Analisis PCR untuk Hepatitis C

Share Tweet Pin it

Diagnosis hepatitis termasuk pelbagai ujian untuk menentukan kehadiran virus dalam darah. Salah satu cara untuk mengesan penyakit adalah seperti kaedah penyelidikan sebagai PCR untuk hepatitis C. Apakah itu, mengapa analisis PCR untuk hepatitis sama pentingnya dilakukan dan diuraikan?

Apa itu

Reaksi rantai polimerase, atau PCR, digunakan untuk mendiagnosis ulser gastrik, kolitis, enteritis. Tetapi kelebihan utamanya terletak pada fakta bahawa ia membantu untuk mengesan dalam badan baik virus hepatitis C dan antibodi kepadanya, yang mempunyai keupayaan untuk tidak menyebabkan reaksi sistem imun kerana kemampuan mereka untuk bermutasi.

Kajian dan terasnya terletak pada penciptaan keadaan-keadaan tertentu di mana tindak balas rantai Hepatitis RNA berlaku. Jika, jika dibandingkan dengan urutan nukleotida virus hepatitis C, kebetulan dijumpai, ini menunjukkan bahawa terdapat zarah virus dalam darah, dan proses pemisahan berlaku di hati. Jika jumlah virus berada di bawah tahap tertentu, diagnosis negatif dibuat, dan jika lebih tinggi, yang positif.

Terdapat dua jenis ujian darah menggunakan kaedah PCR untuk hepatitis: analisis kuantitatif dan analisis kualitatif.

PCR kuantitatif, seperti yang dinyatakan di atas, menentukan kepekatan RNA virus hepatitis. Di samping itu, beliau dapat memberi maklumat tentang keamatan yang patologi berkembang, dan keberkesanan rawatan yang ditetapkan. Analisis kuantitatif hepatitis C sangat penting kerana ia membetulkan ketahanan terhadap tindakan ubat antivirus dan membolehkan anda menyesuaikan terapi.

Selepas pesakit menjalani rawatan, PCR membantu menentukan urutan pelantikan selanjutnya. Dalam beberapa kes, keperluan untuk tinjauan tambahan. Sebagai contoh, jika tahap ALP meningkat (tetapi tidak lebih daripada 2 kali dalam tempoh enam bulan), dan transkrip analisis menunjukkan beban virus di atas 105 IU / ml, pesakit ditetapkan sebagai biopsi. Jika analisis kuantitatif PCR menunjukkan keradangan yang kuat dan fibrosis, pesakit dirawat sebagai rawatan dengan ubat-ubatan antiviral.

Dalam keadaan di mana sejumlah besar zarah virus digabungkan dengan ALT yang tinggi, pesakit harus segera dirawat tanpa langkah diagnostik tambahan.

Ambil ujian ini dan ketahui jika anda mempunyai masalah hati.

Hanya pakar yang berpengalaman dan berpengalaman yang dapat menguraikan secara kualitatif dalam analisis kuantitatif darah untuk hepatitis, dan teknologi moden membantu melakukan ini dengan kepekatan rendah darah dalam darah.

Analisis kualitatif PCR bertujuan untuk menentukan dan mengesahkan kehadiran sebenar virus dalam tubuh. Ia dilakukan apabila antibodi untuk hepatitis dikesan dalam darah. Ia adalah analisis kualitatif mengenai hepatitis yang menjamin ketepatan hasilnya sebanyak 100% dan membolehkan anda membuat diagnosis pada peringkat awal penyakit, yang memungkinkan untuk memulakan perjuangan terhadap hepatitis sudah pada minggu pertama selepas jangkitan dan meningkatkan kemungkinan pemulihan lengkap (dalam kes penyakit B).

Faedah PCR

Dalam kajian oleh PCR dan menguraikan ujian darah untuk hepatitis, anda juga boleh menentukan genotip patogen tersebut. Secara keseluruhan, terdapat 6 genotip virus dan sebilangan besar subtipe, bagaimanapun, di rantau kita, 1, 2 dan 3 genotip telah menjadi biasa.

Kelebihan lain dari diagnosis jenis ini adalah:

  • ketepatan tinggi penunjuk yang diperoleh dan kebarangkalian kesalahan yang rendah di dalamnya;
  • tahap kepekaan yang tinggi terhadap zarah virus dalam darah;
  • kemungkinan mengenal pasti beberapa patogen sekaligus;
  • diagnosis mikroorganisma intraselular patogen dengan variabiliti antigenik yang tinggi;
  • bekerja dengan penyahkodan analisis untuk hepatitis membolehkan anda mengesan jangkitan semasa tersembunyi.

Siapa yang dilantik?

Kategori orang berikut harus lulus analisis PCR untuk hepatitis:

  • wanita hamil;
  • kakitangan penjagaan kesihatan;
  • penderma darah dan organ yang berpotensi;
  • mereka yang mempunyai ciri-ciri tanda penyakit;
  • Individu yang dijangkiti HIV;
  • penagih dadah;
  • rambang.

Bagaimanakah analisa dijalankan dan adakah perlu untuk mempersiapkannya

Sampel darah untuk PCR dilakukan dari urat. Sebagai peraturan, ini berlaku pada waktu pagi sebelum orang makan, kerana selepas makan, sekurang-kurangnya 8 jam harus lewat. Dalam kes-kes yang teruk, darah boleh diambil untuk pemeriksaan siang atau petang, tetapi jurang masa antara analisis dan pengambilan makanan hendaklah sekurang-kurangnya 5 jam.

Faktor manusia secara kuantitatif boleh menjejaskan keputusan: ketepatan mereka dalam sesetengah kes berkurangan dari 100% hingga 95%, oleh itu, perlu untuk menyediakan derma darah terlebih dahulu. Kualiti biomaterial untuk analisis akan sesuai apabila pesakit mengikuti peraturan berikut:

  • sebelum memberi darah, anda hanya boleh minum air bersih;
  • dua hari sebelum kajian, adalah perlu untuk menolak untuk menerima makanan goreng dan lemak, serta minuman beralkohol;
  • sehari sebelum lawatan ke makmal harus berhenti mengambil ubat. Jika ini tidak mungkin, adalah penting untuk memberitahu juruteknik makmal dan doktor yang hadir;
  • sehari sebelum anda perlu mengelakkan situasi yang tertekan dan penuaan fizikal;
  • ultrasound, pemeriksaan sinar-X dan ujian instrumental tidak boleh dilakukan sejurus sebelum derma darah;
  • dalam satu jam sebelum analisis, anda mesti menahan diri dari merokok;
  • 20 minit sebelum menderma darah, anda perlu terganggu, tenang dan bernafas.

Sekiranya seorang kanak-kanak berusia di bawah 5 tahun lulus kajian, ibu bapa mesti memastikan bahawa dia minum air rebus setiap 10 minit selama setengah jam sebelum mengambil biomaterial.

Dekri data yang diterima

Penyahkodan analisis boleh diwakili oleh kata-kata (dalam hal kajian kualitatif), contohnya, "tidak dikesan" atau "di bawah julat perubahan". Dalam kes pertama, ini menunjukkan bahawa jangkitan tidak dikesan. Pada yang kedua - bahawa virus hadir, tetapi dalam kuantiti yang kecil. Keadaan ini memerlukan penyelidikan semula.

Beban virus ditentukan oleh jumlah RNA berjangkit dan dirujuk sebagai IU / ml atau salinan / ml.

Penunjuk normal (norma) analisis kuantitatif untuk hepatitis C adalah julat dari 1.8x102 hingga 2.4x107 IU / ml.

Kepekatan virus dalam darah boleh:

  • rendah: dari 600 IU / ml hingga 3x10 4 / ml;
  • sederhana: dari 3x10 4 IU / ml hingga 8x10 5 IU / ml;
  • tinggi: lebih daripada 8x10 5 IU / ml.

Analisis kuantitatif dan kualitatif PCR untuk hepatitis membolehkan untuk menentukan kehadiran virus dalam badan dan tahap kepekatannya. Reaksi rantai multi-dimensi dapat mendiagnosis penyakit ini pada peringkat awal, tetapi untuk ini, pesakit akan segera menghubungi institusi perubatan untuk membantu dan dengan ketat mengikuti cadangan doktor yang menghadiri.

