk meneruskan analisis, ubat disejukkan, di mana titik utama melekat pada seksyen yang dikehendaki dari genom virus hepatitis, menghalang DNA daripada menjadi heliks ganda. Apabila campuran sejuk, polimerase mencari rantaian tunggal nukleotida. Semasa lampiran enzim ini, ia meluncur di sepanjang rantaian DNA (sebagai blok sepanjang tali), dan pada helix dua kali ganda ia tidak dapat "bekerja", untuk tujuan ini campuran dipanaskan.
  4. Untuk memanjangkan analisis, pemanasan semula dilakukan, yang sekali lagi membawa kepada pemisahan rantai nukleotida. Apabila kitaran PCR sedemikian dilakukan dalam sampel, jumlah gen hepatitis yang dikehendaki meningkat dalam bahagian geometri, dan bahan-bahan genetik lain yang dihasilkan dihasilkan hanya dalam corak linear.
  5. Untuk menyelesaikan kajian, penyelesaian itu dibersihkan daripada zarah nukleotida sisa. Mereka dipisahkan oleh elektroforesis, dengan pemisahan oleh parameter berat molekul rangkaian DNA. Ujian seperti ini untuk hepatitis C menggunakan PCR membolehkan anda menentukan sama ada gen virus yang dikehendaki hadir dalam sampel atau tidak.

Kelebihan ujian ini adalah ambang sangat tindak balas PCR. Teknik seperti diagnosis, idealnya diperlukan hanya satu genom virus untuk keseluruhan sampel.

Di samping itu, PCR ini adalah benar-benar khusus. Dalam setiap gen ada urutan unik nukleotida, yang, seperti sidik jari, tidak boleh diulang di mana-mana sahaja. Untuk analisis ini pada hepatitis C, primer disintesis supaya mereka benar-benar sesuai dengan kawasan unik gen yang dicari, yang tidak mempunyai urutan lain.

Teknik ini juga membolehkan anda menganalisis untuk hepatitis C dan menentukannya, membantu menentukan diagnosis akhir.

Analisis makmal sedemikian memberikan maklumat lebih daripada hanya kehadiran atau ketiadaan RNA virus hepatitis C atau jenis lain dalam sampel darah. Menentukan parameter radiasi radioaktif, adalah mungkin untuk mengenalpasti berapa banyak bahan genetik yang diingini pada asalnya dalam sampel yang di bawah kajian. Ini membolehkan anda menentukan parameter apa yang dipanggil viral load - kepekatan zarah RNA hepatitis dalam jumlah tertentu.

Analisis kualitatif PCR

Analisis ini membolehkan untuk menentukan kehadiran virus hepatitis B dalam sampel darah. Ia harus dilakukan untuk semua orang yang telah menemui antibodi untuk hepatitis.

Sebagai hasil penyelidikan sedemikian, hanya terdapat dua nilai:

  • "Dikesan." Hasil pemeriksaan positif sedemikian ditafsirkan sebagai berikut: dalam sampel dianalisis dari serpihan bahan biologi RNA virus hepatitis telah dijumpai. Ini adalah dari ini bahawa terdapat fakta bahawa pesakit telah dijangkiti virus ini. Ini mungkin menunjukkan bahawa hepatitis patogen melipatgandakan dalam badan dan menjangkiti sel baru, memusnahkan hati.
  • "Tidak dikesan." Keputusan ini mengatakan bahawa dalam sampel yang dianalisis di makmal ini, tiada serpihan RNA yang khusus untuk virus hepatitis C yang dikesan.. Dalam kes sedemikian, dikatakan bahawa tahap kepekatan berada di bawah ambang kepekaan ujian.

Ujian semacam itu juga mungkin palsu-positif atau palsu-negatif, kerana pencemaran biomaterial atau kehadiran dalam sampel bahan tertentu yang bertindak balas dengan komponen kimia yang diperlukan untuk analisis.

Perlu ditekankan bahawa dalam fasa akut hepatitis C, kajian kualitatif yang menggunakan kaedah PCR dapat mengesan RNAnya selepas 1-2 minggu dari masa infeksi organisma. Ini bermakna bahawa penyakit ini dapat dikesan jauh sebelum penampilan gejala luarannya atau rupa antibodi kepada hepatitis dalam tubuh.

Pensampelan darah (dari urat) disukai dilakukan pada perut kosong.

Analisis Kuantitatif PCR

Menggunakan analisis ini, tentukan tahap kepekatan virus hepatitis dalam pesakit (viral load). Ujian semacam itu mesti dihantar untuk menganggarkan jumlah virus RNA per unit isipadu tertentu.