Penggunaan diagnostik PCR

Reaksi rantai polimerase (PCR) dalam biologi molekular adalah kaedah eksperimen untuk mengesan virus. Ia membolehkan anda meningkatkan ketumpatan kepekatan sesetengah asid nukleik tertentu (DNA) dalam sampel bahan biologi, yang membolehkannya menentukan (mengenali) dan menghitung.

Analisis dilakukan seperti berikut. Bahan genetik (sampel darah), yang boleh merangkumi gen yang dikehendaki, dimasukkan ke dalam tiub. Terdapat juga primer yang ditempatkan - segmen-segmen kimia yang disintesis daripada panjang kecil gen yang dikehendaki.

Polimerase DNA atau RNA juga ditambah ke dalam vesel, ia dapat menyusun rantai asid nukleik yang sama sekali sama dengan yang asal. Komposisi yang dihasilkan disuntik dan satu set empat nukleotida bebas - bahan bangunan khusus untuk RNA atau DNA, salah satunya mengandungi zarah fosforus radioaktif.

Campuran yang dihasilkan dipanaskan hingga 95-96 ° C, itulah sebabnya dua heliks DNA, yang biasanya saling berkaitan, ditenun. Kemudian ubat disejukkan, pada masa yang mana primers itu sendiri melekat pada kawasan genom virus yang dikehendaki, menghalang RNA (atau DNA) daripada membentuk helix ganda lagi.

Dalam proses penyejukan, polimerase mencari rantaian nukleotida bebas. Untuk fungsi enzim ini diperlukan satu rangkaian nukleotida. Kerana polimerase tergelincir di sepanjang rantaian DNA (seperti cincin pada tali), ia tidak dapat berfungsi pada heliks ganda.

Selepas ini, kitaran pemanasan berulang dilakukan, kerana rangkaian nukleotida dipisahkan. Di setiap kitaran PCR ini, amaun dalam sampel gen yang dikehendaki dari hepatitis meningkat secara eksponen, dan selebihnya bahan genetik dihasilkan (tumbuh) secara linear.

Selepas pembersihan penyelesaian daripada residu nukleotida dan pemisahan oleh elektroforesis rantai DNA dengan parameter berat molekul, seseorang dapat menentukan sama ada terdapat gen yang dikehendaki dalam sampel yang di bawah kajian atau tidak.

Faedah PCR

Ujian makmal menggunakan PCR membolehkan lebih banyak maklumat diperoleh daripada kehadiran virus RNA. Dengan menentukan parameter tahap radiasi radioaktif, adalah mungkin untuk mengenal pasti berapa banyak bahan genetik yang asalnya terkandung dalam sampel yang di bawah kajian. Dalam kes hepatitis, tentukan penunjuk paras viral load.

Satu lagi kelebihan kaedah ini adalah tahap kepekaan sensitiviti CR yang sangat tinggi. Ia lebih tinggi daripada kaedah klasik untuk mengesan virus. Idealnya, untuk mengenal pasti gen yang dikehendaki, untuk PCR, hanya satu virus dalam sampel yang mencukupi.

Di samping itu, PCR adalah benar-benar khusus. Primernya direka sedemikian rupa sehingga mereka sepenuhnya sesuai dengan kawasan unik gen-gen yang dikehendaki yang tidak ada urutan lain. Seperti cap jari yang unik, terdapat urutan nukleotida unik dalam setiap gen.

Analisis kualitatif PCR

Analisis kualitatif membolehkan anda mengenalpasti hanya kehadiran virus dalam darah. Ujian ini harus dijalankan untuk semua pesakit di mana antibodi untuk hepatitis C ditemui di dalam darah. Ia boleh mengakibatkan hanya satu daripada dua nilai: "dikesan" atau "tidak dikesan." Dalam orang yang sihat, norma (nilai rujukan) harus "tidak dikesan".

Terdapat penafsiran khas mengenai hasil penyelidikan kualitatif tersebut:

  • Hasilnya "dikesan." Ini bermakna bahawa serpihan RNA yang spesifik untuk virus hepatitis C didapati dalam sampel dianalisis bahan biologi yang diambil. Akibatnya, terdapat fakta bahawa pesakit itu dijangkiti virus hepatitis C. dan pada masa ini ia menjangkiti sel hati baru di dalam badan.
  • Hasilnya "tidak dikesan." Keputusan sedemikian menunjukkan bahawa dalam sampel dianalisis bahan biologi yang diperolehi di makmal ini, tidak ada serpihan RNA yang didapati khusus untuk virus hepatitis C. Selain itu, kepekatan RNA dari jangkitan patogen dalam sampel ini adalah di bawah had kepekaan ujian.

Dalam fasa akut RNA virus hepatitis C, kajian kualitatif oleh kaedah PCR boleh dikesan selepas 1-2 minggu selepas jangkitan badan, iaitu sebelum penampilan antibodi ke hepatitis itu sendiri.

Keputusan ujian yang tidak tepat dalam kajian ini boleh didapati dengan:

  • biomaterial tercemar;
  • kehadiran heparin dalam darah pesakit;
  • kehadiran dalam sampel bahan kimia atau protein (perencat) yang mempengaruhi pelbagai komponen PCR.

Untuk melakukan analisis kualitatif PCR, tidak ada penyediaan khusus pesakit untuk kajian ini diperlukan. Darah Venous digunakan sebagai bahan.

Penilaian keputusan

Ujian PCR berkualiti tinggi mempunyai sensitiviti tertentu, dan bergantung kepada ketepatan penyelidikan dan tahap peralatan di makmal boleh berbeza-beza dari 10 hingga 500 IU / ml.

Ini bermakna jika virus dalam sampel darah hadir dalam kepekatan yang sangat rendah (kurang daripada nilai ambang kepekaan makmal ini) maka hasilnya boleh ditentukan sebagai "tidak dikesan" dalam pesakit pesakit. Oleh kerana itu, apabila melakukan analisis kualitatif PCR dengan tingkat rendah viremia (kepekatan virus rendah), misalnya, untuk pesakit yang menjalani terapi antiviral, sangat penting untuk mengetahui ambang kepekaan sistem diagnostik ini.

Varian sistem diagnostik

Untuk mengawal tindak balas virologi, disyorkan untuk menggunakan sistem diagnostik dengan ambang kepekaan sekurang-kurangnya 50 IU / ml untuk rawatan antiviral. Kriteria ini dipenuhi, contohnya dengan analisa Cobas Ampicolor HCV-Test (tepat kepada 50 IU / ml), serta RealBest HCV RNA (dengan kepekaan 15 IU / ml).

Menurut cadangan WHO, untuk menubuhkan diagnosis definitif hepatitis C, hanya perlu berdasarkan asas pengesanan tiga kali RNA virus C pada sampel serum pesakit, dengan ketiadaan penanda hepatitis lain.

Sebagai tambahan kepada kaedah PCR, ujian TMA (kaedah penguatan transkripsi) juga digunakan untuk mengesan RNA HCV pada pesakit. Ia mempunyai ambang kepekaan yang terbaik (5-10 IU / ml), tetapi di negara kita seperti kaedah ujian belum lagi biasa.

Julat pengubahsuaian virus yang dapat dikesan

Seperti penentuan kualitatif dalam serum kehadiran RNA virus hepatitis C memungkinkan untuk menentukan beberapa genotip virus ini. Pada masa ini, sains tahu lebih daripada enam genotip virus ini, serta kira-kira 10 subtipe penyakit ini.

Di negara kita, virus biasa 1, 2, 3 genotip. Makmal dapat mengesan genotip berikut: 1a dan 1b, 2a, 2b dan 2c, serta 3, 4, 5a dan 6, tanpa mengira subtipe. Untuk semua modifikasi virus, spesifikasi pengesanan adalah 100%.

Analisis Kuantitatif PCR

Dengan bantuan ujian PCR kuantitatif, tahap kepekatan virus hepatitis dalam sampel darah (viral load) ditentukan. Ujian ini untuk viremia (kepekatan virus) membolehkan anda menentukan bilangan unit bahan genetik tertentu (RNA yang paling virus), yang dikesan dalam jumlah tertentu. Dalam kes ini, tentukan kepekatannya dalam 1 ml, yang sepadan dengan 1 cu. lihat

Parameter kuantitatif analisis dinyatakan dalam angka, untuk tujuan ini unit antarabangsa (IU) per mililiter (ml), yang disebut sebagai IU / ml, digunakan sebagai unit pengukuran. Sekarang dalam sesetengah makmal, jumlah virus boleh ditentukan dalam unit lain: bilangan salinan per ml ditunjukkan sebagai salinan / ml.

  • Tarikh untuk hepatitis C, analisis kuantitatif PCR yang dilakukan sebelum rawatan bermula. Kemudian pada minggu ke-1, ke-4, ke-12 dan ke-24. Penilaian pada minggu ke-12 adalah petunjuk, ia membolehkan untuk menentukan keberkesanan terapi.
  • Penyediaan untuk analisis. Untuk menjalankan analisis kuantitatif PCR, tiada persediaan khusus pesakit untuk kajian diperlukan. Setengah jam sebelum pensampelan tidak sepatutnya merokok. Darah Venous digunakan sebagai bahan makmal.

Penilaian keputusan

Bagi sistem ujian makmal yang berbeza, terdapat faktor penukaran yang berbeza untuk penunjuk ini dalam IU / ml. Secara purata, mereka mengambil parameter penukaran, di mana 4 salinan / ml = 1 IU / ml. Sebagai contoh, jika makmal memberi hasil analisis PCR 2.4 * 10 6 salinan / ml, maka parameter ini hendaklah dibahagikan kepada 4 dan kita akan mendapat 6 * 10 5 IU / ml.

Beban 800,000 IU / ml dianggap tinggi, kira-kira 3,000,000 salinan / ml. Viremia rendah, menurut beberapa pengarang, sesuai dengan parameter PCR kuantitatif di bawah 400,000 IU / ml.

Hasil daripada ujian kuantitatif, keputusan akhir dapat disampaikan bukan dalam bentuk nilai digital, tetapi: "di bawah julat ukur", atau "tidak dapat dikesan".

  • Penilaian: "di bawah julat ukuran." Ini menunjukkan bahawa ujian kuantitatif tidak dapat mengesan RNA virus hepatitis C, tetapi virus itu sendiri terdapat di dalam badan dalam kepekatan yang sangat rendah. Ini terbukti dengan ujian kualitatif tambahan, mengesahkan fakta kehadiran virus itu.
  • Penilaian: tidak dikesan. Keputusan ini menunjukkan bahawa ujian kuantitatif tidak terdapat dalam sampel RNA virus.

Parameter beban virus, pertama sekali, menentukan tahap jangkitan penyakit, tahap "jangkitan" pesakit. Semakin tinggi kepekatan virus pesakit, semakin besar peluangnya untuk lulus kepada orang lain. Misalnya, semasa hubungan seks dengan orang yang sakit, atau secara menegak. Penunjuk kuantitatif ini juga membantu menentukan keberkesanan rawatan pesakit.

Mengendalikan analisis kuantitatif CCP adalah penting untuk terapi antiviral, menilai kejayaannya dan merancang tempoh kursus. Oleh itu, dengan tindak balas yang cepat terhadap badan untuk rawatan dan tahap viremia yang rendah, tempoh terapi mungkin dipendekkan.

Sekiranya parameter PCR kuantitatif perlahan dikurangkan, terapi antiviral perlu dipanjangkan atau diubah suai. Sekiranya tahap beban virus adalah rendah, maka ini adalah faktor yang menggalakkan untuk terapi, tetapi jika dinaikkan, maka kaedah rawatan yang digunakan tidak berkesan dan ubat-ubatan atau kaedah penggunaannya harus diubah.

Diagnosis dengan PCR untuk Hepatitis C

Tidak semua orang tahu mengapa mereka menggunakan kaedah diagnostik PCR untuk hepatitis C. Salah satu kumpulan penyakit yang paling meluas adalah penyakit berjangkit saluran gastrousus. Selalunya, perut (ulser), usus (kolitis, enteritis) dan hati (hepatitis) menderita.

Di antara semua organ yang disenaraikan di atas, beban terbesar dikenakan pada hati. Di dalam badan, peranan hati sangat penting:

  1. Hampir semua tindak balas metabolik berlaku di hati (ini adalah di mana semua jenis komponen penting dibentuk yang membolehkan tubuh berfungsi sepenuhnya).
  2. Hati adalah organ detoksifikasi utama. Dengan bantuannya (khususnya, melalui hempedu), banyak substrat dikeluarkan yang boleh menyebabkan mabuk dan membawa kepada akibat yang serius.

Malangnya, ramai yang tidak memantau kesihatan mereka, kerana apa yang dideritakan oleh hati. Hepatitis pelbagai etiologi (virus, toksik) biasanya berkembang.

Definisi hepatitis

Hepatitis virus menduduki tempat yang penting di kalangan penyakit hati. Keparahan penyakit ini, kerumitan rawatan meletakkannya di tempat pertama di kalangan patologi organ lain dari organ ini.

Semua hepatitis dibahagikan kepada akut dan kronik. Hepatitis A dan B dikelaskan sebagai akut. Antara hepatitis C kronik datang dahulu.

Penyakit ini disebabkan oleh virus hepatitis C. Ciri ciri adalah bahawa penyakit ini boleh bertahan lama tanpa sebarang manifestasi klinikal.

Ia disebarkan terutamanya melalui darah. Dengan aliran darah, virus memasuki hati, di mana ia mula melipatgandakan dalam sel-selnya. Akibat pengumpulan virion, kemusnahan hepatocyte yang dijangkiti berlaku. Sebagai tindak balas, antibodi mula dihasilkan, yang mula menyerang jenazah hepatosit. Oleh kerana itu, kolam terhadap sel hati dikembangkan dari masa ke masa, yang memperburuk perjalanan penyakit.

Disebabkan fakta bahawa penyakit ini adalah gejala asimtomatik atau asimtomatik, dan tanda-tanda klinikal hanya muncul dengan kerosakan sel yang signifikan, penyakit ini memerlukan penciptaan kaedah diagnostik untuk mengesan kehadirannya dan mengambil langkah yang sesuai.

Diagnosis hepatitis C: analisis kualitatif dan kuantitatif

Pada masa ini, untuk diagnosis hepatitis C menggunakan kaedah seperti biopsi hati, immunogram.

Mereka membolehkan anda untuk menentukan secara langsung kehadiran hepatosit yang dijangkiti (spesimen biopsi hati) atau antibodi tertentu terhadap sel-sel yang terjejas (immunogram). Walau bagaimanapun, terdapat satu kaedah yang membolehkan anda dengan pasti menentukan kehadiran virus itu sendiri. PCR ini adalah tindak balas rantai polimerase.

Inti kaedah ini terletak pada hakikat bahawa dalam keadaan tertentu, pengeluaran rantai RNA berlaku. Ini disebabkan oleh fakta bahawa terdapat serpihan zarah virus dalam darah atau biopsi yang dipersoalkan. Apabila menyambungkannya dengan beberapa molekul dalam medium, sintesis rantai yang saling melengkapi dengan RNA virus berlaku. Dalam analisis dan perbandingannya yang berikutnya dengan urutan nukleotida yang diketahui virus hepatitis C, adalah mungkin untuk menentukan sama ada virus itu terdapat di dalam badan dan sama ada kerosakan hati hadir.

PCR dilakukan selepas pengesanan antibodi spesifik dalam darah terhadap virus hepatitis. Selepas ujian, hasilnya dibuat - RNA "dikesan" atau "tidak dikesan". Kadang-kadang dia mungkin mengatakan "bahan tidak cukup" - dalam kes ini, perlu mengulangi analisis untuk hepatitis C.

Sekiranya bilangan zarah virus adalah kurang daripada jumlah minimum yang diperlukan, maka kita boleh mengatakan bahawa tidak ada hepatitis, dan jumlah bahan genetik yang minima boleh "keliru" kerana meniru bahan genetik atau beberapa urutan nukleotida yang dapat bertepatan dengan virus tersebut.