Ujian penguraian untuk hepatitis C, dilakukan mengikut kaedah ini, boleh mempunyai hasil berikut:

  • Penunjuk kuantitatif (dalam angka)

Kepekatan virus (jumlah) diberikan dalam segi angka. Untuk ini, unit pengukuran yang berlainan digunakan: sama ada IU / ml (unit antarabangsa per mililiter) atau salinan / ml (bilangan salinan virus RNA per mililiter). Secara purata, 1 IU / ml sepadan dengan 4 salinan / ml, kerana sistem ujian yang berbeza mempunyai faktor penukaran yang berbeza untuk unit tersebut.

Nilai rendah viral load dianggap kurang daripada 400,000 IU / ml, dan 8,000,000 IU / ml adalah tinggi.

Penilaian kuantitatif sedemikian membolehkan untuk menentukan tahap penyakit menular ("infeksi") pesakit. Semakin penunjuk analisis ini, semakin tinggi kebarangkalian risiko penularan patogen kepada orang lain (melalui hubungan seksual atau menegak).

Keputusan ini bermaksud bahawa kaedah kuantitatif tidak dapat mengesan Hepatitis RNA, tetapi virus itu sendiri ada di dalam tubuh, hanya dalam kepekatan yang sangat rendah. Ini telah disahkan oleh analisis kualitatif tambahan PCR, dan oleh hasil positifnya ia memberi kesaksian kepada fakta kehadiran hepatitis.

  • Keputusan tidak dikesan

    Tafsiran positif analisis ini menunjukkan bahawa ujian kuantitatif itu sendiri dalam sampel darah tidak dapat mengesan zarah RNA tertentu virus hepatitis C.

  • Analisis kuantitatif PCR yang dijalankan pada tempoh yang berlainan terapi antiviral (1, 4, 12 dan 24 minggu) membolehkan kita untuk menilai keberkesanan rawatan dan membuat pindaan yang perlu.

    Spesifikasi analisis

    Ujian ini mesti diluluskan untuk menentukan genotip yang berbeza daripada hepatitis C. Pada masa ini, terdapat 11 genotip patogen ini dan banyak subtipe. Di negara kita, genotip hepatitis C spesies 1, 2 dan 3 adalah perkara biasa. Dalam makmal, mereka dapat mengenal pasti pelbagai subtipe spesies ini: genus jenis 1a, 1b, 2a, 2b, atau 3, 4, 5, 6 dengan pelbagai modifikasi subtipe. Untuk kesemua hepatitis ini, kekhususan penentuan adalah 100%.

    Menentukan pengubahsuaian genotip menjadikan kemungkinan untuk memilih rawatan yang sesuai. Kehadiran jenis genotip tertentu dalam pesakit tidak menunjukkan bahawa penyakit itu lebih mudah atau lebih rumit, mereka hanya jenis virus hepatitis, dan tidak lebih.

    Dalam kes-kes tersebut apabila genotip virus tidak dapat diasingkan di makmal, hasilnya boleh diberikan: "Tidak ditetik. Telah menyiasat genotip: seperti-dan-seperti "(sebagai contoh, 1a, 2c, 3av). Penyahkodan ini menunjukkan bahawa dalam makmal ini tidak terdapat reagen yang sesuai yang dapat menentukan genotip virus hepatitis. Kajian ini telah diuji untuk virus, data dalam senarai, tetapi kesesuaian mereka dengan sampel RNA tidak dikenalpasti.

    Untuk membuat diagnosis akhir, hanya satu jenis analisis tidak mencukupi. Setiap ujian boleh memberikan hasil positif palsu. Untuk mengenal pasti jenis hepatitis dan sejauh mana kerosakan pada jangkitan badan ini, lakukan kajian komprehensif. Ini dilakukan biopsi hati dan menguji enzimnya: ALT, ASAT, serta fosfatase alkali dan LDH. Ujian bilirubin dan analisa indeks prothrombin juga boleh dilakukan.

    Hanya satu set ujian dan ujian makmal seperti itu, dengan analisis umum keadaan pesakit, akan membantu menentukan kehadiran hepatitis dalam tubuh, bentuknya, serta keparahannya. Atas dasarnya, doktor dapat menentukan rawatan lanjut dan membuat kemungkinan prognosis untuk pesakit.


    Artikel Sebelumnya

    Liv.52

    Artikel Seterusnya

    Essentiale forte N

    Artikel Yang Berkaitan Hepatitis