  1. Dengan PCR, keputusan negatif dapat dilihat apabila terdapat zarah virus dalam darah, tetapi mereka sangat kecil (jangkitan berlaku baru-baru ini atau analisis didahului oleh terapi antivirus jangka panjang dan intensif) bahawa sistem ujian tidak dapat menentukan konsentrasi mereka dengan tepat. RNA - "tidak dikesan."
  2. Jika PCR mempunyai hasil yang positif, maka terdapat begitu banyak zarah virus dalam darah yang jumlah mereka melebihi ambang kepekaan yang rendah dalam sistem ujian. Dalam kes ini, terdapat risiko tinggi untuk membangunkan proses menular (atau sudah ada dalam tahap yang agak maju). Biasanya, sejumlah besar virus sudah menjadi petunjuk untuk rawatan dan pemindahan hati seterusnya.

Kadang-kadang ujian boleh menjadi negatif palsu atau palsu.

Hasil PCR negatif palsu terhadap hepatitis diperhatikan apabila terdapat beberapa komponen dalam medium reaksi yang menghalang pembentukan salinan zarah virus. Oleh kerana itu, tidak mungkin untuk mendapatkan gambaran sebenar keadaan darah, yang menyumbang kepada laluan virus dan perkembangan penyakit. Kehadiran heparin dalam darah juga boleh mempengaruhi reaksi (dengan mengurangkan kelikatan relatif darah). Tafsiran yang tidak betul mengenai analisis itu adalah mungkin walaupun keadaan pengangkutan dan penyimpanan bahan yang diselidiki tidak dipenuhi.

Keputusan positif palsu, apabila hepatitis C didiagnosis, PCR paling kerap berlaku apabila tiub atau persekitaran kerja tercemar. Di samping itu, hasil positif dapat dilihat dengan adanya kumpulan virus hepatitis lain (akibat tindak balas silang).

Analisis kualitatif PCR untuk pengesanan hepatitis C

Kehadiran dalam darah sejumlah besar cryoglobulins juga secara langsung memberi kesan terhadap pengaliran PCR. Oleh kerana itu, penting untuk menentukan kepekatan mereka dalam darah sebelum menguji hepatitis C untuk mengesan penyimpangan hasil terlebih dahulu dan mencegahnya.

Selepas ujian ini, ia menjadi jelas sama ada terdapat zarah virus dalam darah. Apabila menentukan mereka, adalah disyorkan untuk segera memulakan terapi antiviral untuk memperlahankan proses perkembangan. Tidak seperti hepatitis B, tiada ubat lengkap untuk hepatitis C; penyakit itu hanya akan masuk ke peringkat laten dan mula berjalan lebih perlahan. Kerosakan hati tidak dapat dielakkan. Pada peringkat terakhir proses ini, apabila hati tidak lagi dapat menangani fungsinya, mungkin diperlukan untuk pemindahannya.

Rawatan ini dijalankan dengan dua ubat - interferon dan ribavirin.

Membuktikan keberkesanannya dalam memperlambat proses kekalahan hepatosit. Sepanjang perjalanan, terapi infusi semestinya ditetapkan untuk memudahkan kerja hati.

Semua pesakit yang telah melihat peningkatan jumlah zarah virus dalam darah semestinya didaftarkan dengan pakar hepatologi. Beberapa kali dalam setahun, mereka disyorkan untuk menjalani pemeriksaan pencegahan untuk menentukan perkembangan proses dan pengesanan indikasi untuk transplantasi tepat pada masanya. Di samping itu, ia mungkin menggunakan hepatoprotectors, walaupun pendapat doktor berbeza sedikit. Sesetengah percaya bahawa ubat-ubatan ini membolehkan anda untuk menggantung proses dan melindungi hepatosit yang tidak terjejas; yang lain yakin bahawa tidak masuk akal untuk mengambilnya, dan terapi antiviral intensif perlu dijalankan.

Oleh itu, hepatitis C tergolong dalam kategori penyakit, pengenalan yang memberikan beberapa masalah. Meningkatkan kaedah diagnostik, serta pemeriksaan pencegahan yang tepat pada masanya akan mengurangkan kejadian penyakit ini. Penting adalah pencegahan penyakit ini. Seseorang harus berhati-hati mengelakkan sentuhan dengan darah, enggan mengambil dadah, hanya penyakit ini akan dibasmi. Perkara utama dalam pencegahan dan rawatan adalah sikap pesakit terhadap kesihatan mereka.

Pengkodan analisis PCR untuk hepatitis C

Kajian makmal khas - analisis PCR untuk hepatitis C - sangat memudahkan diagnosis penyakit virus ini. Hepatitis C tidak terkecuali. Contoh kecil darah boleh diuji untuk kandungan rna dan bahan genetik lain dari agen virus. Semua individu yang mempunyai antibodi untuk hepatitis C yang beredar dalam plasma darah tertakluk kepada analisis dengan PCR, kehadirannya mengesahkan pengesanan kualitatif.

Tafsiran hasilnya ditafsirkan dalam lajur borang penyelidikan sebagai analisis "positif" atau "negatif". Di samping itu, menggunakan PCR adalah mungkin bukan sahaja untuk menentukan kandungan virus minimum, tetapi juga untuk mengira bilangan zarah. Oleh itu, adalah mungkin untuk menentukan anggaran beban viral dan menentukan taktik rawatan perubatan setepat mungkin.

Kerosakan hati virus

Hati sebagai unsur saluran pencernaan memerlukan beban besar. Di dalam sel-selnya, kebanyakan tindak balas metabolik semua jenis metabolisme berlaku, yang memastikan fungsi optimum semua organ dan sistem. Pada masa yang sama, nilai detoksifikasi sangat baik untuk mengeluarkan produk slug dan metabolik dengan hempedu enzim.

Kekalahan hati oleh virus yang berlainan sifatnya sangat berbahaya bagi tubuh. Gambar klinikal yang pelbagai dan ketidakpatuhan rawatan membawa hepatitis ke tempat pertama dari segi risiko kesihatan. Hepatitis C adalah kronik dan boleh menjadi negatif untuk masa yang lama, perlahan-lahan parasitizing dalam tubuh manusia. Virus ini ditularkan melalui cecair biologi: darah dan kurang kerap melalui air mani. Penyalahgunaan dadah suntikan tidak steril, penghantaran semula jadi wanita yang dijangkiti, kecederaan akibat kemalangan atau luka oleh pekerja kesihatan boleh menyebabkan penyebaran virus kepada orang yang sihat.

Diagnosis tepat pada masanya penyakit itu terhalang oleh gambaran klinikal yang tersembunyi dan patologi tidak sistematik. Keputusan positif hanya boleh dilewatkan oleh analisis prestasi yang kurang baik. Hanya kerosakan yang ketara terhadap sel-sel hati yang menyebabkan simptomologi tertentu, bagaimanapun, kesan negatif viremia pada masa itu tidak memberi peluang untuk memulihkan organ.

Perubatan moden telah membangunkan kaedah khas untuk mengenali kesan-kesan kecil virus itu. PCR, IFA, biopsi hati dapat mengesan kerosakan sedikit pada hati dan tahap antibodi minimum terhadap virus. Analisis dengan bantuan PCR adalah yang paling mudah dan paling dipercayai dalam amalan diagnostik.

Analisis kualitatif

Inti dari tindak balas polimerase ialah penjanaan urutan rna. Reaksi dilakukan dengan kehadiran protein virus yang sama dalam plasma darah.

Pemangkin khas membolehkan anda mensintesis urutan virus yang sama rantai, yang dibandingkan dengan nukleotida RNA virus yang diketahui. Berdasarkan ini, mereka menentukan beban virus dan kerosakan hati.

PCR mampu menangkap walaupun satu kehadiran gen yang dikehendaki dalam darah yang diambil. Reaksi rantai diagnostik sedemikian juga sangat spesifik. Urutan rantaian nukleotida adalah unik untuk setiap makhluk, sehingga primer enzimatik menghasilkan urutan yang sama dari maklumat genetik yang dikehendaki. Oleh itu, sebarang virus dapat dikesan dengan ketepatan yang sedikit, walaupun indikator kuantitatifnya sangat kecil.

Pesakit yang darahnya dijumpai antibodi yang dihasilkan terhadap hepatitis virus, menjalankan kajian kualitatif PCR atau Eph. Hasil analisa dapat bersifat positif dan negatif, yang kedua-dua kes memerlukan rawatan.

Tanggapan positif tindak balas rantai perlu diuraikan sebagai kehadiran serpihan RNA virus hepatitis atau sebagai fenomena jangkitan.

Dalam plasma darah pada masa ini virus secara aktif mengalikan dan parasit ke atas sel-sel hati. Diagnostik PCR boleh memberi jawapan negatif jika terdapat beberapa zarah RNA virus yang ada di plasma, di bawah tahap kepekaan ujian, atau tidak sama sekali. Selepas jangkitan langsung, jumlah virus tumbuh agak perlahan, dan hanya selepas 1-2 minggu, ifa atau penyelidikan kualitatif lain dapat mengasingkannya.

Analisis negatif boleh didapati dalam kes berikut:

  1. Apabila mengambil bahan dalam keadaan yang tidak wajar, dapatkan sampel darah dengan pencemaran;
  2. Apabila pesakit sebelum ini menerima suntikan heparin.
  3. Dengan kehadiran enzim dan substrat lain dalam sampel yang diambil yang mengganggu tindak balas rantai.

Analisis kuantitatif

Ujian kuantitatif sebagai diagnosis mikrobiologi direka untuk menentukan beban virus. Analisis kualitatif yang disahkan untuk viremia berfungsi sebagai asas untuk menentukan jumlah bahan genetik dan kepekatannya. Bilangan rna virus yang dikesan ditentukan dalam unit jumlah darah, biasanya dalam 1 mililiter. Bahan yang diperlukan dinyatakan dalam unit antarabangsa, sesetengah makmal menggunakan bilangan salinan dalam analisis eif.

Biasanya, sebelum sebarang regimen terapeutik, PCR dianalisis secara kuantitatif. Mengira rna virus dilakukan dengan kerap: selepas satu, empat, dua belas dan dua puluh empat minggu. Minggu ke-12 dianggap sebagai petunjuk, sejak berdasarkan analisis, dalam tempoh ini tafsiran keberkesanan langkah-langkah terapeutik dijalankan.

Analisis Kuantitatif menggunakan PCR atau IFA melibatkan mengambil sampel dari vena.

Tafsiran hasil sebagai beban virus tinggi bermula dari angka 800,000 IU / ml. Hasil positif seperti hepatitis C mencerminkan kehadiran sekurang-kurangnya 3,000,000 salinan per mililiter darah. Tahap rendah viremia berhenti pada 400,000 IU / ml. Hasil kajian boleh menjadi nilai sebagai respon negatif, serta penunjuk "di bawah julat ukur."

Ujian kuantitatif dengan anggaran "di bawah julat ukuran" mengatakan bahawa semasa reaksi, tidak mungkin untuk mengira RNA. Virus ini masih beredar di dalam badan, seperti ditunjukkan oleh ujian kualitatif yang positif. Penunjuk negatif analisis kuantitatif pcr atau ifa menunjukkan ketiadaan rna dalam sampel darah ini.

Walaupun terdapat kaedah penularan virus yang terhad melalui darah, risiko penularan virus melalui rembesan kelenjar seks dari ibu kepada anak meningkat.

Analisis kuantitatif memberi bantuan penting dalam menilai campur tangan terapeutik. Ifa dan PCR mencerminkan tindakan ubat-ubatan antiviral, membantu menentukan masa terapi dan menilai pembentukan imuniti pesakit. Sambutan negatif awal ujian makmal menunjukkan rawatan yang berjaya dan keperluan untuk mengurangkan tempoh terapi. Kemerosotan kemerahan dalam viremia dapat ditafsirkan sebagai keperluan untuk mengubahsuai kursus terapeutik. Tahap viral load menentukan prognosis penyakit. Hepatitis dengan kadar yang rendah mungkin dirawat dan virus itu dapat dikeluarkan sepenuhnya dari badan. Kadar tinggi kehadiran virus dalam darah memerlukan perhatian yang teliti dan rawatan serba boleh.

Analisis kualitatif untuk hepatitis C

Tinggalkan komen 7,180

Analisis kualitatif tindak balas rantai polimerase - PCR untuk hepatitis C menentukan kehadiran atau ketiadaan HCV dalam badan. Dalam keadaan makmal, struktur RNA dipelajari, yang akan merangkumi virus. Dalam kes pengesanan virus C, perlu menjalani rawatan, kerana keadaan hati yang diabaikan akan menyebabkan akibat yang serius. PCR berkualiti tinggi juga dilakukan selepas pemulihan untuk mengesahkan ketiadaan antibodi. Ditugaskan untuk pemeriksaan rutin. Dengan kepekatan rendah agen penyebab dalam darah, PCR (kualitatif) tidak dapat mengesan apa-apa, kerana sistem diagnostik mempunyai ambang kepekaannya sendiri. Dalam kes peringkat awal penyakit atau bentuk ringan, PCR ultra diagnostik dilakukan pada peralatan ultra-sensitif.

Apakah virus RNA?

Istilah RNA virus hepatitis C (atau RNA virus hepatitis C) adalah penyakit hati itu sendiri. Virus C mengikat sel sihat tubuh dengan menembusi ke dalam. Lama kelamaan, tersebar di seluruh badan, hanya perlu masuk ke dalam darah. Akibatnya, patogen itu menembusi hati, bersatu dengan sel-selnya dan bekerja keras. Sel-sel hepatik (hepatosit) berfungsi di bawah pengaruhnya, menjalani perubahan, dan dari ini mereka mati. Semakin lama virus C berada di hati, semakin banyak jumlah sel mati. Dari masa ke masa, mengembangkan penyakit berbahaya yang membawa kepada kemerosotan ganas dan kematian.

Jangkitan hati dengan jenis virus ini mungkin tidak nyata secara luaran. Selama bertahun-tahun atau beberapa dekad, orang yang terinfeksi terasa sihat, dan hanya pemeriksaan rawak yang paling sering mendedahkan patologi. Apabila menderma darah untuk hepatitis, sebahagian daripada rantaian RNA (ribonucleic acid), yang merupakan sebahagian daripada gen manusia (DNA), diperiksa. Hasil ujian makmal tidak boleh digunakan untuk perawatan diri, karena ini hanya merupakan indikator. Gambaran yang tepat dan diagnosis lanjut adalah lebih baik ditentukan oleh doktor.

Apabila selesai: petunjuk untuk penyelidikan

Dalam pengesahan HCV, analisis PCR dilakukan (tindak balas rantai polimerase). Kajian PCR membantu untuk mencari bahan patogen dalam struktur RNA dan menetapkan terapi yang berkesan. Dilantik dalam kes berikut:

  • pengesanan tanda-tanda keradangan hati;
  • kajian skrining untuk pencegahan;
  • pemeriksaan orang yang dihubungi;
  • diagnosis hepatitis asal campuran (penentuan patogen utama);
  • menentukan tahap aktiviti pembiakan virus dalam bentuk kronik;
  • sirosis hati;
  • untuk menentukan keberkesanan rawatan yang ditetapkan.
Kajian PCR ditetapkan oleh doktor untuk menentukan keberkesanan rawatan untuk hepatitis.

Terdapat analisis kualitatif serta kuantitatif PCR. PCR kuantitatif menunjukkan nisbah peratusan RNA kepada pembawa virus dalam darah, dan kualitatif menunjukkan kehadiran atau ketiadaan virus. Penunjuk positif kualiti (kehadiran Hepatitis C RNA) juga memerlukan penyelidikan kuantitatif. Tahap kepekatan yang tinggi dari agen penyebab hepatitis C dikaitkan dengan risiko penghantarannya, iaitu, jangkitan orang lain. Tuduhan yang lebih rendah boleh dirawat dengan lebih baik. Jumlah virus RNA dalam darah tidak berkaitan dengan intensiti penyakit ini. Analisis PCR juga dilakukan dalam kes terapi interferon untuk menetapkan tempoh dan kerumitan kursus rawatan.

Ciri-ciri analisis PCR berkualiti tinggi untuk hepatitis C

Analisis kualitatif dengan indeks reaksi rantai polimer diberikan kepada semua pesakit yang mempunyai antibodi untuk hepatitis C dalam darah mereka. Mereka yang telah sakit dan sembuh harus mengambil ujian semula. Ia disyorkan untuk lulus ujian untuk hepatitis B, maka, jika kesimpulan positif, dan untuk hepatitis D. Juga, tindak balas kualitatif yang dianalisis harus dilakukan bersamaan dengan ujian darah yang lain. Analisis akan menunjukkan gambaran lengkap penyebaran virus.

Dari hasil ujian, hanya ujian positif untuk hepatitis C akan kelihatan atau negatif, iaitu kehadiran atau ketiadaan virus. Jika output "dikesan", maka virus itu dan terus aktif. Penetapan "tidak dikesan" menunjukkan ketiadaan virus atau jumlahnya yang kecil. Dengan penunjuk ini, perlu diingat bahawa sensitiviti analisis sistem diagnostik adalah berbeza dan bahawa hepatitis C RNA mungkin masih dalam darah, tetapi tidak ditunjukkan dalam analisis.

Kaedah PCR yang sangat sensitif ultra hepatitis C mendedahkan walaupun dalam jumlah yang sedikit. Kajian hibridensi fluoresen digunakan, yang banyak kali lebih tinggi daripada sistem PCR standard. Kaedah ini digunakan dalam beberapa kes:

  • disyaki bentuk tersembunyi hepatitis C;
  • Diagnostik PCR tidak mengesahkan patogen, tetapi terdapat antibodi;
  • dalam kes pemulihan;
  • untuk mengesan jangkitan awal.
Kembali ke jadual kandungan

Analisis penyahkodan

Penyahkodan PCR HCV mempengaruhi keputusan muktamad ketika membuat diagnosis, khususnya dengan metode ultrametod. Kelemahan utama kajian ini adalah pematuhan ketat kepada keadaan steril untuk sampel dan bahan. Penyimpangan sedikit kadang-kadang menunjukkan kesimpulan analitis yang tidak tepat, merumitkan diagnosis dan rawatan berikutnya. Analisis PCR untuk menentukan RNA hepatitis tidak senantiasa menunjukkan gambaran penyakit, kadang kala ketidakakurasian dibenarkan, dan di kedua-dua arah.

Mendiagnosis virus hepatitis, disyorkan untuk menggunakan peperiksaan yang komprehensif.

Norma petunjuk

Ketiadaan antibodi JgM terhadap hepatitis C virus dalam hasil kajian dianggap sebagai norma dalam analisis reaksi rantai polimerase. Pada masa yang sama, penemuan analisis serologi menunjukkan kehadiran antibodi kepada virus C dan ini juga berada dalam jarak normal. Takrif kualitatif tidak menunjukkan keamatan penyakit, ia hanya mendedahkan agen penyebab hepatitis C dalam RNA. Analisis ini diulangi selepas rawatan untuk mengesahkan pemulihan sebenar.

Penyimpangan

Sekiranya antibodi JgM ke RNA HCV hadir, ini menunjukkan jangkitan yang membina. Penyakit ini pada masa yang sama meneruskan akut atau kronik, yang ditunjukkan dalam pelbagai peringkat. Sekiranya penurunan jumlah antibodi dicatatkan, analisis akan menunjukkan bahawa hasil rawatan dicapai semasa pemulihan. Hanya kes-kes palsu yang positif yang jarang ditemui dalam diagnosis. Mereka ditemui pada wanita semasa kehamilan dan pada orang dengan penyakit berjangkit lain.

Kajian PCR untuk hepatitis C: jenis, tanda, transkrip

Hepatitis C virus adalah penyakit serius yang berlaku dengan kerosakan kepada hati. Dalam lapan puluh peratus pesakit, ia menjadi kronik. Virus ini mengalar di sel hati - hepatosit - dan menyebabkan kematian mereka. Tisu yang mati digantikan dengan tiub tisu penghubung, fibrosis berkembang.

Apabila fibrosis berkembang, hati tidak dapat melaksanakan fungsinya, sirosis hati bermula, yang berbahaya kerana komplikasinya: peningkatan tekanan dalam sistem vena portal, pendarahan gastrousus, pembekuan darah terjejas, perubahan mental akibat kerosakan pada inti otak.

Penyebab penyakit itu adalah jangkitan oleh virus dari keluarga Flaviviridae, yang tergolong dalam jenis virus RNA. Ini bermakna bahawa bahan genetik yang mana protein patogen disintesis dikodkan dalam molekul asid ribonucleik. Jangkitan berlaku melalui darah, secara seksual, dan dari wanita hamil kepada janin. Malangnya, jumlah masa yang mencukupi dapat berlalu antara jangkitan dan permulaan pengeluaran antibodi - dari dua minggu hingga enam bulan. Ini tidak membenarkan menentukan jangkitan dengan kaedah immunoassay dan memulakan rawatan pada peringkat awal.

Apakah analisis PCR?

PCR adalah kaedah analisis molekul, yang membolehkan untuk mengesan bahan genetik patogen yang sudah ada pada minggu pertama selepas jangkitan menggunakan tindak balas rantai polimerase. Kajian ini mempunyai kekhususan tinggi, ketepatan, dan membolehkan bukan sahaja untuk menentukan kehadiran atau ketiadaan virus, tetapi juga kepekatan dan genotipnya.

Untuk kajian ini, darah pesakit diambil di mana RNA virus berpotensi terletak. Primer ditambahkan ke darah - sintesis sintetik dari gen yang dikehendaki dari panjang yang kecil, dan polimerase RNA adalah enzim khas yang berulang kali meningkatkan jumlah bahan genetik patogen. Menggunakan alat khas, beberapa kitaran pemanasan dan penyejukan dijalankan. Kemudian bahan itu dianalisis dan dibandingkan dengan gen yang diketahui virus, berdasarkan kesimpulan dibuat tentang kehadiran atau ketiadaan jangkitan.

Jenis analisis PCR untuk hepatitis C

Terdapat tiga jenis analisis PCR:

  1. Analisis kualitatif PCR. Tahap pertama kajian ini. Ia membolehkan anda mengenal pasti bahan genetik virus dalam darah.

  • Analisis kuantitatif PCR. Membolehkan anda untuk menentukan beban virus - kepekatan bahan genetik patogen dalam satu mililiter darah. Kajian ini dilakukan sebelum permulaan terapi, dan kemudian pada pertama, keempat, kedua belas, dan (jika kursus itu panjang) minggu ke-24 rawatan untuk menilai keberkesanannya.

  • Genotyping Agen penyebab hepatitis C sering dan mutasi mutasi. Terdapat tujuh varian genotip virus yang terdapat di planet ini. Di Rusia, jenis pertama, kedua dan ketiga adalah perkara biasa. Setiap genotipe mempunyai ketahanan yang berbeza terhadap terapi, contohnya, keberkesanan rawatan jenis pertama adalah enam puluh peratus, dan untuk kedua dan ketiga angka ini mencapai delapan puluh lima. Oleh itu, untuk memilih ubat-ubatan yang sesuai dan menetapkan kursus rawatan untuk tempoh yang mencukupi, adalah perlu untuk menentukan dengan tepat jenis virus pesakit yang dijangkiti.
  • Petunjuk untuk analisis PCR untuk hepatitis C

    Kajian PCR ditetapkan dalam kes berikut:

    • hubungan dengan orang yang sakit di mana jangkitan boleh berlaku;
    • enzim positif immunoassay;
    • tanda-tanda sirosis: perubahan saiz hati, pembesaran limpa, penampilan pada abdomen dari plexus vena kulit subkutan;
    • penampilan gejala kerosakan hati: sakit di perut kanan, menguning kulit;
    • peningkatan aktiviti ALT dan AST dalam analisis biokimia darah;
    • sebelum memulakan rawatan untuk menentukan viral load;
    • untuk memantau keberkesanan terapi antiviral;
    • selepas rawatan untuk mengawal berulang;
    • di hadapan didiagnosis hepatitis B, untuk mengecualikan kerosakan hati yang bercampur.

    Penjelasan kajian PCR mengenai hepatitis C

    Penyahkodan analisis PCR dan immunoassay enzim untuk hepatitis C perlu dilakukan oleh pakar hepatologi atau pakar penyakit berjangkit. Menganalisis keputusan PCR diperlukan dalam kombinasi dengan data analisis biokimia darah, biopsi dan ultrasound. Hanya doktor yang berkelayakan sahaja yang dapat menganalisis hasil penyelidikan dan, berdasarkan kepada mereka, menetapkan rawatan yang betul.

    Menyahkod analisis kualitatif.

    Dalam bahan biologi yang dianalisis mendapati bahan genetik patogen. Jangkitan disahkan.

    Jangkitan tidak ada, atau jumlah RNA patogen berada di bawah batas kepekaan.

    Menyahkod analisis kuantitatif.

    Kadar biasa untuk orang yang sihat. Ini bermakna bahawa tiada RNA hepatitis C dalam bahan di bawah kajian, atau tumpuannya adalah di bawah ambang sensitiviti kajian.

    Kepekatan RNA adalah di bawah julat kuantifikasi. Hasil ini ditafsirkan dengan berhati-hati, menghubungkannya dengan data dari kajian lain, sering kali dikaji semula.

    Tahap viral load pada kepekatan tertentu dianggap rendah. Biasanya, penurunan dalam jumlah virus bermakna terapi berjaya.

    Lebih daripada 8 * 10 ^ 5 IU / ml

    Tahap viral load pada kepekatan tertentu dianggap tinggi.

    Lebih daripada 2.4 * 10 ^ 7 IU / ml

    Jumlah RNA adalah di atas batas atas rentang kuantifikasi. Tidak mustahil untuk membuat kesimpulan mengenai tahap beban virus dengan hasil ini. Biasanya dalam kes sedemikian, ujian diulang dengan pengenceran sampel darah.

    Menyahkod genotip.

    RNA dikesan genotip tertentu

    Virus Hepatitis C genotip dan subjenis tertentu dikesan dalam biomaterial. Hasilnya dikodkan dalam angka Roman dan huruf Latin, misalnya - 1a, 2b. Secara keseluruhan terdapat tujuh genotip dan enam puluh tujuh subtipe, namun, di Rusia terdapat hanya tiga jenis pertama.

    RNA virus Hepatitis C dikesan

    RNA ditemui dalam darah genotip langka untuk Rusia, yang tidak boleh dikaitkan dengan jenis pertama, kedua, atau ketiga. Lebih banyak penyelidikan diperlukan.

    Keputusan ini menunjukkan bahawa pesakit sihat, atau jumlah RNA patogen terlalu kecil.

    Ia adalah mungkin bahawa analisis PCR untuk hepatitis C adalah negatif, dan enzim imunosorben berkaitan enzim mengenal pasti antibodi terhadap virus. Ini bermakna bahawa pesakit mempunyai hepatitis C akut dan pulih sendiri. Kira-kira dua puluh kes jangkitan mengakibatkan pemulihan spontan jika badan pesakit mempunyai daya tahan yang cukup terhadap jangkitan.

    Walaupun PCR adalah ujian yang sangat tepat, hasilnya mungkin diputarbelitkan dalam situasi berikut:

    • darah itu diangkut ke makmal dalam keadaan yang tidak sesuai, suhu telah dilanggar;
    • sampel biomaterial tercemar;
    • terdapat kesan sisa heparin dan antikoagulan lain dalam darah;
    • Penyiasat didapati sebagai inhibitor - bahan yang melambatkan atau menghentikan tindak balas rantai polimerase.

    Kelebihan PCR berbanding kaedah lain

    1. Diagnosis pada peringkat awal. PCR mengesan bahan genetik agen penyebabnya. Menggunakan analisis immunofluorescence, hanya imunoglobulin yang dapat ditentukan - bahan yang dihasilkan oleh tubuh sebagai tindak balas terhadap jangkitan. Dalam kes jangkitan dengan hepatitis C, selang antara jangkitan dan permulaan tindak balas imun boleh beberapa minggu dan bulan, pada masa ini ELISA akan tidak berkesan. PCR akan memberi jawapan pada minggu pertama selepas jangkitan.

  • Kebarangkalian kebarangkalian rendah. Dalam bahan di bawah kajian, menentukan kawasan bahan genetik, yang merupakan ciri hanya satu jenis patogen. Ini menghapuskan hasil palsu. Apabila ralat ELISA adalah mungkin, kerana jenis antibodi yang sama boleh dibebaskan terhadap virus yang berlainan - antibodi tersebut dipanggil cross-antibodi.

  • Kepekaan yang tinggi. PCR memungkinkan untuk mengesan RNA agen penyebab walaupun dalam kuantiti minimum. Hal ini memungkinkan untuk mengenal pasti jangkitan tersembunyi.
  • Bagaimana untuk menyediakan derma darah untuk kajian PCR

    Untuk analisis PCR hepatitis C, darah vena dikumpulkan. Biasanya, dua bahagian darah diambil dari urat pesakit pada satu masa: pertama dihantar untuk PCR dan yang kedua oleh ELISA. Ini dilakukan untuk lebih tepat menilai berapa pesakit dijangkiti virus, dan bagaimana kekebalan melawannya.

    Biasanya pesakit dikehendaki mematuhi peraturan berikut:

    • ujian darah diambil pada waktu pagi;
    • Jeda antara makanan terakhir dan derma darah hendaklah lapan hingga sepuluh jam;
    • dua atau tiga hari sebelum analisis, adalah perlu untuk meninggalkan makanan goreng dan lemak, dan alkohol;
    • selama dua puluh empat jam sebelum analisis, pesakit harus menghindari usaha fizikal: jangan membawa beban, jangan pergi ke gim atau kolam renang.

    Analisis kualitatif dan kuantitatif PCR untuk hepatitis C: negatif, positif, transkrip

    Hepatitis C adalah penyakit hati virus yang disebabkan oleh HCV flavivirus (dari bahasa Inggeris hepatitis C virus), struktur yang mengandungi molekul asid ribonucleic (RNA). RNA membawa kod genetik virus. Kehadirannya membolehkan analisis PCR untuk hepatitis C.

    Bahaya HCV untuk seseorang terletak pada hakikat bahawa tetingkap serologi yang disebut (masa antara jangkitan dan penampilan reaksi dari sistem imun) boleh agak lama - dari beberapa minggu hingga enam bulan.

    Ia tidak mengesan jangkitan dan memulakan rawatan mengikut masa.

    Bergantung kepada ciri-ciri individu organisma, pembawa HCV dapat nyata dalam bentuk akut, dan juga berlaku sebagai penyakit kronik yang memerlukan rawatan yang panjang dan mahal. Apabila antibodi ke HCV dikesan, satu siri ujian makmal dilakukan, termasuk PCR untuk hepatitis C. Ujian ini dilakukan kepada semua orang yang antibodi darah ke HCV telah dijumpai.

    Apakah analisis PCR?

    Analisis makmal PCR untuk hepatitis C - kajian bahan biologi untuk mengesan kehadiran flavavirus.

    Tindak balas rantai polimerase (sebagai singkatan bermaksud) menunjukkan nilai kuantitatif lesi viral tubuh, ciri kualitatifnya, serta genotip virus yang mengandungi RNA.

    Secara asasnya, serta berdasarkan analisis tambahan, kaedah dan tempoh terapi, serta faktor epidemiologi (tahap risiko penghantaran ke pembawa lain) ditentukan.

    Apakah Analisis RNA Hepatitis C?

    Hepatitis C PCR juga dipanggil analisis RNA (RNA HCV), kerana Flavavirus mengandungi zarah RNA dengan saiz virion 30-60 nm. Salah satu ciri mikroorganisma ini adalah kecenderungan mutasi tinggi.

    Setiap subspesies (genotip) virus mempunyai rintangan yang berbeza, yang menyebabkan kaedah rawatan yang berbeza dan sifat prognosis lanjut untuk pesakit.

    Bahan biologi (darah vena) diberikan pada perut kosong dan, sebagai peraturan, diuji dengan kaedah PCR Masa Nyata (diagnostik masa sebenar yang sangat sensitif dengan had pengesanan yang lebih rendah sebanyak 15 IU / ml menggunakan sistem automatik tertutup).

    Terdapat ujian lain, contohnya COBAS AMPLICOR dengan kepekaan 50-100 IU / ml. Bagi mana-mana ujian makmal, ambang kepekaan adalah penting, i.e. keupayaan reagen untuk mengesan kepekatan minimum virus dalam bahan biologi.

    Jenis analisis untuk hepatitis C oleh PCR

    Hepatitis C PCR merangkumi tiga komponen penting:

    • analisis kualitatif;
    • analisis kuantitatif;
    • genotyping.

    Ujian ini membolehkan anda menentukan sifat viremia, serta ciri genetik patogen. Bergantung pada sensitiviti sistem diagnostik, kajian ini dilakukan sekali, dan kadang-kadang ujian kedua dilakukan dengan reagen yang lebih sensitif untuk mengesahkan atau memperbaiki hasilnya.

    PCR berkualiti tinggi hepatitis C

    Kualitatif analisis Hepatitis C PCR adalah satu lagi nama umum untuk analisis tindak balas rantai polimerase. Kepekaan standard ujian, yang membolehkan untuk mengesan kehadiran lesi virus, berada dalam lingkungan 10-500 IU / ml.

    Analisis PCR negatif untuk hepatitis C menunjukkan bahawa kepekatan virus di dalam darah pesakit adalah di bawah ambang kerentanan sistem diagnostik.

    Jika PCR berkualiti tinggi memberikan jawapan "tidak dikesan", maka untuk rawatan berikutnya adalah penting untuk mengetahui ambang kepekaan reagen.

    Fraksi protein untuk flavavirus muncul lebih lama.

    PCR Kuantitatif Hepatitis C

    Kuantitatif PCR hepatitis C adalah penunjuk viral load, yang mencerminkan tahap kepekatan RNA flavavirus dalam tubuh. Ini adalah penunjuk yang menunjukkan berapa banyak serpihan RNA virus yang terkandung setiap sentimeter padu darah. Hasil PCR hepatitis C RNA dalam ujian kuantitatif dalam sistem konvensional ditunjukkan dalam unit antarabangsa per mililiter (IU / ml) dan dapat direkam dalam berbagai cara, contohnya, 1.7 juta atau 1.700.000 IU / ml.

    Diagnostik PCR kuantitatif hepatitis C ditetapkan kepada pesakit sebelum memulakan terapi antiviral, dan pada minggu 12 rawatan, untuk menilai keputusan kaedah yang dipilih untuk berurusan dengan HCV. Beban virus membolehkan menentukan tiga petunjuk penting penyakit ini:

    • infektif, iaitu. tahap risiko penghantaran virus dari satu pembawa ke yang lain (semakin tinggi kepekatan RNA flavavirus, semakin tinggi kebarangkalian menjangkiti orang lain, misalnya, melalui hubungan seksual);
    • kaedah dan keberkesanan rawatan;
    • tempoh dan prognosis terapi antiviral (semakin tinggi beban virus, semakin lama rawatan berlangsung).

    Diagnostik PCR kuantitatif hepatitis C bergantung kepada jenis ujian makmal dan ambang kepekaannya. Batasan yang lebih rendah dari norma dianggap sebagai penunjuk hingga 600.000 IU / ml, nilai rata-rata berada dalam kisaran 600.000-700.000 IU / ml. Keputusan 800.000 IU / ml dan ke atas dianggap sebagai paras tertinggi virus yang mengandung RNA.

    Genotyping

    Oleh kerana aktiviti mutasi HCV yang tinggi, semasa ujian, adalah penting untuk mengenal pasti genotip virus yang ada di dalam darah pesakit. Secara keseluruhan, 11 genotip virus hepatitis C telah direkodkan di planet ini, termasuk banyak subspesies (subtipe). Di wilayah Persekutuan Rusia mengagihkan 1,2 dan 3.

    RNA PCR Hepatitis C bersama-sama dengan genotip adalah komponen penting dalam analisis, kerana membolehkan doktor menentukan rintangan (rintangan) virus itu, memilih ubat-ubatan yang sesuai dan menetapkan kursus rawatan.

    Genotyping juga membolehkan anda secara tidak langsung menentukan keadaan hati. Sebagai contoh, 3 genotip HCV sering diiringi oleh steatosis, di mana lemak terkumpul di dalam sel-sel organ.

    Ujian darah untuk PCR untuk hepatitis C harus menghasilkan angka yang menentukan genotip tersebut. Tanggapan makmal boleh mengatakan "tidak ditaip" - dan ini bermakna bahawa virus adalah dalam darah manusia yang tidak dikesan oleh sistem ujian. Ini mungkin menunjukkan bahawa genotip itu tidak tipikal untuk kawasan geografi yang diberikan. Dalam kes ini, anda perlu mengulangi analisis dengan kepekaan yang tinggi terhadap sistem diagnostik.

    Pengkodan analisis PCR untuk hepatitis C

    Ujian untuk dekripsi kuantitatif hepatitis C PCR boleh berdasarkan pada data di atas. Apabila memperoleh keputusan ujian makmal, data berikut biasanya ditulis:

    • "Found" / "tidak dijumpai" (PCR berkualiti tinggi untuk hepatitis C);
    • bilangan pecahan yang mengandungi RNA, contohnya 831.680 ME / ml (analisis PCR kuantitatif);
    • angka yang menentukan genotip HCV, sebagai contoh - 1, 2, 3, 4;
    • Nama ujian paling kerap adalah Real-time.

    Yang paling penting dalam menafsirkan analisis PCR untuk hepatitis C adalah perenggan kedua, yang menunjukkan beban virus, yang menentukan prognosis, kaedah dan tempoh rawatan.

    Sekiranya ujian PCR untuk hepatitis C adalah negatif, dan ELISA adalah positif - apakah maksudnya?

    Untuk menguraikan ujian makmal, adalah penting untuk menghubungi pakar hepatologi atau pakar penyakit berjangkit yang akan menerangkan maklumat yang diperolehi mengikut jenis sistem diagnostik dan kepekaan ambangnya. Dalam amalan perubatan, terdapat banyak data ujian darah yang boleh mengelirukan seseorang tanpa pendidikan perubatan.

    Sebagai contoh, jika ujian untuk hepatitis C PCR adalah negatif, dan ELISA adalah positif, ini mungkin bermakna tiada HCV dalam darah pesakit pada masa ini, tetapi sebelum ini ia mengalami bentuk akut hepatitis C. Adalah dipercayai bahawa ujian imunosorben berkaitan enzim positif (ELISA) menunjukkan bahawa terdapat antibodi dalam darah yang telah dihasilkan selepas pencerobohan virus pada masa lalu. Tetapi dalam amalan perubatan moden, analisis ELISA dianggap tidak dapat dipercayai dan sering memberikan hasil tidak tepat, jadi doktor menggunakannya sebagai pemeriksaan utama. Apabila mendiagnosis penyakit, pakar dipandu dengan tepat oleh ujian PCR.

    Video berguna

    Video berikut memberikan penerangan yang sangat terperinci dan menarik mengenai intipati kaedah PCR, bagaimana analisis dilakukan:

    Kesimpulannya

    Untuk analisis PCR untuk hepatitis C, darah vena biasanya diambil. Selalunya terdapat pengambilan bahan biologi berganda - untuk ELISA, dan secara langsung untuk ujian PCR. Untuk keputusan ujian yang betul, pematuhan dengan peraturan asas untuk pensampelan makmal bahan biologi diperlukan:

    • darah untuk analisis diberikan pada separuh pertama hari perut kosong;
    • antara makanan dan pensampelan darah perlu mengambil masa sekurang-kurangnya 8 jam;
    • alkohol dan makanan goreng juga harus dikecualikan sebelum mengambil ujian;
    • pada siang hari sebelum menderma darah, adalah perlu untuk mengelakkan penuaan fizikal yang tinggi.

    Keputusan ujian darah biasanya siap pada keesokan harinya.


    Artikel Sebelumnya

    Hepatitis C dan kehamilan

    Artikel Seterusnya

    Jangkitan virus Hepatitis C

    Artikel Yang Berkaitan Hepatitis